对于铜绿假单胞菌的检测,要注意将绿假单胞菌检测板上层膜不干胶标签部分揭开,用无菌吸管吸取1毫升样品稀释液均匀滴加到纸片上,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,静置2分钟左右,待样品稀释液完全被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两个检测板作为重复。将检测板叠在一起,倒置于恒温培养箱内,36摄氏度~1摄氏度,培养15~24h。铜绿假单胞菌又称绿脓杆菌,是一种常见的条件致病菌,属于非发酵革兰氏阴性杆菌。若为实验室长期保存菌种,因传代频繁可发生无色素变种。较低温甘油保存法和半固体保存法两种方法保存的菌种42摄氏度生长试验阳性,氧化酶阳性,氧化葡萄糖产酸不产气,动力阳性,明较液化试验阳性。铜绿假单胞菌属于非发酵革兰氏阴性杆菌。合肥铜绿假单胞菌斜面试管供应报价
铜绿假单胞菌的检测方法成为纤维及其制品检测铜绿假单胞菌的依据。检测铜绿假单胞菌的操作步骤为,制备样液;样液在培养液中,置(35+2)摄氏度增菌培养18h~24h;挑取培养物,于十六烷三甲基溴化铵琼脂平板.上画线接种,置(35土2)摄氏度分离培养18h~24h;取可疑菌落涂片,做革兰氏染色,镜检为革兰氏阴性菌者应进行生化试验。被检样品经增菌、分离培养后,证实为革兰氏阴性杆菌,氧化酶及绿脓菌素试验均为阳性者,即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。如绿脓菌素试验阴性而明胶液化、硝酸盐还原产气和42摄氏度生长试验三者皆为阳性时,仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。合肥铜绿假单胞菌试管供货商铜绿假单胞菌因为经培养后成绿色,与铜生锈后的绿色相同而命名。
铜绿假单胞菌在4摄氏度不生长而在42摄氏度可以生长。触酶实验阳性;365nm紫外灯下显荧光;乙酰胺肉汤实验阳性。噬菌体分型所应用的噬菌体现有24株,分型率达90%。血清学分型利用O抗原进行分型,可分20个血清型。质粒指纹图分析是对同种细菌的不同株进行同源性分析的一种方法。根据细菌携带质粒的情况进行分析。铜绿假单胞菌普遍存在,而在潮湿环境尤甚。铜绿假单胞菌是假单胞菌目中的一种。因为经培养后成绿色,与铜生锈后的绿色相同而命名。以前也叫绿脓杆菌,属于革兰氏阴性杆菌。普遍存在于假单胞菌属的其他细菌以及肺炎杆菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等g-细菌中,是一种良好的交叉保护抗原。
铜绿假单胞杆菌使用应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2、Mg2和血清、蛋白质克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2、Mg2的BSS,如:D-Hanks液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。细胞消化时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响;消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。细菌生物膜在铜绿假单胞菌影响中普遍存在,是导致抗抵菌疗养失败的重要原因之一。铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落。
铜绿假单胞杆菌在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130摄氏度以下的低温中能减少冰晶的形成。细胞复苏时速度要快,使之迅速通过细胞较容易受损的-5~0摄氏度,细胞仍能生长,活力受损不大目前常用的保护剂为二甲亚砜(DMSO)和甘油,它们对细胞无毒性,分子量小,溶解度大,易穿透细胞。合适的铜绿假单胞杆菌温度通常在45~68摄氏度之间(预备实验可2摄氏度间隔进行)。另外,由于在60~68摄氏度间,也有很高的活性,因此可在此温度范围内设定铜绿假单胞杆菌温度,进行2StepPCR。铜绿假单胞杆菌温度为68摄氏度时,每kbp大体可设定30秒~1分钟;当温度设定在68摄氏度以下时,时间设定可稍长一些。铜绿假单胞菌在自然界分布普遍。南宁科研研究铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌一般情况下建议在20度以上的温度储存或者直接-80度冷冻储存。合肥铜绿假单胞菌斜面试管供应报价
铜绿假单胞菌保存使用范围,合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,酿酒酵母菌组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏培养基等。天然培养基由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。半合成培养基在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。合肥铜绿假单胞菌斜面试管供应报价
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