HE染色是苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中**基本、使用*****的技术方法。由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝,如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。让您放心的实验外包公司,专业HE染色实验服务平台。黑龙江病理HE染色哪家好
HE染色细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。着***况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。黑龙江病理HE染色哪家好HE染色规范化流程及注意事项?
HE染色主要是为通细胞及胞核形态、大小来区别各种细胞的,并不是直接通过颜色来区分的苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色.炎性细胞一类人体内的免疫细胞,包括中性粒细胞、嗜酸粒细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞和浆细胞.淋巴细胞是**容易和其它几种细胞区分的,细胞小而圆,核浆比很大,核浓染成深蓝紫色.浆细胞大小介于淋巴细胞和巨噬/多核/巨细胞之间,胞浆略嗜碱,核偏位,核染色深,高倍镜下可见核呈车轮状.多核细胞和巨细胞的概念是不是有点重叠,多核细胞故名思意是有多个核的大型细胞,如朗汉氏巨细胞,常在肺结核的干酪样坏死灶周围出现,多个核排成一圈,异物巨细胞也是有许多个核的体积巨大的细胞,这两种巨细胞胞质都偏酸.巨噬细胞似乎在不同的组织中有不同的名称.
HE染色组织样本水化:将浸泡过二甲苯的待测组织样本先放入无水乙醇中浸泡5min,使脱蜡时用的二甲苯可以被洗脱出去,使水可以进入组织中;再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡5min以达到充分水化的效果。组织切片苏木素染色、分化与反蓝:将水化后的组织样本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,每次浸泡5min,总共清洗3次。之后用移液***吸取已经预先配制好的苏木素染色液,每个组织切片滴加100ul,充分染色10min。染色完毕后使用蒸馏水洗去多余的苏木素染色液。然后再使用1%的盐酸乙醇进行分化,使细胞核中结合过多的染液和细胞浆中的多余的染液被除去。分化完成后,再用双蒸水将组织切片冲洗干净。为了使苏木素染蓝色,使用弱碱性的促蓝液加入组织切片中,让细胞核染蓝色。反蓝结束后先用清水进行清洗,再用双蒸水将组织切片冲洗干净。HE染色原理 试剂 染色步骤 注意事项 。
HE染色脱蜡不净的原因及验证方法:1)二甲苯使用过久,含蜡成分太高或脱蜡效果差:可更换二甲苯验证。2)切片经烤片,冷却后放入二甲苯脱蜡或室温太低;延长拖拉时间或用热的切片脱蜡验证。3)脱蜡时间太短或振荡太少,幅度太小;可延长脱蜡时间或以多振荡来验证。4)洗涤二甲苯用的乙醇使用时间过久,导致乙醇中二甲苯含量过高,二甲苯残留在切片上(由于二甲苯与水不相溶,切片上有二甲苯的地方,苏木精就没有办法渗透进去,在切片染色完成后留下了点状的不着**域):更换各道乙醇验证。5)二甲苯、乙醇质量不佳(偶有试剂瓶内装的试剂与试剂名不相符):换批号验证。6)更换脱蜡液体时试剂拿错:需重新配置验证。7)更换脱蜡液体时试剂次序放错:需重新配置验证。8)烤片时间短,切片上水分没有烤干,也会导致着色不匀,出现点状发白区域。HE染色的实验目的以及实验结果分析。黑龙江病理HE染色哪家好
冰冻切片是否可以做HE染色?黑龙江病理HE染色哪家好
HE染色常见问题:切片染色不均匀,有片状的弱着**存在答:(1)取材时组织太厚,固定过久,导致深部组织固定不佳,而表浅组织过度固定,而透明、脱水、浸蜡均是如此,这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。(2)制片过程有问题,切片厚薄不一,或者有刀痕,或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一,一般都是在制片时,刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳(一般比较好角度为5°)(3)脱蜡前未烘烤,脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久,导致脱蜡不彻底。(4)染色液过少,着色不均匀;或染色时部分组织干涸而另一部分湿润,这样会导致组织吸附染料的能力不一。(5)分化不当。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。黑龙江病理HE染色哪家好