沉淀法外泌体分离试剂盒经典、操作简便的外泌体分离方法!假如你没有超速离心机,假如对提取出的外泌体中含有透明质酸等多糖而头疼不已,那你一定要来试试这款沉淀法分离试剂盒。WSR0026是一款沉淀法外泌体分离试剂盒,可用于多种样本的外泌体分离,具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。使用方法:需要将沉淀试剂加入到样本中孵育,然后高速离心即可得到外泌体。产品优势:适用范围广,血浆、血清等复杂样本和细胞上清、尿液等简单样都适用;回收率高,相较于其他方法,获取的外泌体浓度高;操作简便,不需特殊设备,操作...
外泌体并非均一的群体,其异质性是当前研究复杂性的根源,也是临床转化必须跨越的鸿沟。这种异质性体现在多个维度:首先是尺寸异质性,尽管主流定义为30-150纳米,但实际释放的群体中可能存在更小或稍大的亚群,其结构与功能可能迥异。其次是来源异质性,不同细胞来源的外泌体携带不同的分子标签——免疫细胞的外泌体富含免疫调节分子,肿瘤细胞的外泌体则高表达促*相关蛋白与核酸。更为关键的是分子载荷异质性,即使同一细胞释放的外泌体,其内部蛋白质、RNA的种类和数量也存在***差异,部分亚群可能携带特定的信号分子,而另一亚群则不具备。这种异质性使得传统的“批量分析”可能掩盖关键的功能亚群的作用。因此,当前前沿技术正...
外泌体研究常见问题解答134.当我的Westerns似乎不起作用时,我该怎么办?这有几个典型的原因:(1)添加的样本量不足。外泌体可能含有相当少量的蛋白质货物。对于初始实验,我们建议添加尽可能多的样本。(2)抗体不是比较好的。我们建议测试2-3家制造商的抗体(如抗CD63或其他外泌体标记物),仔细检查推荐的浓度。此外,它们比较好是新鲜使用,并且需要妥善储存。(3)根据外泌体表面标记,某些凝胶条件可能对靶抗体更为优化(例如还原/非还原和变性/非变性)。我们建议与制造商和外泌体社区核实您所针对的特异性标记物和您所使用的特异性抗体的推荐条件。(4)一般Westerns技术。Western可能很棘手,...
维思克思的外泌体浓缩方案-超滤管02超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术,利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜,利用膜孔的大小选择性,将分子量较大的物质过滤出来,而将分子量较小的物质通过膜孔。本产品基于低蛋白吸附的过滤膜,根据膜的大小规格以达到样本浓缩或分离的效果。具有操作简单,离心时间短,回收率高等特点。可用于生物样品浓缩,分离,蛋白除杂等领域。使用方法:1.样本澄清通过膜过滤样本,使样本澄清,去除杂质。2.超滤管平衡超滤管中加入适量PBS,在转子中离心。移去装置底部PBS。3.样品超滤向超滤管中加入5ml样品,离心。弃除收集管中液体,回收浓缩样品。外泌体研究工具批量订单快速交付,减...
外泌体RNA质控解决方案当你小心翼翼将微量样本、花费大量时间提取出外泌体RNA后,还在苦恼RNA质量无法测定?好不容易进行定量检测时,你或许又会出现260/280值、260/230值较佳,但RNA浓度却又极低?拜托!下次请一定要试试这款RNA质控试剂盒!RNA质控原来如此简单!外泌体RNAQC试剂盒是全球、拥有自主知识产权、创新式外泌体表征方法的外泌体RNA质控试剂盒!本产品是将外泌体RNA反转后,再使用SYBRGreenI嵌合荧光法qPCR的外泌体RNA质控试剂盒。经过大量研究分析,筛选出2个阳性外泌体RNA靶标(QCAssayA和B是阳性RNA靶标的扩增引物)和1个阴性外泌体RNA靶标(Q...
外泌体研究常见问题解答91.外泌体的分离方法有哪些,哪种更好?分离是进行外泌体研究关键的一步,只有选择了合适的方法才能得到理想的实验结果。分离方法包括:超速离心、尺寸排阻、免疫磁珠、聚合物沉淀、亲和磁珠/膜等方法。根据外泌体的大小,密度和表面标志物的不同进行分离,不同提取外泌体方法优劣势比较,受限于篇幅,详细版请联系维思克思生物科技获取。2.细胞培养上清中死细胞对外泌体分离的影响?在细胞凋亡/死亡过程中会释放大量Evs,会混入活细胞分泌的外泌体中,而目前的外泌体分离方法并不能将两者区分开来。所以在收集细胞培养上清样本时,需要保证细胞活率应不小于95%。3.大体积的样本类型,如何分离外泌体?大体...
外泌体研究常见问题解答119.在分离过程中,外泌体含量会发生变化吗?准备的步骤越少,结果越好。很明显,即使你是一个非常熟练的操作员,将超离作为预富集步骤也会导致囊泡的损失。因此,即使囊泡的纯度很高,也无法控制哪些囊泡在处理过程中的丢失。10.为什么沉淀法或超速离心法提取的外泌体看不到沉淀?这种问题通常有三种可能性:1)使用的样本体积太小或外泌体含量太低。2)使用了不透明的超速离心管,一般来说外泌体产量都比较小,不透明管底很难见到明显沉淀的,可以当作有沉淀,继续往后操作即可。3)使用了粘附性低的耗材。部分角转管壁粘附性很低,沉淀很难富集或沉淀很容易滑落,请圆底离心管离心。11.外泌体和微囊泡可以...
如何提高细胞外囊泡产量?尽管基于外泌体具有巨大潜力,但传统生产方式产量低和放大困难等特点,严重制约了外泌体的临床应用转化。维思克思总结了提高外泌体产量的方法,包括物理和化学刺激、增加钙离子内流、细胞骨架固定、药物刺激以及特定基因的过表达等,可有效提高外泌体表达量。具体有哪些方法可以提高细胞外囊泡产量呢?01培养条件。采用3D培养替代传统2D培养可提高外泌体产量。缺氧可刺激细胞分泌外泌体。此外,适度降低pH值可显著提高外泌体的表达量。02物理刺激。采用物理刺激的方法可明显增加外泌体的产量。常用物理刺激包括:剪切力、周期性张力、声音和电场刺激等。03分子干预。一般来说,细胞处于应激状态下会增加外泌...
升级版-外泌体脂质定量试剂盒脂质是外泌体的主要组成部分,可以测量外泌体中脂质含量来对外泌体进行定量和质量表征!从原理上来说,既然蛋白浓度可以一直作为外泌体定量和表征的重要指标。那么用脂质来对外泌体进行定量和表征也是非常可行的。升级版外泌体脂质定量试剂盒突出优势:试剂盒包含独特的脂质结合荧光探针,该探针分子的荧光背景低,在与脂质结合时发出明亮的荧光,从而测量样品的脂质含量。特异性检测外泌体脂质,该探针只与外泌体脂质结合才能发光,与其他杂质(核酸、蛋白、糖、盐等)不结合,可以特异性检测外泌体脂质。线性范围广,灵敏度高,线性范围:0-1000μg/mL,检测灵敏度可达50μg/mL。重复性好,CV值...
沉淀法外泌体分离试剂盒经典、操作简便的外泌体分离方法!假如你没有超速离心机,假如对提取出的外泌体中含有透明质酸等多糖而头疼不已,那你一定要来试试这款沉淀法分离试剂盒。WSR0026是一款沉淀法外泌体分离试剂盒,可用于多种样本的外泌体分离,具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。使用方法:需要将沉淀试剂加入到样本中孵育,然后高速离心即可得到外泌体。产品优势:适用范围广,血浆、血清等复杂样本和细胞上清、尿液等简单样都适用;回收率高,相较于其他方法,获取的外泌体浓度高;操作简便,不需特殊设备,操作...
外泌体标记真的只能用PKH和DiR吗?外泌体作为近几年的“科研新贵”,可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力,是非常有前途的递送载体。然而,目前在外泌体的示踪研究和应用上还存在一些难点:难点一:目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种,包括亲脂性的染料(如:PKH、Dil等),这些染料与外泌体膜不是共价结合,而是通过疏水相互作用短暂结合在一起的。在后续的细胞摄取时,会出现示踪染料在不同膜结构或脂溶性物质间发生不断解离和结合的现象,从而影响结果的准确性。ps:分离的外泌体中也会存在一些脂质,也会与示踪试剂结合。难点二:目前外泌体等胞外囊泡有一部分的归宿是在溶酶体,而...
外泌体的保存是否重要?在外泌体研究中,储存稳定性是一直困扰广大科研工作者的难题。目前外泌体一般在PBS中,置于-80℃分装冻存,但随着冻存时间和冻融次数的增加,将会严重影响外泌体的活性、完整性、货物含量等。针对上述难点,维思克思开发出外泌体的冻存保存液,直接混入外泌体样本中,置于-20℃、-80℃冻存,可明显改善储存样品的短期和长期稳定性。产品特点:操作简便,可直接混入外泌体样本中,无需过多操作。保护效果好,使用后外泌体生物活性稳定,多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异。适用样本范围广,可适用于所有外泌体样本(包括植物、动物、微生物、人来源外泌体)。产品信息:WisExoExos...
外泌体表征系列产品线目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法,单一的检测技术都有其局限性。维思克思全新系列产品—外泌体表征与定量试剂盒,该系列产品可对现有单一表征与定量方法进行补充,通过多维度对分离出的外泌体进行评估,使实验数据更加科学、准确。01BCA蛋白定量试剂盒(WSR0022),具有灵敏度高、显色速度快、线性范围广的优势,可高效快速实现蛋白定量。02脂质定量试剂盒(WSR0028/WSR0028-2),现有的脂质定量方法大都需要昂贵的仪器,本产品可代替大型仪器,实现小成本快速检测,具有灵敏度高、操作简便、线性范围广等优势。03外泌体RNAQC试剂盒(WSR0013-1),经大量研究分析,筛选...
外泌体是科学研究的热点,可怎么才能追踪到外泌体在体内的踪迹呢?很多研究者都被这一点给难住了。尽管市面上已经有了许多追踪染料,但这些染料要么就是荧光信号太弱,要么就是背景太高,都存在很多不足。维思克思曾经也深受其害,经过长时间的沉淀与积累,我们终于带来由发明专利“一种pH敏感型探针分子及其应用、一种探针分子的合成方法”转化而来的示踪试剂盒!外泌体标记步骤:1试剂准备。使用时将WisTracker提前从-20℃取出,避光解冻后备用。2标记外泌体。将解冻后的WisTracker添加到外泌体溶液中,室温避光反应30min。3游离探针的去除。推荐用维思克思的WSR0015一步普通离心去除游离探针,得到纯...
外泌体的保存是否重要?在外泌体研究中,储存稳定性是一直困扰广大科研工作者的难题。目前外泌体一般在PBS中,置于-80℃分装冻存,但随着冻存时间和冻融次数的增加,将会严重影响外泌体的活性、完整性、货物含量等。针对上述难点,维思克思开发出外泌体的冻存保存液,直接混入外泌体样本中,置于-20℃、-80℃冻存,可明显改善储存样品的短期和长期稳定性。产品特点:操作简便,可直接混入外泌体样本中,无需过多操作。保护效果好,使用后外泌体生物活性稳定,多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异。适用样本范围广,可适用于所有外泌体样本(包括植物、动物、微生物、人来源外泌体)。产品信息:WisExoExos...
外泌体定量和表征。研究外泌体的同行们(包括我)一直被外泌体的定量和表征所困扰,什么样的外泌体才是好的外泌体呢?是评估其活性?纯度?蛋白浓度?还是其他什么指标?或者说我们在做实验时,怎样对外泌体进行定量呢?这个可以说是进行外泌体实验的第一步,必须确定外泌体的量,才好判断实验变量是否影响外泌体的发生或者确定下游应用实验的给药剂量。你们是如何进行定量的呢?目前的外泌体定量方法有以下几种,分别是:纳米颗粒跟踪分析(NTA)、纳米流式、表面标志物的ELISA定量试剂盒、BCA或Bradford蛋白定量试剂盒。注:受认知所限,有没有涵盖的,欢迎补充。上述外泌体定量方法中,以BCA蛋白浓度测定应用的广,也容...
外泌体RNA定量试剂盒外泌体的组成复杂,不仅包含脂质和蛋白质,RNA也是其组成部分。从目前文献报道统计结果来看,RNA是外泌体发挥功能的主要物质。研究外泌体RNA组成和含量具有重要意义。从原理上来说,既然蛋白浓度可以一直作为外泌体定量和表征的重要指标。那么用RNA来对外泌体进行定量和表征也是非常可行的。外泌体中包含RNA分子,其在细胞通讯、疾病发展等方面具有重要的研究和应用价值。但目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法,单一的检测技术都有其局限性。WSR0039不需提取外泌体RNA,直接检测微量RNA含量。具有操作简便,灵敏度高,线性范围广,易于检测等特点。该试剂盒的检测线性范围是0-25ng,比...
维思克思的外泌体浓缩方案-超滤管02超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术,利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜,利用膜孔的大小选择性,将分子量较大的物质过滤出来,而将分子量较小的物质通过膜孔。本产品基于低蛋白吸附的过滤膜,根据膜的大小规格以达到样本浓缩或分离的效果。具有操作简单,离心时间短,回收率高等特点。可用于生物样品浓缩,分离,蛋白除杂等领域。使用方法:1.样本澄清通过膜过滤样本,使样本澄清,去除杂质。2.超滤管平衡超滤管中加入适量PBS,在转子中离心。移去装置底部PBS。3.样品超滤向超滤管中加入5ml样品,离心。弃除收集管中液体,回收浓缩样品。外泌体研究工具复溶后稳定性强,多次...
外泌体研究常见问题解答83.外泌体是如何可视化和/或计数的?外泌体太小(30–150nm),无法使用常规显微镜观察,因为这于大小至少为几微米的物体。光学显微镜的分辨率太低,无法观察外泌体。外泌体大小分布的典型分析方法包括纳米粒子跟踪分析(NTA)、纳米流式和电子显微镜。尽管在方法上非常不同,但这些技术都允许你研究尺寸低至10纳米的纳米颗粒。要确定样本中外泌体的浓度,可以使用NTA、纳米流式。它们通过不同的原理对纳米颗粒(10–1000nm)进行计数和粒径测定。NTA可能是获得溶液中颗粒平均尺寸和浓度信息的常用方法。然而,这种方法无法区分大小相同的囊泡和蛋白质聚集体。因此,我们建议将这种方法与显...
外泌体研究常见问题解答134.当我的Westerns似乎不起作用时,我该怎么办?这有几个典型的原因:(1)添加的样本量不足。外泌体可能含有相当少量的蛋白质货物。对于初始实验,我们建议添加尽可能多的样本。(2)抗体不是比较好的。我们建议测试2-3家制造商的抗体(如抗CD63或其他外泌体标记物),仔细检查推荐的浓度。此外,它们比较好是新鲜使用,并且需要妥善储存。(3)根据外泌体表面标记,某些凝胶条件可能对靶抗体更为优化(例如还原/非还原和变性/非变性)。我们建议与制造商和外泌体社区核实您所针对的特异性标记物和您所使用的特异性抗体的推荐条件。(4)一般Westerns技术。Western可能很棘手,...
间充质干细胞外泌体培养基维思克思推出的重磅产品是什么呢?一句话总结优点:无血清、无异源动物成分、化学成分限定、细胞倍增时间短以及外泌体产量高。本品为化学成分限定培养基,不含血清和血清替代物,无动物源组分,使用过程中也无需添加血清或血清替代物;本品主要含有氨基酸、维生素、无机盐、白蛋白、胰岛素和微量元素等。可用于多种来源的人间充质干细胞传代培养,如骨髓间充质干细胞(BM-hMSC)、脐带间充质干细胞(UCM-hMSC)。产品优势:质量稳定,无外泌体成分影响,细胞培养和外泌体生产的重复性强;外泌体产量高,外泌体产量高达1E+13Particles/L(3D培养);重复性好,培养基批次间一致性,成分...
磁珠法外泌体RNA提取试剂盒。开发一种在质量和得率上合格的外泌体RNA提取方法对外泌体研究非常重要,许多实验室已努力开发这种方法,采用了各种方法,均可供研究人员使用,具有不同程度的实用性。例如,使用基于大小的过滤器开发的试剂盒缺乏外泌体部分的特异性;与过滤器尺寸匹配的任何颗粒都将被其保留,包括细胞碎片、蛋白复合物,甚至血小板和淋巴细胞,这取决于过滤器的尺寸。基于聚合物的沉淀和使用离液盐的直接裂解也缺乏对囊泡的特异性。我们开发了一种基于磁珠的外泌体RNA提取方法,该方法可通过简单且可重复的工作流程分离外泌体并从血浆和血清等样本中提取RNA。与超速离心相比,这种方法可从血浆样本中捕获近100%RN...
如何避免外泌体活性下降,这款保存液告诉你答案~好不容易分离出来的外泌体PBS重悬保存在-80℃,保存了两周实验就做不出来了怎么办?快来试试维思克思的外泌体保存液吧!操作简便,直接混入外泌体样本后置于-20℃、-80℃冻存,可明显改善外泌体活性、完整性及稳定性!操作简便,可直接按比例混入外泌体样本中,无需过多操作;保护效果好,使用后外泌体生物活性稳定,多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异;适用样本范围广,可适用于所有外泌体样本(包括植物、动物、微生物、人来源外泌体)。产品信息:WisExoExosomeProtector(WSR0020)外泌体研究工具成熟技术体系,快速解决实验难题...
外泌体研究常见问题解答47.外泌体中是否存在18SmRNA?通过测序和qPCR分析了外泌体RNA的含量,这些囊泡肯定包括一些18sRNA。早期的论文具有误导性,一个团队声称外泌体是miRNA和mRNA阴性的。事实上,外泌体包含核糖体RNA、tRNA和许多非编码RNA,并且很大一部分miRNA实际上与蛋白质(例如Ago2)相关,而不是外泌体。8.外泌体研究的困难是什么?(1)外泌体异质性,包括来源异质性、大小异质性、成分异质性等;(2)高纯度的外泌体获取;(3)外泌体鉴定表征;(4)外泌体保存。外泌体研究工具高兼容性配方,适配多种样本类型,提升应用范围。NK细胞外囊泡研究工具间充质干细胞外泌体培...
如何避免外泌体活性下降,这款保存液告诉你答案~好不容易分离出来的外泌体PBS重悬保存在-80℃,保存了两周实验就做不出来了怎么办?快来试试维思克思的外泌体保存液吧!操作简便,直接混入外泌体样本后置于-20℃、-80℃冻存,可明显改善外泌体活性、完整性及稳定性!操作简便,可直接按比例混入外泌体样本中,无需过多操作;保护效果好,使用后外泌体生物活性稳定,多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异;适用样本范围广,可适用于所有外泌体样本(包括植物、动物、微生物、人来源外泌体)。产品信息:WisExoExosomeProtector(WSR0020)外泌体研究工具自动化操作兼容,适配实验室自动...
EVs研究中,通常EVs来源,纯化方法,定量技术,给药对象等这些因素都会导致给药剂量的差异。因此建立一个完善给药剂量系统就显得尤为重要。确定EVs有效剂量建议分为两个方向,一个是长期层面;一个是短期层面。长期上需要众多EVs从业者,制定有效的、适用于不同来源、不同生产工艺、不同纯化方法的EVs量化或表征方法,这个层面无法短期内实现。在短期内,比较好购买商品化EVs,或者自己确定固定来源和生产工艺、定量方法的EVs,然后做细胞或动物的量效实验时,做梯度稀释的量效实验,以确定比较好的给药剂量,此方法可以。为尽快解决问题,达到预期实验效果,只能从短期层面考虑。维思克思在外泌体行业深耕近十年,总结出E...
外泌体研究常见问题解答122.做外泌体研究,需要多少量的蛋白质?不建议过多关注蛋白质浓度,我们的经验,蛋白质测量与制剂中外泌体的数量之间几乎没有相关性。蛋白量不应作为制剂中外泌体数量的估计。外泌体与蛋白量并不总是一个很好的相关性。我们主要使用细胞培养基和尿液作为起始样本,即使在这种“简单”的溶液中(至少与血浆/血清相比),相关性也不是很好。这就是为什么我们开始关注细胞培养生长条件,并标准化外泌体收获条件,以便在正确的时间收获并提高系统的可重复性。血浆和血清中蛋白质浓度和外泌体含量之间的相关性会更小。许多研究人员使用纳米颗粒跟踪分析(NTA)来测量囊泡的数量和大小分布,但这种方法不能提供相同大小...
外泌体研究常见问题解答105.外泌体研究,应选用血浆还是血清?血清是血液凝固之后收集的液体,所以其中少了纤维蛋白原,凝血因子,以及多了很多凝血产物。纤维蛋白原可转化为纤维蛋白,具有凝血功能。在凝血过程中血小板会分泌大量的外泌体,有研究发现血清中有接近50%的外泌体来自额外的分泌。血浆=血液-血细胞血清=血浆-纤维蛋白原-凝血因子所以一般实验选择血浆,在特殊情况下,如研究与血小板相关的疾病的时候,当然是血清更适合。6.外泌体血液样本提取需注意事项?全血在长时间放置,冷冻、离心等会发生溶血现象,此时不建议分离外泌体。7.细胞培养去除血清源外泌体?a.将细胞培养用的血清通过100000g超速离心10...
外泌体标记真的只能用PKH和DiR吗?外泌体作为近几年的“科研新贵”,可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力,是非常有前途的递送载体。然而,目前在外泌体的示踪研究和应用上还存在一些难点:难点一:目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种,包括亲脂性的染料(如:PKH、Dil等),这些染料与外泌体膜不是共价结合,而是通过疏水相互作用短暂结合在一起的。在后续的细胞摄取时,会出现示踪染料在不同膜结构或脂溶性物质间发生不断解离和结合的现象,从而影响结果的准确性。ps:分离的外泌体中也会存在一些脂质,也会与示踪试剂结合。难点二:目前外泌体等胞外囊泡有一部分的归宿是在溶酶体,而...
脐带间充质干细胞外泌体标准品。hUC-MSCsExosome是由人脐带间充质干细胞培养后获得的上清,结合切向流过滤等多种纯化方式获得的高纯度外泌体颗粒,可用于后续实验,包括蛋白或核酸分析、载药研究,以及作为各种实验的参考品等。产品优势:高活性,hUC-MSC来源外泌体,活性高;高纯度,多种纯化原理的方法结合,确保外泌体纯度;高质量,严格的质控、生产和鉴定,确保产品质量。使用方法:将1mL无菌去离子水或注射用水加入到外泌体冻干粉中,完全溶解后,尽快用于后续实验。外泌体研究工具专业技术支持,提供实验方案指导,降低技术门槛。尿液胞外囊泡解决方案你真的知道如何正确收集和保存EVs吗?样本的收集和保存是...