商机详情 -
Vero宿主细胞蛋白（HCP）残留检测方法对比
来源：
发布时间：2025年10月23日
磷脂酶 B 样蛋白 2（Phospholipase B-Like 2，PLBL2/PLBD2），凭借强共纯化能力、高免疫原性及潜在酶活性，被认定为 CHO 宿主细胞蛋白（HCP）中的关键高风险因子之一。当前行业建议，需针对性开发特定检测方法，对这类已知或特定蛋白进行监控，以更有效把控其潜在风险。SHENTEK® CHO PLBL-2 残留检测试剂盒（酶联免疫吸附法）由湖州申科生物自主研发，拥有完全自主知识产权，是一款 CHO PLBL-2 蛋白通用检测试剂盒。该试剂盒适用于对 CHO 表达系统生产的生物制品中，CHO HCP 高风险蛋白 PLBL-2 进行定量检测，且操作步骤少、检测快速，兼具强检测专一性与稳定可靠的性能。
在生物制品质控领域需要基于产品特性与风险分析，聚焦关键质控点开发宿主蛋白残留检测方法。Vero宿主细胞蛋白（HCP）残留检测方法对比
HEK293细胞源自人胚肾细胞，在细胞与基因治疗领域应用较广，例如用于病毒载体生产等。尽管生物制品会经过多步纯化工艺去除相关杂质，但微量残留的宿主细胞蛋白（HCP）仍可能引发机体免疫应答，进而影响产品质量与安全性。因此，需对生产工艺中残留的HEK293 HCP开展定量检测，确保其符合产品放行标准。湖州申科生物的HEK293 HCP残留检测试剂盒（一步酶联免疫吸附法），适用于对HEK293及HEK293T来源生物制品（如重组蛋白类、细胞和基因治疗类等）中的宿主细胞蛋白进行定量检测。该试剂盒检测步骤少、速度快，且具备专一性强、性能稳定可靠的特点。
Sf9宿主细胞蛋白（HCP）残留检测方法学验证深入分析宿主细胞蛋白残留检测的数据，能为生产工艺的优化调整提供明确方向。
依据美国药典 1132 章节规定，HCPs 校准品需具备代表性，能够覆盖实际产品生产工艺中的 HCPs。结合 HCP 免疫检测方法的使用目的与预期风险管理需求，为满足工艺开发、验证需求，同时应对下游工艺可能出现的异常失效或工艺变更情况，建议选用上游发酵工艺末端（如澄清处理后的工艺点）的样本作为 HCPs 来源。实际制备时，可采用空细胞或空载细胞，在模拟实际工艺的预设条件下采集样本，再通过二维电泳、高分辨率质谱等蛋白质组学技术，对模拟工艺与实际工艺下 HCPs 的代表性开展表征分析。越靠近下游工艺，HCPs 的蛋白种类越少，虽更接近成品（DS）中的 HCPs，但这类样本可能无法满足工艺开发与验证需求，也难以覆盖工艺潜在风险，因此通常不推荐使用，或只作为上游工艺 HCPs 免疫检测方法的辅助材料。
大肠埃希氏菌（Escherichiacoli，简称E.coli，又称大肠杆菌）作为模式微生物，在生命科学研究领域应用较多。伴随基因治疗产业的快速发展，它还成为质粒DNA（pDNA）生产的主要宿主菌。质粒样品常规提取工艺中，常使用强碱性溶液进行细胞裂解与蛋白质变性，这种处理使其中的宿主细胞蛋白（HCPs）与传统物理破碎法得到的HCPs差异明显，进而导致采用免疫学原理的检测方法时，残留检测结果偏差较大。湖州申科生物的E.coli克隆菌碱裂HCP残留检测试剂盒，适用于大肠埃希氏菌（即大肠杆菌）克隆菌株的HCPs检测，涵盖DH5α、Top10、JM109等常见菌株。该试剂盒的抗体制备过程中，采用碱裂工艺制备的HCPs免疫动物，得到专属抗体，可用于经碱液裂解工艺处理后的宿主细胞蛋白（HCPs）定量检测。
通用型试剂盒为市售广谱方案，使用前需严格评估抗体对特定 HCP 的覆盖率。
宿主细胞蛋白（HCP）残留监测是生物药物生产中的关键质量属性（Critical Quality Attribute, CQA），需在药物开发与生产阶段对 HCP 的存在实施严格监控、管理及记录。随着生产流程推进，生物制品目标蛋白纯度逐步提升，HCP 含量则相应持续下降，这导致对单抗、融合蛋白等富含目标蛋白的下游工艺样品进行 HCP 分析监测时，难度明显增加。在此背景下，高效的 HCP 富集材料与技术显得尤为重要。SHENTEK®AbunProteoX 是基于磁珠构建的亲和配体，能高效识别并结合目标蛋白；借助磁性纳米颗粒的独特特性，它可快速高效捕获 HCP，大幅提升检测灵敏度。此外，该亲和配体的普遍适用性，让 AbunProteoX 处理多种生物样本时表现优异，可确保样品中存在高浓度目标蛋白时，对低浓度 HCP 的质谱、电泳等检测分析具备准确性与可靠性。
不同技术平台获得的抗体覆盖率水平不一样，一般覆盖率水平从高到低依次IMBS-MS>IMBS-2D>2D-Western Blot。Sf9宿主细胞蛋白（HCP）残留检测方法对比湖州申科生物目前已承接常见宿主类型的HCP定制化开发，如期交付率达到100%。Vero宿主细胞蛋白（HCP）残留检测方法对比
美国药典 <1132> 与欧洲药典 < 2.6.34 > 建议，对即将进入商业化生产（临床 III 期及后续阶段）或生产工艺已稳定的生物制品，采用定制化 ELISA 试剂盒开展宿主细胞蛋白（HCP）残留检测，背后原因主要包括四点：①确保检测方法能充分覆盖实际工艺产生的 HCPs，防止漏检关键杂质；②为更准确的免疫原性与安全性评估提供支持；③提供真实的工艺表征数据，而非推测性数据；④满足商业化生产质量控制对方法一致性的要求。此外，研究人员对当前市场常见的 HCP ELISA 商业化试剂盒进行测试，并将其与 HCP ELISA 定制化试剂盒对比。实验结果显示，不同商业化试剂盒检测同一样品的数值差异明显，且准确性均低于定制化试剂盒 —— 这一结果表明，定制化试剂盒更能满足产品质量控制的实际需求。
Vero宿主细胞蛋白（HCP）残留检测方法对比
下一篇：
热原检测常见问题分析