商机详情 -
江苏细菌内毒素检测常见问题分析
来源：
发布时间：2025年11月24日
重组级联试剂（rCR）通过完整模拟天然鲎试剂的酶促级联反应路径，实现高效且特异的内毒素检测。其反应机制为：内毒素首先活化重组 C 因子，活化的 C 因子进一步活化重组 B 因子，随后活化重组凝固酶原转化为凝固酶，再催化显色底物产生黄色信号（405nm 波长可检测）。这一级联放大过程有效提升了检测灵敏度，即使微量内毒素也能产生可识别信号。与单因子的重组 C 因子法（rFC）相比，rCR 的多因子级联反应抗干扰能力更强，尤其对复杂基质样品（如高蛋白单抗、疫苗）表现更优。同时，rCR 剔除了天然鲎试剂中的 G 因子，避免了与 β-D 葡聚糖的非特异性反应，从根本上减少假阳性结果，保障检测数据的可靠性。
内毒素指示剂（ECV）是冻干脂多糖，监测制药工艺高温除内毒素效果。江苏细菌内毒素检测常见问题分析
内毒素检测方法易受样品基质干扰，法规要求在方法应用前必须进行干扰验证，选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度，作为供试品干扰试验种添加的内毒素浓度计算回收率，若回收率在 50%-200% 范围内，表明无明显干扰；若回收率异常，需通过过滤、中和、透析、加热处理等方式优化样品前处理。方法学确认还需涵盖线性范围（如 0.005-5 EU/mL）、精密度（批内 CV≤15%）、检测限（LOD≤0.01 EU/mL）等指标，确保方法在实际样品检测中稳定可靠，符合《美国药典》 <85>、《中国药典》通则 1143 等药典要求。
江苏非动物源内毒素检测动态显色法鲎试剂细菌内毒素检查法用鲎试剂检测或量化革兰阴性菌内毒素，判断供试品限量是否合规。
内毒素检测方法验证需覆盖多项参数，确保方法可靠：线性范围需包含样品预期浓度（如 0.01-10 EU/mL），相关系数 R²≥0.98；准确度通过加标回收率评估，应在 50%-200% 范围内；精密度包括批内和批间精密度，CV 值均应≤15%；检测限（LOD）需低于产品限值的 1/2（如限值 0.5 EU/mL，LOD 应≤0.25 EU/mL）；专属性需证明无干扰物质影响（如 β- 葡聚糖、蛋白质不引发假阳性）。验证通过后，方法需经实验室负责人批准方可使用，且定期需进行一次回顾性验证，确认方法持续有效。
重组级联试剂作为内毒素检测鲎试剂的理想替代方案，其具备的优势有：①优化的G因子级联反应，无G因子旁路干扰。采用基因重组技术表达鲎血细胞中的C因子（Factor C）、B因子（Factor B）和凝固酶原（Proclotting enzyme），无G因子旁路干扰，排除1，3-β-D葡聚糖假阳性风险。②依然采用动态显色法原理，可沿用天然鲎试剂检测设备。重组级联试剂（rCR）,与天然鲎（动态显色法）具有相同的操作流程、检测设备、分析方法，用户可以沿用天然鲎的仪器、软件、耗材、人员培训、验收程序等，无需投入额外成本。③具有与天然鲎的相同反应机制，检测结果具有等效性。完全模拟了天然鲎试剂的酶联反应，由3种蛋白组成的级联反应机制提供了信号放大的过程，确保了检测的准确性和灵敏度。湖州申科按照药典要求进行替代方法验证，无缝衔接技术转移，助力用户从方法验证到工艺落地，从数据合规到全球申报。
内毒素检查用水经二次精制，无菌无热原，避免检测假阳假阴。
SHENTEK®重组级联试剂为内毒素检测高效解决方案。法规层面，符合美国药典（USP）、欧洲药典（EP）及日本药典（JP）要求，满足国际标准检测需求。抗干扰性强，与天然鲎具有相同反应机制，检测结果等效，适配复杂样本场景。特异性表现突出，不含 G 因子，避免与 β - D 葡聚糖反应产生假阳性，保障结果可靠。检测灵敏度高，线性范围达 0.005 - 5EU/mL ，可准确捕捉低浓度内毒素。反应快速，60分钟内即可完成检测，提升检测效率。兼容性佳，能兼容动态显色法的酶标仪，无需额外投入设备成本。关键的是，无动物源试剂，遵循 3R 原则（减少、替代、优化），不依赖鲎血，解决资源依赖问题，实现长期稳定供应。且通过重组表达生产，批次差异小，重复性好，稳定性高，为生物制品、制药等行业内毒素检测提供可靠、可持续的工具，助力企业把控质量，契合绿色环保与高效检测的双重需求，在保障检测准确性与合规性的同时，推动行业向更环保、更高效方向发展。
内毒素检测方法多样，影响因素及实验干扰较多，包括实验操作步骤、样品处理等方面。北京抗体药物内毒素检测技术服务“低内毒素回收（LER）”可能导致内毒素检测假阴性，对患者用药安全构成潜在隐患。江苏细菌内毒素检测常见问题分析
样品中的脂质体与表面活性剂，会通过不同机制干扰内毒素检测，需结合基质特性选择处理方式。脂质体的干扰体现在两方面：一是脂质双分子层会包裹内毒素，使其无法与鲎试剂接触，导致假阴性；二是脂质体的胶体性质会干扰凝胶形成（凝胶法）或光度信号读取（浊度 / 显色法）。针对完整脂质体制剂，可先用生理盐水稀释降低脂质体浓度，减少包裹作用；若需彻底释放内毒素，还可使用 DMSO、乙醇或甲醇等溶剂裂解脂质体，暴露被包裹的内毒素。表面活性剂的干扰则源于其对物质结构的改变：既可能破坏内毒素的聚集体结构，影响其活性；又可能导致鲎试剂中蛋白质变性，抑制反应。对此，可通过内毒素检查用水或生理盐水稀释样品，降低表面活性剂浓度，消除其对结构的破坏作用。这些针对性处理能有效解决脂质体与表面活性剂的干扰，确保内毒素检测结果真实可靠。
江苏细菌内毒素检测常见问题分析
上一篇：
江苏化学制药内毒素检测风险评估
下一篇：
江苏合规性内毒素检测方法验证