单分子免疫检测数字ELISA易用性

创新性的解决方案：芯弃疾JX-8B数字ELISA

我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景：适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围：各种高灵敏多重免疫检测，可替代各种ELISA试剂盒，及其他免疫检测产品。

用DNA捕获探针(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA）功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的说明制备的。这些珠子与生物素化互补DNA的1μM（5’-生物素-CTCT）孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE缓冲液中过夜(16h）孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后，用PBS洗涤珠子三次含0.1%Tween-20的缓冲液。将珠子样品分装至微孔板中100μL中每孔给予400,000个微球。从微孔板孔中吸取缓冲液，将微球重悬后与不同浓度的ofSβG孵育。 使用现有平台就能做的单分子免疫检测；单分子免疫检测数字ELISA易用性

    芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列（图1C）我们称之为单分子阵列（SiMoA）——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步（图1A)，在微球（直径μm）上形成一个三明治抗体复合物，结合的复合物用酶标记，如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品，蛋白质的比值分子（以及由此产生的酶标记复合物）与微球的比例很小（通常小于1：1)，因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布，导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如，如果在(3000个分子）的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质，并且在200，000个微球上进行标记，则珠子，然后，。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术（例如，平板阅读器）的标签，因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积（通常为)，并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 哪些是数字ELISA检测芯弃疾单分子ELISA检测盒，使用灵活开放，少于8孔即可测试，可使用客户自研各用试剂！

    芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

珠子以两种不同的方式读出。首先，在与100μMresorufin-阝-D孵育1小时后，用荧光板读出器以100μL方式读出珠子结合-半乳糖苷（RGP），一种荧光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板阅读器上，检测限为15fMofS阝G（图2）。其次，将珠子加载然后将RGP溶液密封到阵列的孔中，单个酶的信号被允许在反应室中积累，并每30秒获取一次荧光图像。实验结束时获取阵列的白光图像以识别含有珠子的孔（含有珠子的孔散射光与空井不同）。荧光图像用于确定哪些微球具有相关的结合酶（从时间变化的荧光图像中强度增加）。图2显示了微球中含酶的比例与总体S阝G浓度的关系的对数-对数图。检测到的比较低酶偶联物浓度为350飞摩尔（zM），并通过外推信号等于的酶浓度计算得出的检测限（LOD）。

   芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

 数字化高敏ELISA芯片，低成本、便捷、快速进行微量样本的检测：1）微量样本即可检测；微量样本、微量试剂检测：流道高度只有几十微米，是原来微孔板高度的几十分之一，可有效节省样本量、试剂量；常规检测比较低只需要10ul样本即可进行完整检测。2）单个样本可以同时进行多指标的检测多重指标检测：单个样本，同时进行2-4个指标检测，可定制更多指标；芯片单孔同时检测2个指标芯片单孔同时检测4个指标3）灵活多通道检测：可以手动完成，主要在芯片上进行，对仪器不依赖（只需要移液枪和现成的荧光显微镜，即可实现检测），更小单元可做4-8个样本检测；初始的尝试成本极低（活动期8孔芯片只需要200元即可测试实验）；相比普通ELISA试剂盒，更少96孔板价格2-4千元，每个检测孔20-40元；4）数字化的检测方式和检测结果；检测反应基底为阵列化、单分散排列的磁珠，可使用荧光显微镜进行可视化的免疫检测，原来的ELISA信号，转化成0或1，每个磁珠是否参与反应，反应效率如何。 具有以下特点： 多重、超敏、微量、极速 灵活、开放！

芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

单分子酶检测到的比较低酶分子数假设蛋白质检测分析的更终灵敏度为背景信号可能由非特异性相互作用产生。为了评估内在敏感性，我们通过将400,000个带有生物素的珠子与不同浓度的酶缀合物链霉亲和素-阝-半乳糖苷酶（S阝G）混合，创建了具有明确酶与珠子比例的珠子群体。为了方便起见，生物素化珠子是通过将生物素化DNA与功能化的珠子杂交提供的。互补DNA。[我们注意到，该实验不应被视为敏感的DNA检测；该检测的敏感性受到非特异性相互作用的限制，如补充图2所示，这些相互作用发生在酶缀合物和表面结合的DNA之间。 芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品，10ul样本可同时测2-4个指标！芯弃疾产品数字ELISA优势

芯弃疾JX-8B简易版单分子ELISA检测产品，极速检测，检测用时只需要 15-30min！单分子免疫检测数字ELISA易用性

芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品；具有以下特点：多重、超敏微量、极速灵活、开放; 
只有少量分泌蛋白可测量的可能性突显了蛋白质测量领域面临的挑战：医学上相关的生物标志物可能存在于非常低的丰度中。免疫测定仍然是是蛋白质生物标志物敏感和特异性测量的基础。然而，传统的免疫分析技术在检测不可测量的生物标志物时灵敏度不足，这些生物标志物肯定位于当前可检测范围之下。主流的传统免疫分析方法——包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、化学发光和电化学发光——的灵敏度下限约为10^-13M（~<0.1pM)。许多降低灵敏度的方法已被描述，包括拉曼增强信号检测、电感耦合等离子体质谱，但这些方法的数据表明其成功有限。非常规方法如亚飞摩尔级检测具有明显的权衡，例如程序较长或无法提供定量答案。
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