外泌体是科学研究的热点,可怎么才能追踪到外泌体在体内的踪迹呢?很多研究者都被这一点给难住了。尽管市面上已经有了许多追踪染料,但这些染料要么就是荧光信号太弱,要么就是背景太高,都存在很多不足。维思克思曾经也深受其害,经过长时间的沉淀与积累,我们终于带来由发明专利“一种pH敏感型探针分子及其应用、一种探针分子的合成方法”转化而来的示踪试剂盒!外泌体标记步骤:1试剂准备。使用时将WisTracker提前从-20℃取出,避光解冻后备用。2标记外泌体。将解冻后的WisTracker添加到外泌体溶液中,室温避光反应30min。3游离探针的去除。推荐用维思克思的WSR0015一步普通离心去除游离探针,得到纯净的荧光标记外泌体。外泌体示踪步骤:1接种细胞。取合适密度的细胞,接种于共聚焦平皿中置于合适条件下培养。2孵育外泌体。细胞计数,当细胞生长到70%时,加入荧光标记的外泌体于细胞培养条件下避光孵育2-4h。3清洗与染色。取出平皿,用PBS清洗3次,加入DAPI溶液,室温避光孵育10min,孵育完成后再用PBS清洗3次。4荧光检测。在激光共聚焦显微镜下观察细胞和外泌体,并拍照记录。外泌体研究工具小批量试用装供应,适合前期方法学验证,降低试错成本。组织Exosome产品

脐带间充质干细胞外泌体标准品。hUC-MSCsExosome是由人脐带间充质干细胞培养后获得的上清,结合切向流过滤等多种纯化方式获得的高纯度外泌体颗粒,可用于后续实验,包括蛋白或核酸分析、载药研究,以及作为各种实验的参考品等。产品优势:高活性,hUC-MSC来源外泌体,活性高;高纯度,多种纯化原理的方法结合,确保外泌体纯度;高质量,严格的质控、生产和鉴定,确保产品质量。使用方法:将1mL无菌去离子水或注射用水加入到外泌体冻干粉中,完全溶解后,尽快用于后续实验。诺奖外泌体检测服务外泌体研究工具梯度规格选择,满足不同实验规模,成本可控性强。

外泌体RNA质控解决方案当你小心翼翼将微量样本、花费大量时间提取出外泌体RNA后,还在苦恼RNA质量无法测定?好不容易进行定量检测时,你或许又会出现260/280值、260/230值较佳,但RNA浓度却又极低?拜托!下次请一定要试试这款RNA质控试剂盒!RNA质控原来如此简单!外泌体RNAQC试剂盒是全球、拥有自主知识产权、创新式外泌体表征方法的外泌体RNA质控试剂盒!本产品是将外泌体RNA反转后,再使用SYBRGreenI嵌合荧光法qPCR的外泌体RNA质控试剂盒。经过大量研究分析,筛选出2个阳性外泌体RNA靶标(QCAssayA和B是阳性RNA靶标的扩增引物)和1个阴性外泌体RNA靶标(QCAssayC是阴性RNA靶标的扩增引物),用于表征外泌体RNA的质量。本产品可以对扩增产物进行实时检测,显著提高了检测灵敏度,并省略了PCR反应后的电泳步骤,非常适合于外泌体RNA的检测。产品信息:ExosomalRNAQCKitV1(WSR0013-1)。
外泌体研究常见问题解答35.CD9或CD81等是否对外泌体起源具有特异性?目前,对于一般的外泌体标记物还没有达成共识。研究界目前的建议是结合检测许多膜结合或膜相关蛋白,以验证膜的存在。靶点CD63和CD81存在于许多不同的外泌体制剂中,CD9也是如此。然而,检测到至少2种不同的细胞系释放CD9阴性的外泌体(Jurkat细胞和几种B细胞淋巴瘤细胞)。同样重要的是,通过对已知在ER、高尔基体或细胞核等隔室中表达的标记物进行染色,来证明不存在污染性囊泡。同样重要的是,用相同的标记物来表征宿主细胞。6.外泌体中是否包含DNA?一般认为外泌体中不包含DNA,或包含少量线粒体DNA。因为外泌体在胞质中形成与包裹货物,而在胞质中存在少量降解的线粒体DNA。目前有一些研究发现,在外泌体的表面,称之为“corona”,中文叫“冠“或”晕“,在外泌体分泌到细胞外后,会吸附微量的游离DNA。外泌体研究工具低损耗设计,试剂利用率高,减少实验成本浪费。

外泌体表征与定量难在什么地方?又该怎么做?我们拜访过很多外泌体研究工作者,其中谈到多的是外泌体难以分离,分离后的外泌体不好定量,定量的外泌体数据是否准确等问题。2.单一表征方法的局限性对外泌体的纯度表征目前采用的是外泌体阴性蛋白标志、颗粒蛋白比。外泌体阴性蛋白标志一般采用WB检测,属于定性检测,与样本处理、抗体、显色、曝光时间等多个因素有关,如果作为纯度表征的指标,显然是不合适的。在蛋白聚集体或其他杂质(糖/脂质/核酸等)聚集体/大颗粒较多时,颗粒蛋白比的数值也可能较大,其作为纯度表征指标也有其局限性。既然上述外泌体定量方法、表征方法具有其局限性,那么如何科学的对外泌体进行定量和表征呢?外泌体研究工具标准化质量检测,每批次严格质控,保障实验可靠性。柠檬外泌体NTA粒径检测
外泌体研究工具自动化数据分析兼容,适配主流软件,提升分析效率。组织Exosome产品
外泌体研究常见问题解答145.外泌体RT-qPCR实验是选择哪个靶标作为内参?外泌体没有公认内参,理由如上。常规内参基因在外泌体中表达量甚至可能比目标基因还低。外参是在没有合适内参的情况下的替代物。miRNA检测外参是化学合成的线虫短片段单链RNA(cel-miR-39-3p)在人、小鼠、大鼠中均无同源片段,比较大限度降低了对定量实验造成的干扰。6.外泌体SmallRNA-seq实验,样本量有什么要求?肿瘤细胞系推荐使用40mL以上的初始样品量。某些细胞(如悬浮细胞、干细胞、神经细胞等)中外泌体含量比较低,建议使用100mL的初始样品量。一般需提取到10ng以上的TotalRNA,才可以用于SmallRNA-seq实验。7.如何确保外泌体RT-qPCR和SmallRNA-seq实验的成功率?为了保证转录组实验的成功率,建议对提取的外泌体RNA进行质控,确保RNA质量。如检测RNA的浓度、纯度和片段分布等,但由于外泌体RNA含量较低,建议使用商业的外泌体RNA质控试剂盒对RNA质量进行评估。组织Exosome产品
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