芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
珠子以两种不同的方式读出。首先,在与100μMresorufin-阝-D孵育1小时后,用荧光板读出器以100μL方式读出珠子结合-半乳糖苷(RGP),一种荧光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板阅读器上,检测限为15fMofS阝G(图2)。其次,将珠子加载然后将RGP溶液密封到阵列的孔中,单个酶的信号被允许在反应室中积累,并每30秒获取一次荧光图像。实验结束时获取阵列的白光图像以识别含有珠子的孔(含有珠子的孔散射光与空井不同)。荧光图像用于确定哪些微球具有相关的结合酶(从时间变化的荧光图像中强度增加)。图2显示了微球中含酶的比例与总体S阝G浓度的关系的对数-对数图。检测到的比较低酶偶联物浓度为350飞摩尔(zM),并通过外推信号等于的酶浓度计算得出的检测限(LOD)。 数字化高敏ELISA芯片,可以进行8孔、4孔的灵活检测。科研场景用数字ELISA产品
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 科研场景用数字ELISA产品芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,每个医学实验室都能用的单分子检测;
参考原理:血液中单个蛋白质分子的检测有助于识别许多新的诊断性蛋白质标记物。我们报告了一种同时检测数百至数千个单独蛋白质分子的方法,该方法能够检测到非常低浓度的蛋白质。蛋白质被捕获在显微珠上,并用酶标记,每个显微珠上有一个或零个酶标记的蛋白质。通过将这些显微珠分离成50飞米的阵列反应室,单个蛋白质可以通过荧光想象检测到。通过单化这些阵列中的分子,~10-20种酶可以在100μL(~10−19M)中检测到。单个基于酶标记的分子酶联免疫吸附试验(数字ELISA)能够检测血清中临床相关的蛋白质,其浓度(<10−15M)远低于传统ELISA3-5。数字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除术的患者血清中检测到前列腺特异性抗原,比较低至14fmol/mL(0.4fmol)。
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从TNF-α数字ELISA测定的检测限为~150aM(2.5fg/mL),相当于全血中的~600aM(10fg/mL);市场上可用的ELISA对TNF-α的比较高灵敏度在血清中的LOD为21fM(0.34pg/mL)(补充图3)。两种方法的目标蛋白零浓度尖峰均为为这些实验提供有用的阴性对照:25%的血清含有多种蛋白质的微摩尔浓度,在这些高蛋白质背景之上可以检测到非常低浓度的目标蛋白。我们还开发了一个证明用于显示低浓度核酸可以检测到的DNA的主要数字分析方法,而无需复制目标
新型的单分子检测方法的普及版;
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
将约5cm长的光纤束依次抛光使用30微米、9微米和1微米尺寸的金刚石研磨膜的机器。抛光光纤在0.025M盐酸溶液中化学蚀刻130秒,然后立即浸入水中以抑制反应。蚀刻后的光纤在水中复溶5秒,在水中洗涤5分钟,然后在真空下干燥。光纤束阵列的中心玻璃和包层玻璃的蚀刻速率差异caused4.5-μmdiameter孔在中心光纤中形成30。更初研究了不同蚀刻时间对孔深的影响。如果孔太深,则每个孔中沉积多个微珠。井口密封性被破坏;如果井口太浅,则无法将微球保留在井内,且观察到加载效率较差。对于单个微球而言,井口深度of3.25±0.5μm是比较好的,同时保持良好的密封性。 芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,超敏检测,低至可测试到亚皮克级;科研场景用数字ELISA产品
每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;科研场景用数字ELISA产品
芯弃疾JX-8B数字ELISA:具有多重检测的优势;
多重:单检测孔内,可设置2-6个检测区,分别预埋不同的检测项目或质控抗体,单个样本加入到单个芯片孔,可同时测试2-6个检测项目;8孔芯片,每个孔内有4个检测区;单次加样本,可同时测试4个检测项目;
芯弃疾JX-8B数字ELISA : 多重指标检测;可用于同时检测多个指标适合以下各类项目:神经/脑科学标志物项目、细胞因子、心血管、肿标标志物、眼科、生殖、病原、微生物;每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测; 科研场景用数字ELISA产品