利用斑马鱼模型评价神经保护作用【评价原理】神经损伤常表现为偏瘫、失语、智力障碍或昏迷,甚至死亡。斑马鱼是一种与人类同源性较高的脊椎动物,大脑具有典型脊椎动物脑部形态学特征,髓鞘结构特征和少突胶质细胞分化过程与哺乳动物高度一致。而且斑马鱼生长发育周期短,神经系统简单,有利于开展神经保护剂的研究。霉酚酸吗啉乙酯可以抑制斑马鱼神经元轴突的生长,干扰神经及细胞的迁移和导致发育畸形,使神经元细胞凋亡。经过特异性荧光染色(凋亡细胞呈绿色),神经损伤的斑马鱼在脑和脊髓部位会布满凋亡细胞,比正常斑马鱼多很多,可以明显被观察到。斑马鱼模型评价急性毒***品不良反应评价中心
正常成人的心率在每分钟60~100次之间,如果低于60次称为心动过缓,是心律失常的一个重要类型,患者平时有头晕、乏力、倦怠、精神差的症状。研究表明,斑马鱼心血管系统的发育与人高度相似,虽然斑马鱼是单心房单心室,但其心脏结构及功能与人高度保守。同时,由于斑马鱼具有透明易观察等优点,开始被大量应用于心血管疾病研究和药物心血管毒性评价当中。维拉帕米能阻滞心肌细胞慢通道,抑制Ca2+向细胞的内流,阻碍心脏慢反应电活动,降低舒张期去极化速度,抑制窦房结的自律性,减慢心率;亦能延长房室结的有效不应期,减慢房室传导。用解剖显微镜下观察斑马鱼心率,模型对照组斑马鱼心率较正常斑马鱼明显减慢。体外药效学评价评价血糖、血脂高血管壁增厚改善功效。
我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和药物组。其中正常对照组未摄入维拉帕米,模型对照组与药物组都摄入了等量的维拉帕米(维拉帕米通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。药物组先摄入地高辛之类的改善心动过缓药物再摄入维拉帕米。服用改善心动过缓药物后再加入维拉帕米共同处理至实验终点后,我们对斑马鱼统计斑马鱼的心率。可以看到,模型对照组心率明显减慢,服用药物组的心率与正常对照组比较相似,没有明显的心率减慢。
药物的临床疗效一般通过疗效观测指标来记录,而疗效评价可以是某一疗效观测指标的直接测量结果,更多的是在直接测量结果基础上转化而来的、特定的评价指标来评价。同一疗效观测指标,可以转化出多种疗效评价指标,不同的疗效评价指标在药物有效性确证中的作用不同和地位不同,有的可以作为主要疗效指标,有的则作为次要疗效指标。如某一适应证的评价量表,以前后的减分值为主要疗效指标,而以50%的减分率的患者比例为次要疗效指标。而另一适应证的评价量表,以积分变化到某一积分值以下患者的比例为主要疗效指标,而前后的减分值比较为次要疗效指标。关于药物安全性的评价。
基于斑马鱼模型实验,可进行活性化合物发现、高通量药物筛选、药效评价、安全性评价、生物学质量控制等临床前研究,实验周期短、成本低,结果直观,助力医药企业的药物研发、品控及宣传推广。利用斑马鱼模型评价氧化应激。斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。当生物暴露在环境污染物中,生物可能会发生氧化应激,主要表现为活性氧(ROS)产生和消耗的不平衡。在需氧生物的活细胞中,活性氧被一种由水和脂溶性低分子量自由基清除剂、特异性抗氧化酶组成的抗氧化防御机制解。应用ROS特异性荧光检测试剂,它的水解产物能被ROS氧化为高荧光物质,用多功能酶标仪检测荧光值反映氧化应激的程度。本方法已被授予国家发明专利。利用斑马鱼模型评价糖尿病神经炎症消退功效。药物功效实验多少钱
新一轮基本药物目录调整在即。药品不良反应评价中心
肠道消化是食物在消化道中分解的过程,包括机械性消化(通过消化道肌肉搜索将食物与消化液混合并向消化道远端推送)和化学性消化(通过消化腺分泌的消化酶将大分子分解为小分子物质的过程)。肠道内的消化液包括胰脂肪酶、胰蛋白酶、胰淀粉酶等。在受精后的26-126h,斑马鱼肠道的管腔形成,内胚层分化出连续的有功能的肠道上皮。斑马鱼肠道肌肉发达,可分为两层平滑肌,有利于食物的蠕动消化。通过特异性的检测试剂盒检测OD值,可以量化斑马鱼体内胰脂肪酶和胰蛋白酶含量。药品不良反应评价中心