精子检测是通过一系列检测方法来评估男性生育能力的指标之一。而检测方法的选择直接影响到检测的准确性和结果的可靠性。目前,常用的检测方法有手动计数法、显微镜计数法、电子显微镜计数法、精子运动轨迹分析法等。手动计数法是通过显微镜手动计算精液中精子数量的方法,该方法简单易行,但因操作者技能不同,容易出现误差。显微镜计数法是通过显微镜观察精液中精子数量的方法,该方法比手动计数法更加准确,但需要专业的技能和经验。电子显微镜计数法是通过电子显微镜观察精液中精子数量的方法,该方法非常准确,但需要昂贵的设备。精子运动轨迹分析法是通过计算机分析精子运动轨迹来判断精子活力和数量的方法,该方法不仅准确性,而且可以直观地显示精子的运动状态,但需要较为复杂的技术。除了以上常见的检测方法,还有一些新兴的检测方法,如流式细胞术、全自动分析系统等。这些检测方法虽然在检测精子数量、活力等方面具有一定优势,但由于技术上的限制和设备的昂贵,目前还没有得到广泛应用。在选择检测方法时,需要考虑检测的目的、检测的准确性和结果的可靠性等因素。同时,需要选择正规的医疗机构进行检测,避免因设备不足或技术不过关等因素导致检测结果出现误差。精子分析仪参数,平均路径速率(VAP):精子头沿其平均路径移动时的时均速率。美国慢速运动精子分析DAP
Hamilton Thorne IVOS是一套整合了光学观察系统的精子动力分析仪。如今,IVOS 已成为快速、准确、稳定可靠的进行精子分析的代名词。仪器特点:新款内建CD Writer!内部整合光学系统自动化,内置样品台可用于多种样品分析 仪器操作简单提供满足需求的分析结果实时质量控制分析结果列表内部整合的光学系统IVOS是***一套内置光学系统的精子动力分析仪。与其它同类产品相比,IVOS并不采用显微镜持续照明方式,而是采用闪光拍摄方法。这种拍摄方法能够消除由于精子运动而造成的位置模糊。通过60祯/秒的拍摄速度,能够得到准确可靠的精子速度和运动参数分析结果。IVOS可在以下三种模式下分析精子样品:相差,明场和多波长荧光模式。自动化内置加热平台作为整合光学系统的一部分,由计算机控制的IVOS样品平台可在分析时提供准确的温度控制和位置定位。样品台的温度可在室温到40°C范围内调节,稳定度为0.5°C。分析区域的选择可选用自动或手动方式。样品台的温度和位置可实时显示在视频窗口中。IVOS 还允许用户自己进行分析室设定,控制分析样品量。广州精子分析精确温度控制该设备还支持多种分析模式,包括精子浓度、活力、形态和DNA损伤等参数的测量,满足用户的多样化需求。
通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向运动精子百分率上的相关性较低]。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较,其结果为:采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数;变异系数(CV)是29%活动精子比率的CV为24%平均路径速度(VAP)的CV为43∙85%。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术(授精IVF)的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能;同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。
CASA可将每个精子的活力按以下分级:(1)前向运动型(PR):精子运动活跃、线性运动或者在较大的范围内运动。(2)非前向运动型(NP):所有其他非前向运动的形式,如精子在较小的范围内运动,精子头部轻微移位或只观察到尾部摆动。(3)完全不动型(IM):精子完全不动。CASA系统检测的这些参数有一套标准的术语。(1)VCL=曲线速度(mm/s)。精子头沿其实际的曲线,即在显微镜下见到的二维方式运动轨迹的平均速度。检测细胞活力。(2)VSL=直线速度(mm/s)。根据精子头在开始检测时的位置与***所处位置之间的直线运动的时间平均速度。(3)VAP=平均路径速度(mm/s)。精子头沿其空间平均轨迹移动的时间平均速度。(4)ALH=精子头侧摆幅度(mm)。精子头沿其空间平均轨迹侧摆的幅度。以侧摆的最大值或平均数值表示。(5)LIN=直线性。曲线轨迹的直线性。即VSL/VCL。(6)WOB=摆动性。精子头沿其实际轨迹的空间平均路径摆动的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性。空间平均路径的直线性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打频率(Hz)。精子曲线轨迹越过其平均路径轨迹的时间平均速率。(9)MAD=平均移动角度(度)。精子头沿其曲线轨迹瞬间转折角度的时间平均***值。所有操作人员都应接受规范的CASA分析仪使用培训,严格按照使用指南进行操作。
精子手工计数原理及操作方法
1.原理:将精液用适当的稀释液作一定量稀释后,混匀注入计数池内计数,再算出每毫升精液中精子数。2.方法(按照***版第四版《全国临床检验操作规程》)1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式:精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,前向性(STR):平均路径的直线性。北京绵羊精子分析W.H.O 5
CASA系统通过计算机分析精子运动参数,能够提供精确的量化数据,优于人工检测方法。美国慢速运动精子分析DAP
精子分析仪是计算机技术和图像处理技术结合的**分析仪器设备,通过显微镜下摄像和计算机快速分析多个视野内精子的运行轨迹,客观记录了精子的密度、活动力、活动率和存活率等各项参数。
计算机辅助**分析仪由硬件系统和软件系统组成。硬件系统主要由显微摄像系统、图像采集系统、恒温系统、计算机处理系统等四大系统构成。此外,仪器一般配有**样品盒,以确保单层取样 [1]。1.显微摄像系统:由显微镜及CCD组成。可以将标本信号通过显微放大由CCD传输到计算机2.图像采集系统:由图像卡构成,其功能是对CCD信号进行抓拍、识别、预处理后,将成熟信号输送到计算机。3.恒温系统:由加温和保温设备组成。加温是通过热吹风机不断将适宜的温度热风鼓入封闭保温罩内,提供稳定、可靠的检查环境。4.计算机系统:对图像信号进行***系统的加工处理,对获得的数据进行输出和存储的设备。软件系统采用**的精子质量分析软件,利用现代化的计算机识别技术和图像处理技术,对精子的动静态特征进行***的量化分析,对精子的密度、活力、活率、运动轨迹等特征进行量的检测分析 美国慢速运动精子分析DAP