您好,欢迎访问

商机详情 -

上海通用型宿主细胞蛋白(HCP)残留检测方法对比

来源: 发布时间:2025年10月02日

中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)是生物制品生产中常用的动物细胞表达系统,广泛应用于抗体、重组蛋白、疫苗等产品的制备。采用 CHO 细胞作为宿主进行生产时,难免会引入宿主细胞蛋白(HCP)杂质;即便 HCP 残留量较低,仍可能存在免疫原性,还会带来降低产品蛋白稳定性等风险。因此,需对生物制品中的 HCP 残留进行定量分析,从而保障纯化工艺的一致性与终产品的安全性。SHENTEK®CHO 宿主细胞蛋白(HCP )残留检测试剂盒实现了关键试剂的全国产化,其通过 CHO 细胞(K1&S)补料分批培养工艺制备 HCPs,再以此免疫绵羊获取抗体,适用于检测 CHO 细胞系表达的生物制品(如单抗、重组蛋白、疫苗等)中的 HCP 残留。该试剂盒具有操作步骤少、检测速度快、专一性强、性能稳定可靠的特点。
筛选HCP试剂盒需考虑线性稀释(一步法尤重)抗基质干扰稳定检测值、批间一致性、工艺匹配性等因素。上海通用型宿主细胞蛋白(HCP)残留检测方法对比

上海通用型宿主细胞蛋白(HCP)残留检测方法对比,宿主细胞蛋白(HCP)残留检测

MDCK(Madin-Darby Canine Kidney,马丁达比犬肾上皮细胞)细胞系是一种来源于犬肾的长久性细胞系,其被普遍用作流感病毒增殖与纯化、流感疫苗生产等过程中的细胞基质。基于其易感性、高产高滴度、无适应性突变、易驯化等优势,MDCK细胞成为公认的适合于流感病毒毒株分离和流感疫苗生产的细胞系。与其他产品杂质一样,MDCK宿主残留蛋白(HCP)可能对生物制品的安全性和有效性产生不利影响,因此在生产监测、产品放行等过程中需要对其进行定量研究并进行严格控制。SHENTEK® MDCK HCP残留检测试剂盒(一步酶联免疫吸附法)是湖州申科生物自主研发的、具有完全自主知识产权的、实现关键试剂全国产化的MDCK HCP通用检测试剂盒。本试剂盒适用于基于MDCK细胞基质的病毒增殖及纯化、疫苗生产等过程中MDCK宿主残留蛋白的定量检测。本试剂盒操作步骤少,快速,检测专一性强,性能稳定可靠。
HEK293宿主细胞蛋白(HCP)残留检测供应厂家HCP 检测试剂盒开发要兼顾法规合规、物料充足稳定、团队专业响应与案例积累,形成系统性保障能力。

上海通用型宿主细胞蛋白(HCP)残留检测方法对比,宿主细胞蛋白(HCP)残留检测

湖州申科生物CHO-K1HCP残留检测试剂盒(一步酶联免疫吸附法),采用固相酶联免疫吸附法原理,可对CHO-K1细胞生产的生物制品中宿主残留蛋白进行定量检测。检测时,向预包被抗CHO-K1HCPs绵羊多抗的酶标板中,加入校准品或待测样品、HRP标记的抗CHO-K1HCPs绵羊多抗共同孵育。洗涤后加入TMB底物显色,随后用终止液终止酶促反应;再用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,该吸光度与校准品或待测样品中HCPs浓度呈正相关,依据校准品拟合的剂量-反应曲线,即可算出待测样品中HCPs的浓度。该试剂盒对待测样品无需特殊处理,通过合适稀释比例的适用性验证,即可直接使用。且试剂盒操作步骤少、检测快速,同时具备专一性强、性能稳定可靠的特点。

大肠杆菌具有遗传性状清晰,易于培养和控制,表达水平高,成本低,周期短等特点,是优先的经济实惠的蛋白表达系统,K-12系列和B系列菌株是工业规模上常用于生物工程的E.coli细菌株。K-12菌种、所衍生出的DH5α、Top10、JM109等菌株,可用于大量生产质粒DNA并进一步制备细胞基因治疗产品和病毒载体类疫苗。源于B系的菌株,如BL21,更适用于高效转染表达载体和常规蛋白的表达,如:病毒蛋白、重组蛋白疫苗、细胞因子、酶类等产品。湖州申科生物针对这两种菌株的特点,分别开发了E.coli表达菌HCP残留检测试剂盒和E.coli克隆菌碱裂HCP残留检测试剂盒。
定制化宿主细胞蛋白残留检测试剂盒抗原校准品更具代表性,减少HCP漏检和定量误差。

上海通用型宿主细胞蛋白(HCP)残留检测方法对比,宿主细胞蛋白(HCP)残留检测

宿主细胞残留蛋白(HCP)检测是生物制品质量控制的关键环节,采用基于抗体的免疫学方法(如ELISA)。然而,不同试剂盒之间的检测结果常存在明显差异,关键原因在于其依赖的关键组分——HCP校准品和检测抗体——本身制备与表征的高度可变性。校准品作为定量的基准,其复杂性极大。不同供应商在制备时使用的细胞来源、培养及表达条件、宿主蛋白提取纯化工艺(例如目标产物去除策略)差异明显,导致校准品的组成、代表性及稳定性各不相同。同样,检测抗体(尤其是多抗)通过免疫动物获得,其特异性与覆盖度受免疫原、动物应答个体差异、免疫方案及后续抗体筛选/纯化过程的影响巨大,不同批次或来源抗体的识别谱(如对不同HCP的亲和力、对低丰度蛋白的灵敏度)存在本质差别。正是这些关键组分固有的明显变异度,导致不同试剂盒对同一样本的检测结果在数值上、甚至特定HCP的检出能力上可能出现较大偏差。因此,为确保检测结果真实反映自身产品的HCP残留情况,企业应结合自身产品特性和工艺,对不同试剂盒进行详细的平行比对与适用性评估,以筛选出匹配度较高的检测方案。
湖州申科全自动 HCP ELISA 系统实现从加样到检测自动化,提升效率。江苏宿主细胞蛋白(HCP)残留检测桥接验证

SHENTEK® AutoElisa-4K HCP 检测自动化系统可减少人为误差,满足 21 CFR Part 11 数据管理要求。上海通用型宿主细胞蛋白(HCP)残留检测方法对比

湖州申科生物通过自主可控的供应链体系与严格验证的技术性能,确保HCP检测试剂盒的长期稳定供应与优异的分析能力。一方面,公司实现了关键物料的自研自产:校准品采用冻干工艺大规模制备,可稳定保存10年以上;抗体通过大动物免疫获得,产量可满足≥10,000盒试剂盒的生产需求,保障同批次抗体持续供应超过10年;试剂盒经多批次验证显示良好的批内与批间一致性。另一方面,所有产品参考ICH Q2(R2)和ICH M10法规要求完成验证:以E.coli HCP产品为例,其线性范围(243-1 ng/mL)的R²>0.999,各浓度点回收率偏差≤5%;准确度达81.2%-111.6%,中间精密度CV值5.7%-12.4%;LLOQ低至1.5 ng/mL,且对多种宿主细胞(如CHO、HEK293等)的交叉反应均低于检测限。同时,通过二维电泳(检出826个蛋白点)与质谱法(鉴定2204个蛋白点)双重表征校准品,并采用IMBS-2D(>70%)与IMBS-MS(84.7%)正交技术验证抗体覆盖率,从源头确保检测结果的全面性与可靠性。
上海通用型宿主细胞蛋白(HCP)残留检测方法对比

扩展资料

宿主细胞蛋白(HCP)残留检测热门关键词