安徽值得信赖的HE染色报告

HE染色组织样本水化：将浸泡过二甲苯的待测组织样本先放入无水乙醇中浸泡5min，使脱蜡时用的二甲苯可以被洗脱出去，使水可以进入组织中；再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡５min以达到充分水化的效果。组织切片苏木素染色、分化与反蓝：将水化后的组织样本的切片使用PBS溶液浸泡清洗，每次浸泡５min，总共清洗３次。之后用移液***吸取已经预先配制好的苏木素染色液，每个组织切片滴加100ul，充分染色10min。染色完毕后使用蒸馏水洗去多余的苏木素染色液。然后再使用1%的盐酸乙醇进行分化，使细胞核中结合过多的染液和细胞浆中的多余的染液被除去。分化完成后，再用双蒸水将组织切片冲洗干净。为了使苏木素染蓝色，使用弱碱性的促蓝液加入组织切片中，让细胞核染蓝色。反蓝结束后先用清水进行清洗，再用双蒸水将组织切片冲洗干净。HE染色(脱蜡、水化、染色、脱水、封片) - 实验方法。安徽值得信赖的HE染色报告

HE染色伊红着色淡分析及应对原因：（1）伊红染液的pH值可能大于5；（2）蓝化液残留过多；（3）切片太薄；（4）切片经伊红染色后在乙醇脱水时间过长。对策：检查伊红染液的pH值，如果必要的话，用乙酸将其调节在4～5之间，从而使伊红染色彩艳丽。确保每次蓝化步骤完成后，使用的弱碱性溶液被充分洗去，玻片上没有残留的弱碱性溶液。检查切片的厚度。脱水时不要让切片在低浓度乙醇停留时间过长，因为含水多的低浓度乙醇会将伊红的颜色分化掉。安徽值得信赖的HE染色报告HE染色是组织学、病理学教学与科研中比较基础、使用比较普遍的技术方法之一。

HE染色细胞浆染色原理：细胞浆内主要成分是蛋白质，为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系，当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点pH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色，现时胞核也被染色，核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷（阳离子），就可被带负电荷（阴离子）的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织，嗜伊红颗料等被***成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。

HE染色常见问题：成片的染色模糊不清，灰染答：（1）组织未及时固定，部分自溶；或固定不佳，深部组织未处理到。这种只能重新固定了。（2）尽管乙醇也是一种固定液，但尽量少用或不用，因为其会导致组织发硬变脆，染色效果不好。（3）包埋时蜡的温度过高，或切片后烤片时间和温度过久过高都不好，可能会导致无法染色。（4）脱蜡不彻底；染料有问题；分化过度导致的颜色变淡，镜下组织界限不清；染完后的脱水和透明不佳，水雾残留在组织上。（5）通风窗中（防止空气中的水雾），戴口罩操作封片（减少哈气带来的水雾）。HE染色结果如果使用计算机分析软件分析？

HE染色观察肝脏HE染色切片，首先要在显微镜下找到肝脏的标志性结构——肝小叶。显微镜首先调4倍物镜，调准焦螺旋至视野清晰，可以看到肝小叶结构。人的肝小叶之间结缔组织少，小叶分隔不明显，但动物如猪或小鼠，其肝小叶分界非常明显。肝小叶**有**静脉，在横切片上显示为空洞。肝小叶之间为将物镜调制10倍或20倍，就可以清楚地看到肝小叶结构。肝细胞以**静脉为中心向周围放射状排列，称为肝板。一般在20倍物镜下可以清晰看到肝细胞。20倍物镜下，肝细胞内染色为蓝色的是细胞核，细胞核大而圆，居中，异染色质少而着色浅，能清晰看到核仁。肝细胞胞质丰富，多成嗜酸性，当蛋白质合成旺盛时，胞质内出现散在的嗜碱性物质。肝细胞内有丰富的细胞器比如溶酶体、高尔基体、内质网，等等，但是在光镜下是无法看到的，需要在电镜下才能观察到。当然，肝小叶内除了肝细胞，还有胆小管、肝血窦、肝巨噬细胞等组织形态，但是在HE染色时并不容易观察到。做肝脏HE染色切片主要目的一般都是为了观察肝细胞形态是否完整、胞核有无增大、肝小叶形态是否完整，以检测药物等刺激因素对肝脏的损伤作用。HE染色规范化流程以及注意事项。河北值得信赖的HE染色报告

HE染色的基本原理和结果分析。安徽值得信赖的HE染色报告

HE染色注意事项：1、染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长，组织酸化而影响细胞核着色。因此，要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min，这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳，可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染苏木精后，分色这一步是关键，应在显微镜下控制进行，一般以细胞核染色清楚（晰）而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅，应重新染色后再行分色。3、切片经酒精脱水后，入二甲苯时可出现白色不透明状态，此为脱水不彻底，应将切片退回无水酒精，更换酒精、二甲苯，以求彻底脱水与透明。4、在染色过程中不要让切片干燥，以免切片收缩、变形，影响神经元形态。5、切片从二甲苯取出或进入二甲苯前，切片周边均应擦干净或吸干多余水分。6、***封固时，要用中性树脂，防止日后褪色，盖片要选大于组织块的面积，如漏出一部分不久将会褪色，所用树脂浓度要适当，树脂封固时不能有气泡。安徽值得信赖的HE染色报告