斑马鱼的食品安全性评估

斑马鱼CRISPR基因编辑技术服务，含基因敲入品系制备、基因敲入品系制备、转基因品系制备等。斑马鱼基因敲入品系制备服务简介：1.基因敲入(Knockin)非同源依赖的DNA修复技术，在斑马鱼基因组定点插入外源DNA（荧光蛋白、PA等）。2.基因敲入技术特点2.1定点插入；2.2敲入效率较低。服务流程：根据客户基因敲入要求进行基因分析；cas9mRNA和多个gRNA靶点的设计及合成；高效gRNA靶点的筛选及效率验证；敲入载体设计及构建；斑马鱼胚胎的显微注射和敲入验证；F0代斑马鱼的可遗传性筛选；杂合子F1代斑马鱼的基因型鉴定。环特生物优势：国际前列的斑马鱼敲入技术以及上百例的成功经验；特有的高效筛选方法。斑马鱼在药理学毒理学的应用。斑马鱼的食品安全性评估

在这项研究中，科研团队利用模式生物斑马鱼来研究肌肉再生。这种小型的热带鱼强大的再生能力和透明性使科学家们能够观实时、长期地观察活的斑马鱼内发生的组织再生全过程。通过转基因技术标记肌干细胞和祖细胞，再通过成像技术可以清晰地看到从初始损伤到在脊椎动物伤口部位形成新分化的肌肉纤维的整个再生过程。而近期一项关于活化PAX7阳性细胞在小鼠体内肌肉修复中的作用的研究，也表明了哺乳动物肌肉生物学和斑马鱼研究的潜在相关性。至于对***的卫星细胞的追踪，由于该体内检查方法在目前的限制性，目前在很大程度上是通过斑马鱼幼体系统克服的。此外，进入伤口部位的增殖肌细胞与初期接触阶段损伤部位纤维、二次接触未受损部位纤维之间的相互作用也是出乎意料的。研究表明，未受损伤的纤维不是再生过程中被动的旁观者，其本身可能会指导分化祖细胞到**需要纤维生成的伤口区域发挥作用。研究还表明，伤口修复的动力学甚至心肌细胞分化的各方面，自然和完整纤维都部分地参与了这一进程。斑马鱼做毒性实验斑马鱼实验的可靠性。

斑马鱼血管生成基因如血管内皮细胞生长因子（VEGF）、an-iopoietins、ephrions及相应受体与哺乳动物功能相似，而且斑马鱼血管系统及其对调节血管新生类药物的***反应与哺乳动物类似。另外斑马鱼胚胎在血液循环系统严重缺陷的情况下仍能存活，且胚胎透明，利用血管转基因荧光斑马鱼可以在24小时以内就定量评价药物的血管形成***作用。

与传统的鸡胚尿囊膜、小鼠角膜实验相比，斑马鱼更加便捷、快速、高效，而且结果定量分析的准确度更高。

目前多个出于临床试验阶段的抗血管生成靶向候选***药如SU5416、SU6668、TNP470、SU4312和AG1478等均对斑马鱼的血管形成有***的***效果。用斑马鱼筛选发现具有血管形成***活性的中***体化合物也有很多，如靛玉红、呋喃二烯等。

【试验方案】咱们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内）。皮肤吸收供试品一段时间后，咱们通过中性粒转基因荧光斑马鱼，调查皮肤/肌肉刺激性；通过表型拍照，调查肌肉纹理及皮肤色素变化；通过AO染色凋亡细胞，调查皮肤细胞凋亡情况。【评价结论】1.通过每组30尾斑马鱼的比照试验，供试品组的斑马鱼皮肤肌肉发生显着的毒性表型（包括肌肉纹理反常和色素反常），在斑马鱼尾部可见显着的凋亡细胞，在躯干部可见显着的中性粒细胞合集。2.本试验证实了该供试品对斑马鱼有皮肤肌肉毒性。斑马鱼用来做什么试验?

斑马鱼作为模式生物的起源和发展1938年，美国布朗大学Roosen-Rung教授***报道斑马鱼发育形态学研究成果。1950年代，美国罗格斯大学K.KennethHisaoka教授***报道斑马鱼毒理学研究成果。1972年，美国俄勒冈大学GeorgeStreisinge教授开始斑马鱼发育生物学研究和模式动物建立工作。1989年，美国俄勒冈大学MonteWesterfield教授出版斑马鱼研究圣经TheZebrafishBook***版。1998年，较早斑马鱼模式生物数据库ZFIN成立。1998年，全球***家斑马鱼药物研发服务外包公司成立。2004年，斑马鱼国际资源中心（ZIRC）在俄勒冈大学成立。2011年，斑马鱼模型和技术研究被列入中国科技部「重大新药创制」专项十二五实施计划。2012年，中国国家斑马鱼资源中心成立。目前，斑马鱼已经成为继小鼠和大鼠之后的第三大脊椎类模式生物，在发育生物学、遗传学、基础医学、药理学、毒理学、药物研发以及生态环境评价等诸多领域得到了广泛应用。斑马鱼有着较高的颜值，而且研讨价值也是十分的高。斑马鱼实验室建设要求

为什么用斑马鱼做试验？斑马鱼的食品安全性评估

Novelobjecttest：每条鱼别离转入透明实验池(25×20×15cm，长×宽×高);每个容器包含一个新目标(蓝色塑料立方体，3×3×1cm，长×宽×高)，以确定其对新颖性的呼应(图3a)。温热水(25±1°C,pH7.2-7.6，硬度44.0-61.0mgCaCO3/L)置于测试槽中使水深到达10厘米。经过5分钟的习惯期后，将新目标放置在鱼缸的一角，让鱼自在探究8分钟。6分钟记载他们的行为轨道。为了便于剖析，实验池实际上分为两部分(新目标区和无目标区)(图3a)。咱们剖析了在虚拟切割的水槽两部分所走过的总距离(cm)和所花费的时刻(s)。 斑马鱼的食品安全性评估

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