过氧化氢灭菌生物指示剂的芽孢计数方法注意事项 方法适用于泰林不锈钢载体的过氧化氢灭菌生物指示剂芽孢计数（片式/自含式）。 生物指示剂芽孢计数过程中，可能由于人员、计数方法、实验材料、仪器设备、环境等因素，造成计数结果不准确。 我司研究结果表明，稀释液会对计数结果产生影响，如使用0.1%蛋白胨水溶液、含0.05%吐温80的0.9%无菌氯化钠溶液、含0.05%吐温80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液作为稀释液时，芽孢计数结果偏低； 如在计数操作过程中未对产品进行超声洗脱，也会导致芽孢计数结果偏低。GB18281.1要求，在生物指示剂有效期内，用户或第三方机构使用制造商给出的方法所检测出活菌的数...

生物指示剂用于灭菌设备的性能确认，特定物品的灭菌工艺开发、建立，生产过程灭菌效果的监控，也可用作隔离系统和洁净室除菌效果的验证评估等。 干热灭菌生物指示剂用于150°C~180°C干热灭菌工艺的验证及干热灭菌效果的监控，广泛应用于制药企业、科研机构等行业。 泰林干热灭菌生物指示剂 + 选用高强度安瓿瓶/管，不易破损 + 可耐受高温灭菌的载体 中国药典2020版9207《灭菌用生物指示剂指导原则》指出在灭菌程序的验证中，生物指示剂的被杀灭程度，是评价一个灭菌程序有效性最直观的指标，生物指示剂的芽孢率应在90%以上。 需符合ISO11138、GB18281、PDATR51及药典（USP，EP，Ch...

生物指示剂D值测定 D值是灭菌验证的基石，需通过标准方法（存活曲线法）精确测定。 实际应用中需结合Z值、F值等参数，优化灭菌工艺。 质量控制包括菌种标准化、设备校准和数据追溯，确保结果可靠性。 通过科学测定D值，可确保生物指示剂真实反映灭菌效力，为医疗、制药等行业提供无菌保障。 D值测定方法 1. 存活曲线法（Fractional Negative Method） 适用场景：实验室标准测定（如ISO 11138、USP要求）。 步骤： 制备生物指示剂： 使用标准菌株（如嗜热脂肪地芽孢杆菌ATCC 7953），确保初始芽孢量已知（如1×10⁶ CFU/载体）。 设定灭菌条件： 固定温度/压力（如...

压力蒸汽灭菌生物指示剂产品的特点及关键性能进行探讨。 蒸汽灭菌因其高效、适用范围广等特点，广泛应用于医疗、制药等行业。压力蒸汽灭菌效果需通过验证来确认。 2020版《中国药典》指出，生物指示剂的被杀灭程度，是评价一个灭菌程序有效性最直观的指标。 生物指示剂可分为载体型，芽孢悬液和自含式三种。其中自含式生物指示剂自带培养基，可在普通环境下接种，使用非常方便。 培养基性能包含无菌性能和恢复生长性能两方面，无菌性能不合格可能产生假阳性，而培养基恢复生长性能不合格可能导致假阴性，影响灭菌验证结果判断。无菌性能要求生物指示剂内含的培养基培养后仍呈阴性；恢复生长性能要求生物指示剂内含恢复培养基经过灭菌后接...

过氧化氢灭菌生物指示剂的质量波动控制 过氧化氢灭菌验证过程中，灭菌过程无异常，但是个别点位的生物指示剂呈阳性，是什么原因造成的呢? 美国注射剂协会(Parenteral Drug Association，PDA)第51号技术报告《气体和汽相除污工艺生物指示剂:质量标准、生产、控制和使用》[将由于生物指示剂质量波动或其他未知因素导致难以杀灭的指示剂称为"Rogue Bls”，即“流氓生物指示剂”。制造商可以通过提高工艺水平来避免这一现象的发生。下面主要针对初级包装、载体、芽孢分布等因素对生物指示剂质量波动的影响，进行“流氓生物指示剂“成因和控制的分析。泰林生物指示剂的D值稳定，确保在不同灭菌条件...

湿热灭菌生物指示剂的选型 115℃，30min的灭菌程序，采用FBio值≥8min的指示剂是否合适？ A: 生物指示剂F0值≥8min是指“121℃”下生物指示剂F0值。115℃，30min灭菌条件根据灭菌率（Z值=10℃）计算，115℃，30min灭菌条件相当于121℃灭菌7.5min，此时选用FBio值≥8min的生物指示剂，结果会有概率呈现阳性。该灭菌条件需选择FBio值更低的生物指示剂，GB 18281.3-2015《医疗保健产品灭菌 生物指示物 第3部分：湿热灭菌用生物指示物》指出在低于121℃的情况下，可以使用枯草芽孢杆菌（B.subtillis）ATCC 35021(5230)...

生物指示剂杀灭实验 实验分组 阳性对照组：未灭菌的生物指示剂（验证芽孢活性）。 阴性对照组：灭菌后未接种的培养液（排除污染）。 测试组：不同灭菌时间梯度（如2/4/6/8分钟）测定D值。 生物指示剂杀灭实验通过量化微生物灭活效果，为灭菌工艺验证提供科学依据。实验需严格遵循标准操作（如ISO 11138），控制关键变量（温度、时间、芽孢负载），并结合数据计算D值/KT值。定期实验可确保灭菌工艺的持续有效性，降低医疗感染风险。 实验步骤（以压力蒸汽灭菌为例） 装载生物指示剂 将生物指示剂置于灭菌器最难灭菌位置（如器械管腔、装载中心）。 每组至少3个重复，确保统计可靠性。 运行灭菌程序 设定121℃...

压力蒸汽灭菌生物指示剂产品的特点及关键性能进行探讨。 蒸汽灭菌因其高效、适用范围广等特点，广泛应用于医疗、制药等行业。压力蒸汽灭菌效果需通过验证来确认。 2020版《中国药典》指出，生物指示剂的被杀灭程度，是评价一个灭菌程序有效性最直观的指标。 生物指示剂可分为载体型，芽孢悬液和自含式三种。其中自含式生物指示剂自带培养基，可在普通环境下接种，使用非常方便。 培养基性能包含无菌性能和恢复生长性能两方面，无菌性能不合格可能产生假阳性，而培养基恢复生长性能不合格可能导致假阴性，影响灭菌验证结果判断。无菌性能要求生物指示剂内含的培养基培养后仍呈阴性；恢复生长性能要求生物指示剂内含恢复培养基经过灭菌后接...

自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂关键性能之培养基和菌种 培养基性能包含无菌性能和恢复生长性能两方面，无菌性能不合格可能产生假阳性，而培养基恢复生长性能不合格可能导致假阴性，影响灭菌验证结果判断。无菌性能要求生物指示剂内含的培养基培养后仍呈阴性；恢复生长性能要求生物指示剂内含恢复培养基经过灭菌后接种不大于100cfu的嗜热脂肪地芽孢杆菌，置于55℃～60℃培养箱培养48h，应呈阳性结果。 国内外法规均指出，嗜热脂肪地芽孢杆菌（Geobacillus stearothermophilus）可以用来监测压力蒸汽灭菌效果。该菌种营养细胞呈长杆状、圆端，多数为单个、少数成对或链状排列，细胞壁为革兰阳性结构，...

生物指示剂用于灭菌设备的性能确认，特定物品的灭菌工艺开发、建立，生产过程灭菌效果的监控，也可用作隔离系统和洁净室除菌效果的验证评估等。 悬液式湿热灭菌生物指示剂常用于监测各种湿热灭菌器的灭菌效果，特别适合液体产品内部灭菌效果监测。 + 变色培养基，48h获得准确结果 + 选用高强度安瓿瓶/管，不易破损 + 特殊生产工艺，保质期内芽孢性能稳定 + 直管式体积更小巧，适合特定的管道（医疗器械）等材料灭菌效果的监测 中国药典2020版9207《灭菌用生物指示剂指导原则》指出在灭菌程序的验证中，生物指示剂的被杀灭程度，是评价一个灭菌程序有效性最直观的指标，生物指示剂的芽孢率应在90%以上。 需符合IS...

生物指示剂用于灭菌设备的性能确认，特定物品的灭菌工艺开发、建立，生产过程灭菌效果的监控，也可用作隔离系统和洁净室除菌效果的验证评估等。 干热灭菌生物指示剂用于150°C~180°C干热灭菌工艺的验证及干热灭菌效果的监控，广泛应用于制药企业、科研机构等行业。 泰林干热灭菌生物指示剂 + 选用高强度安瓿瓶/管，不易破损 + 可耐受高温灭菌的载体 中国药典2020版9207《灭菌用生物指示剂指导原则》指出在灭菌程序的验证中，生物指示剂的被杀灭程度，是评价一个灭菌程序有效性最直观的指标，生物指示剂的芽孢率应在90%以上。 需符合ISO11138、GB18281、PDATR51及药典（USP，EP，Ch...

过氧化氢灭菌生物指示剂的芽孢计数方法注意事项 方法适用于泰林不锈钢载体的过氧化氢灭菌生物指示剂芽孢计数（片式/自含式）。 生物指示剂芽孢计数过程中，可能由于人员、计数方法、实验材料、仪器设备、环境等因素，造成计数结果不准确。 我司研究结果表明，稀释液会对计数结果产生影响，如使用0.1%蛋白胨水溶液、含0.05%吐温80的0.9%无菌氯化钠溶液、含0.05%吐温80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液作为稀释液时，芽孢计数结果偏低； 如在计数操作过程中未对产品进行超声洗脱，也会导致芽孢计数结果偏低。GB18281.1要求，在生物指示剂有效期内，用户或第三方机构使用制造商给出的方法所检测出活菌的数...

两类过氧化氢灭菌验证生物指示剂的选择之载体材料和菌种选择 两种灭菌方式的生物指示剂均要求兼容灭菌过程，不得影响指示微生物的生长，不得对过氧化氢有吸附效果。 USP、ChP中汽化过氧化氢灭菌生物指示剂的指示微生物均可以是嗜热脂肪地芽孢杆菌、生孢梭菌以及萎缩芽孢杆菌，市售产品主要采用嗜热脂肪地芽孢杆菌（ATCC12980）作为指示微生物。 真空灭菌生物指示剂的参考标准为GB27955，其中收载嗜热脂肪地芽孢杆菌ATCC 7953作为指示微生物。根据不同的灭菌场景，泰林现已推出三款不同类型的过氧化氢灭菌生物指示剂，以满足用户的不同需求。同时泰林提供各类生物指示剂的芽孢数量、D值的定制服务，为您的灭菌...

环氧乙烷灭菌生物指示剂芽孢计数方法之芽孢洗脱后梯度稀释和制备计数平皿 将该试管转移至生物安全柜中，于旋涡混匀仪上旋涡30s，用移液枪吸取1mL芽孢悬液，加入到另一根含有9mL含0.1%聚山梨酯80的无菌纯化水的试管中，记为10-2，按照该方法依次稀释至10-3、10-4（稀释级别按制造商提供的芽孢数量而定）。 取芽孢数在30cfu/mL-300cfu/mL的稀释级别的试管（10-4）震荡30s，每支稀释管平行制备2个平皿，每皿加1mL菌悬液，注入15mL-20mL温度不超过45℃融化的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）。等待琼脂凝固后，倒置于30℃-35℃培养箱中培养48h-72h后计数。生物指示...

环氧乙烷灭菌生物指示剂芽孢计数方法之芽孢洗脱后梯度稀释和制备计数平皿 将该试管转移至生物安全柜中，于旋涡混匀仪上旋涡30s，用移液枪吸取1mL芽孢悬液，加入到另一根含有9mL含0.1%聚山梨酯80的无菌纯化水的试管中，记为10-2，按照该方法依次稀释至10-3、10-4（稀释级别按制造商提供的芽孢数量而定）。 取芽孢数在30cfu/mL-300cfu/mL的稀释级别的试管（10-4）震荡30s，每支稀释管平行制备2个平皿，每皿加1mL菌悬液，注入15mL-20mL温度不超过45℃融化的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）。等待琼脂凝固后，倒置于30℃-35℃培养箱中培养48h-72h后计数。如何确保...

湿热灭菌生物指示剂的选型 115℃，30min的灭菌程序，采用FBio值≥8min的指示剂是否合适？ A: 生物指示剂F0值≥8min是指“121℃”下生物指示剂F0值。115℃，30min灭菌条件根据灭菌率（Z值=10℃）计算，115℃，30min灭菌条件相当于121℃灭菌7.5min，此时选用FBio值≥8min的生物指示剂，结果会有概率呈现阳性。该灭菌条件需选择FBio值更低的生物指示剂，GB 18281.3-2015《医疗保健产品灭菌 生物指示物 第3部分：湿热灭菌用生物指示物》指出在低于121℃的情况下，可以使用枯草芽孢杆菌（B.subtillis）ATCC 35021(5230)...

为什么要使用生物指示剂 确保产品质量和安全性 医疗领域：在医疗器械和药品的生产过程中，灭菌效果直接关系到患者的生命安全。使用生物指示剂可以确保灭菌过程的有效性，从而保证医疗器械和药品的无菌性，降低感染风险。 食品行业：在食品加工和包装过程中，灭菌是防止微生物污染、延长保质期的重要环节。生物指示剂能够验证灭菌过程的可靠性，确保食品的安全性和质量。 工业生产：在一些工业生产过程中，如生物制品、疫苗等的生产，灭菌效果的验证同样至关重要。生物指示剂的使用可以确保生产环境和产品的无菌性，保障生产过程的顺利进行和产品质量。 5. 提供可追溯性 记录和追溯：生物指示剂的检测结果可以作为灭菌过程的记录，便于追...

环氧乙烷灭菌生物指示剂芽孢计数方法之芽孢洗脱后梯度稀释和制备计数平皿 将该试管转移至生物安全柜中，于旋涡混匀仪上旋涡30s，用移液枪吸取1mL芽孢悬液，加入到另一根含有9mL含0.1%聚山梨酯80的无菌纯化水的试管中，记为10-2，按照该方法依次稀释至10-3、10-4（稀释级别按制造商提供的芽孢数量而定）。 取芽孢数在30cfu/mL-300cfu/mL的稀释级别的试管（10-4）震荡30s，每支稀释管平行制备2个平皿，每皿加1mL菌悬液，注入15mL-20mL温度不超过45℃融化的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）。等待琼脂凝固后，倒置于30℃-35℃培养箱中培养48h-72h后计数。生物培养...

监控液体灭菌效果时，为什么要将悬液式湿热灭菌生物指示剂放入液体中呢？ 液体灭菌，自然是想了解液体内部的灭菌情况啦。我们将温度探头分别放在水中、培养基中、和灭菌器中，得到了如下温度趋势信息：当灭菌器温度达到设定值时（以121℃为例），灭菌器开始灭菌计时，此时被灭菌的培养基温度只有109℃。因此，在进行物理验证时需要将温度传感器放置在被灭菌液体中，同理，生物指示剂也要置于液体内部进行监测，才能反应液体的真实灭菌情况。泰林生物指示剂采用高纯度芽孢，确保灭菌验证的准确性。快速生物指示剂质量控制生物指示剂选择需知晓的参数 在进行灭菌验证时，恰当选用生物指示剂，对提高验证效率、保证验证效率均有重要意义。选...

过氧化氢灭菌生物指示剂的芽孢计数方法 过氧化氢灭菌生物指示剂芽孢计数—操作方法 随机抽取需检验批次生物指示剂 4片（支）与相关物品一并放入安全柜中，用酒精棉擦拭外表面，通风15min以上，后续操作如下：特别提醒：不可将指示剂进行紫外照射，否则会造成计数结果偏低！！！ 01芽孢洗脱 在生物安全柜中，取出生物指示剂载体，分别放置于无菌试管中，向试管中加入 10 mL无菌纯化水，于涡旋混匀仪上震荡2min，转移至超声波清洗机中，设置频率为40KHz，处理15min，将该试管记为10-1。 特别提醒：不要将多片载体放置到一个容器中进行洗脱，载体相互堆叠可能影响洗脱效果，造成计数结果偏低。过氧化氢低温灭...

生物指示剂芽孢计数方法 2020版《中国药典》指出，生物指示剂的被杀灭程度，是评价一个灭菌程序有效性最直观的指标。 《药品GMP指南》生物指示剂的应用中指出，实验室在接受商品化生物指示剂时，应进行微生物数量测定。那么，生物指示剂的总芽孢数是如何确定的呢？ 相关法规要求生物指示剂入厂总芽孢数复核要求样品数不少于4个最小单位，应按照制造商提供的方法进行计数。因不同灭菌形式选用的指示微生物存在差异，对应的计数方法操作也存在很多不同，泰林生物生物指示剂经过严谨的方法学验证，可以给用户提供高效的入厂芽孢计数方法。环氧乙烷灭菌验证方案：泰林EP6-600型搭载ATCC9372菌株.云南生物指示剂参数自含式...

蒸汽灭菌生物指示剂芽孢计数方法 随机抽取需检验批次生物指示剂4片（支）与相关物品一并放入生物安全柜中，用酒精棉对指示剂初级包装进行擦拭，通风15min以上，后续操作如下：注意：物料准备过程中，切勿使用紫外照射生物指示剂，可能会导致计数结果偏低。 指示剂处理： 将生物指示剂转移至生物安全柜内，取出载体，加入到含3~4颗4mm~6mm玻璃珠和3mL无菌水的试管中，置于涡旋混匀仪上充分振荡，将试管中载体打散成纤维状后，再加入7mL无菌水，制成均一的菌悬液，该试管记为10-1（同步平行4片）。 将悬液式生物指示剂（安瓿管式，规格：1mL/支）置于涡旋混匀仪上混匀，用安瓿开启器打开安瓿管移取0.5mL菌...

生物指示剂常见问题与解决方案 Q1：培养后培养基颜色变化不明显，如何判断？ 可能原因： 灭菌彻底（真阴性）。 培养基失效（如蒸发过多或储存不当）。 解决方案： 同步培养未灭菌的阳性对照（应变黄），确认培养基有效性。 Q2：生物指示剂培养后变浑浊但颜色未变黄？ 可能原因： 杂菌污染（如操作不当）。 培养液成分不稳定。 解决方案： 重复实验，严格无菌操作。 Q3：自含式生物指示剂按压后无液体释放？ 可能原因： 产品损坏或设计缺陷。 解决方案： 更换新批次生物指示剂，联系供应商。过氧化氢穿透力不足？泰林Tyvek®特卫强包装，气体穿透率提升27%！嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂培养湿热灭菌生物指示剂的选...

什么是悬液式湿热灭菌生物指示剂及在哪种灭菌场景使用。 悬液式湿热灭菌生物指示剂是将芽孢和显色培养基共同封装在玻璃管中的生物指示剂，是一种特殊的自含式生物指示剂。 悬液式生物指示剂在灭菌程序结束后可直接培养，操作便利，杜绝出现假阴和假阳的情况。 泰林目前有安瓿管式和直管式这两种形式的悬液式湿热灭菌生物指示剂。 哪种灭菌场景应使用悬液式湿热灭菌生物指示剂，如何正确使用？ A:悬液式湿热灭菌生物指示剂一般适用于压力蒸汽灭菌验证中的液体灭菌效果监控，将悬液式生物指示剂放入液体中一起灭菌（如下图所示）。泰林生物指示剂的抗干扰能力强，适用于复杂的灭菌环境。重庆灭菌验证生物指示剂汽化过氧化氢灭菌生物指示剂和...

汽化过氧化氢灭菌生物指示剂和过氧化氢低温等离子灭菌生物指示剂怎么选择？ 过氧化氢灭菌经过数十年的发展，衍生常压过氧化氢空间灭菌和真空过氧化氢灭菌两种灭菌形式。常压空间灭菌通过将灭菌剂经过蒸发汽化后，通过气流及其他方式输送到待处理环境中，使得其中暴露表面的生物负载下降一定水平。主要应用于密闭空间的内表面、空间内设备及物品暴露的表面除菌，例如无菌隔离系统等屏障系统、传递舱等密闭腔室、密闭房间等场景。  真空灭菌常用的是过氧化氢等离子体灭菌，该灭菌方式为在相对较高的温度（如60℃）下，使用过氧化氢气体对真空灭菌舱中的物品进行灭菌，灭菌后使用射频或电能产生等离子体，分解残留的过氧化氢。主要用于热敏感材...

环氧乙烷灭菌生物指示剂芽孢计数方法之芽孢洗脱及热激活 在生物安全柜中，取4片（支）生物指示剂打开，取出载体，分别放置于含有3-4颗玻璃珠（直径6mm）的无菌试管中，向无菌试管中加入3mL的含0.1%聚山梨酯80的无菌纯化水，置于涡旋混匀仪上充分振荡，将试管中载体打散成纤维装后，再中加入7mL含0.1%聚山梨酯80的无菌纯化水，震荡30s，制成均一的菌悬液，将该试管记为10-1。 将水浴锅加热至80℃-85℃，取上述试管，放置于水浴锅中热激活10min，热激完成后，立即将芽孢悬液转移至0-4℃的冰水浴中冷却至室温。泰林生物指示剂的使用简便，适合各种规模的实验室和生产环境。萎缩芽孢杆菌生物指示剂指...

什么是悬液式湿热灭菌生物指示剂及在哪种灭菌场景使用。 悬液式湿热灭菌生物指示剂是将芽孢和显色培养基共同封装在玻璃管中的生物指示剂，是一种特殊的自含式生物指示剂。 悬液式生物指示剂在灭菌程序结束后可直接培养，操作便利，杜绝出现假阴和假阳的情况。 泰林目前有安瓿管式和直管式这两种形式的悬液式湿热灭菌生物指示剂。 哪种灭菌场景应使用悬液式湿热灭菌生物指示剂，如何正确使用？ A:悬液式湿热灭菌生物指示剂一般适用于压力蒸汽灭菌验证中的液体灭菌效果监控，将悬液式生物指示剂放入液体中一起灭菌（如下图所示）。生物指示剂是一种用于验证实验室灭菌效果的重要工具。上海生物指示剂芽孢压力蒸汽灭菌生物指示剂产品的特点及...

湿热灭菌生物指示剂的选型 某灭菌程序的灭菌条件为121℃，12min，能否选择FBio≥12min的生物指示剂？ A: 能否选择FBio≥12min的生物指示剂，需知晓该灭菌程序的FPhy值，即使是相同的灭菌参数，不同设备的FPhy的也可能存在较大差异，如脉动真空灭菌器和水浴灭菌器。建议根据《欧洲药典》的要求，选择物理杀灭时间FPhy将指示剂杀灭到10-1～10-3。 灭菌程序1参数为：121℃，8min，FPhy值为13min，选择生物指示剂的D值为1.8min，芽孢数量为2.0×106cfu/支，可以将指示剂完全杀灭。灭菌程序2参数为：121℃，10min，FPhy值=15min，能否使...

自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂关键性能之芽孢率和总芽孢数 根据2020版《中国药典》9207 的要求，生物指示剂的芽孢含量应在90%以上。可将生物指示剂的载体置于适量的稀释液中通过搅拌、涡旋、超声波（振荡器）、离心，或其他适宜的方法方法处理，获得芽孢悬液，再通过芽孢染色观察视野中芽孢和菌体的比值进行判断。 生物指示剂的总芽孢数应在标示值的50%～300%。可将纸片载体从初级包装中取出，置于适量的稀释液中，纸质载体通过搅拌、涡旋、其他不易破碎的载体通过超声波（振荡器）、反复振摇，或其他适宜的方法处理，再95℃~100℃热激活处理15min后转移至0℃～4℃的冰水浴中迅速冷却至室温，用灭菌纯化水进行...

载体型生物指示剂，通常需要接种至合适的培养基中，经培养后观察实验结果。培养基则需实验室配制分装灭菌后使用。而培养基的性能，如无菌性能、促生长性能等指标需实验室自行验证，增加工作量的同时也存在不少隐患，且自行配制的培养基通常需要7d甚至更长的时间才能获得准确的结果。 泰林现推出生物指示剂培养液，完美解决上述问题。 将生物指示剂用无菌镊子接种至培养液中，置于55℃~60℃下培养48h，观察培养液颜色变化；同时取一支未接种的培养液同步培养作为阴性对照，取一支未经灭菌的生物指示剂接种于培养液中同步培养作为阳性对照。 结果判定：阳性对照培养液显黄色，呈阳性；阴性对照培养液显紫色，呈阴性；灭菌用生物指示剂...