目前有很多保藏方法可以适用于真类菌的保藏,但大体来可以分为让真类菌连续生长的保藏工艺。这一类的保藏工艺的特点是不断的将菌株移植在新鲜的培养基上,并在合适的条件下生长,随后置于一个低温的环境中,一般是4-10摄氏度,这类保藏工艺主要包括斜面移植、油管保藏和蒸馏水保藏法等。二是利用干燥环境保藏菌株的休眠体,如分生孢子、厚垣孢子等,干燥选用的基质可以是空气、硅胶、土壤、沙子等。三是利用抑制菌株代谢活性的办法达到长期保藏,一般是通过脱水降低细胞内水分或低温冷冻,在此过程中关键环节是避免和降低冰晶对细胞造成的伤害,这类保藏工艺包括冷冻干燥法、低温冻结和液氮保藏法等。铜绿假单胞菌拥有在42摄氏度可以生长的特点。浙江CMCC(B)10104甘油菌多少钱
铜绿假单胞杆菌在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130摄氏度以下的低温中能减少冰晶的形成。细胞复苏时速度要快,使之迅速通过细胞较容易受损的-5~0摄氏度,细胞仍能生长,活力受损不大目前常用的保护剂为二甲亚砜(DMSO)和甘油,它们对细胞无毒性,分子量小,溶解度大,易穿透细胞。合适的铜绿假单胞杆菌温度通常在45~68摄氏度之间(预备实验可2摄氏度间隔进行)。另外,由于在60~68摄氏度间,也有很高的活性,因此可在此温度范围内设定铜绿假单胞杆菌温度,进行2StepPCR。铜绿假单胞杆菌温度为68摄氏度时,每kbp大体可设定30秒~1分钟;当温度设定在68摄氏度以下时,时间设定可稍长一些。上海CMCC(B)10104二代菌种规格铜绿假单胞菌因为经培养后成绿色,与铜生锈后的绿色相同而命名。
铜绿假单胞菌含有O抗原(菌体抗原)以及H抗原(鞭毛抗原)。O抗原包含两种成分:一种是其外膜蛋白,为保护性抗原;另一种是脂多糖,有特异性。O抗原可用以分型。铜绿假单胞菌的标本采集,分别来自不同影响部位的各种标本,包括血液、尿液、痰标本、脓汁、穿刺液等。还包括来自医院环境中的各种标本如水、空气、物体表面采样等。通过染色镜检,铜绿假单胞菌为革兰阴性杆菌,菌体大小(1.5~5.0)um×宽(0.5~1)um,细长且长短不一,有时呈球杆状或线状,成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛,无芽胞,无荚膜。
铜绿假单胞菌在25-37摄氏度较适宜生长繁殖,在碳源充足(也就是有机质丰富)时约20--30分钟繁殖一代,超过48摄氏度后生长繁殖受到抑制,但也能繁殖,在60摄氏度条件下可长期存活,在120摄氏度条件下可存活20分钟。水分是铜绿假单胞菌生长的先决条件,在缺少水分的条件下,铜绿假单胞菌表现为芽孢状态(休眠),不能生长和繁殖。在土壤湿度低于15%时,铜绿假单胞菌不能正常生长和繁殖。当土壤湿度在30-45%范围内较适宜铜绿假单胞菌的生长繁殖。实际上,当土壤湿度大于45%时,并不影响铜绿假单胞菌的生长和繁殖,但是这个湿度条件往往对农作物不利。铜绿假单胞菌一般情况下建议在20度以上的温度储存或者直接-80度冷冻储存。
铜绿假单胞菌在营养琼脂上,37摄氏度,培养3d,菌体呈杆状,0.61μm×1.22~2.13μm,革兰氏阴性,不产芽胞。当通气足够的时候可以产绿色的色素。如果要持久产绿色的色素,可以在溴化十六烷基铵琼脂培养基上面进行培养。本菌种不能在4-10度条件下储存容易死亡,一般情况下建议在20度以上的温度储存或者直接-80度冷冻储存,或者做成冻干粉在4-10度保存。铜绿假单胞菌属于病原微生物,但是铜绿假单胞菌属于已经去除了致病因子的标准菌种,这个菌种不会具有危害。一般应用于科研研究,例如做抑菌实验的阳性菌种。铜绿假单胞菌含有O抗原(菌体抗原)以及H抗原(鞭毛抗原)。浙江CMCC(B)10104甘油菌多少钱
铜绿假单胞菌在4摄氏度不生长而在42摄氏度可以生长。浙江CMCC(B)10104甘油菌多少钱
铜绿假单胞菌通过吸附在病原真类菌的菌丝上,并随着菌丝生长而生长,产生溶菌物质消解菌丝体,使菌丝发生断裂、解体、细胞质消解,有的菌丝原生质凝结;或者是次生代谢产物对病原菌孢子的细胞壁产生溶解作用,致使细胞壁产生穿孔、畸形等现象。铜绿假单胞菌不但能直接抑制植物病原菌,而且能通过诱发植物自身的抗病潜能从而增强植物的抗病性。生防铜绿假单胞菌能促进植物根系及植株生长,增强植物的抗病性,从而间接地减少病害发生。铜绿假单胞菌发酵分为:固体发酵、液体发酵、固液混合发酵3种工艺。浙江CMCC(B)10104甘油菌多少钱
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