WL鉴别培养基添加剂

HBS 和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在 Eagle′s（2.2g/L） 中比在 Hanks′（0.35g/L）中高。碳酸氢钠需用高水平的 CO2 平衡，以维持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空气水平的CO2中，溶液会变碱，Hanks′液在 CO2 培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织，需要用Eagle′s液，如果只是清洗将要在细胞培养基中储存的组织，用Hanks′液就可以了。由于大多数细胞适宜pH为7.2-7.4，偏离此范围可能对细胞生长将产生有害的影响。但各种细胞对pH的要求也不完全相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些。在配制培养用液时，需要注意一点：新配的培养基在经过 0.10um 或 0.22um 滤膜过滤时，溶液的pH 还会向上浮动0.2左右。Bennett琼脂放线菌肉汤 葡萄糖天冬酰胺液体培养基葡萄糖天门冬素液体培养基脯氨酸培养基高氏二号培养基。WL鉴别培养基添加剂

含0.05%聚山梨酯80的0.9%氯化钠250g/瓶85配方：（/L）氯化钠9g聚山梨酯800.5g使用方法：称量本品9.5g定容至1000ml蒸馏水或者去离子水中，经0.45um过滤膜过滤，然后121度灭菌15分钟备用。酸土脂肪芽孢杆菌液体培养基250g/瓶380培养基配方（/L）<br/>CaCl22H2O0.25g<br/>MgSO47H2O0.5g<br/>(NH4)2SO40.2g<br/>KH2PO43.0g<br/>酵母浸出粉2.0g<br/>葡萄糖5.0g<br/>使用说明<br/>称取本品10.95克于1L蒸馏水或去离子水中,加热溶解,用盐酸调节pH值至4.0，分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却，备用。<br/>如果要固体培养基就要把本培养基和琼脂粉单独灭菌再混合。例如称取本品10.95克于500mL或去离子水中,加热溶解,用盐酸调节pH值至4.0，121度灭菌15分钟；然后称量15g琼脂粉溶解于500mL或去离子水中,加热溶解，121度灭菌15分钟。灭菌后将两个组分混合在一起，等温度降到65度时候倾注培养皿。酸土脂肪芽孢杆菌液体培养基添加剂1ml*10支100ZnSO47H2O0.1g，MnCl24H2O0.03g，H3BO30.3g，CoCl26H2O0.2g，CuCl22H2O0.01g，NiCl26H2O0.02g，Na2MoO42H2O0.03g，蒸馏水1.0L。过滤灭菌。林格氏液酵母浸粉葡萄糖肉汤 肉浸液琼脂 芽孢杆菌培养基 嗜热脂肪杆菌恢复肉汤 硫酸锰营养琼脂培养基。

T2829菌种层用培养基配方（每升）Peptone（蛋白胨）6.0gBeefExtract(牛肉浸膏粉)1.5gPancreaticDigestofCasein（胰酪蛋白）4.0gDextrose（葡萄糖）1.0gYeastExtract（酵母浸膏粉）3.0gAgar（琼脂）15.0gpH6.5±0.1（25℃）使用说明称取本品30.5g于1L蒸馏水或去离子水，加热煮沸1分钟以上使彻底溶解，分装,121℃高压灭菌15分钟，备用。T2826制霉素检定培养基（每升）Peptone（蛋白胨）9.4gBeefExtract(牛肉浸出粉)2.4gYeastExtract（酵母浸粉）4.7gGlucose（葡萄糖）10.0gSodiumChloride（氯化钠）10.0gAgar(琼脂)18.0gpH5.9～6.1（25℃）使用说明称取本品54.5g于1L蒸馏水或去离子水中，加热煮沸持续1分钟以上使溶解，分装，121℃灭菌15分钟或115℃高压灭菌30分钟,灭菌结束后请摇匀，以防琼脂沉积于器皿底部而凝固，备用。T2827麦迪/麦白霉素检定培养基普通琼脂斜面配方（每升）Peptone（蛋白胨）10.0gBeefExtract（牛肉浸粉）3.0gSodiumChloride（氯化钠）5.0gAgar(琼脂）16.0gpH8.0-8.2(25℃)使用说明称取本品34.0g于1L蒸馏水或去离子水中（可按比例增加或减少配制量），加热煮沸至完全溶解,分装,115℃灭菌30分钟，灭菌结束后请摇匀，以防琼脂沉积于器皿底部而凝固，备用。

    蛋白胨淀粉酵母培养基配方：（/L）蛋白胨•••（25℃）使用方法：取本品粉末，加热沸腾后分装，121度灭菌15分钟后，待温度降至55度时加入50ml脱纤维羊血，倾注至培养皿凝固后冷藏待用。哥伦比亚培养基培养基配方：（/L）：取本品粉末，加热沸腾后分装，121度灭菌15分钟后，待温度将常温后，加入50ml脱纤维羊血，待用。大肠杆菌MS2噬菌体液体培养基培养基配方（/L）YeastExtract（酵母浸膏）（胰蛋白胨）(氯化钠)±（25℃）使用说明称取本品（后者效果更佳），加热煮沸1分钟使彻底溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却，备用。磷酸盐缓冲液配制方法：磷酸氢二钠，氯化钠，氯化钾，（/L）YeastExtract（酵母浸膏）（胰蛋白胨）(氯化钠)±（25℃）使用说明称取本品（后者效果更佳），加热煮沸1分钟使彻底溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却，备用。磷酸盐缓冲液配制方法：磷酸氢二钠，氯化钠，氯化钾。 GYCA培养基 YPGA培养基 YDC培养基 巴尔斯氏培养基基础 改良巴尔斯氏培养基基础。

氨基酸是细胞合成蛋白质的基本成分，氨基酸中有12种是细胞本身不合成的，必须由培养液提供。水解乳蛋白、胶原是另外两种较好的天然培养基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解产物，呈蛋黄色粉末状，富含氨基酸。一般配制成0．5%溶液，微酸性。胶原是从动物真皮中提取的，具改善细胞表面特性促使其附着生长的作用。特殊培养基：包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基，除含营养成分外，还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势，如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型，由于胞内渗透压较高，故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。ITC 肉汤基础氯苯酚-替卡西林-氯酸钾肉汤基础 SSDC培养基沙门氏菌-志贺氏菌琼脂 蛋白胨山梨醇胆盐(PSB)肉汤。改良McBride琼脂添加剂

马铃薯葡萄糖水（PD水） 马铃薯蔗糖琼脂（PSA） 麦芽浸膏汤 MEA培养基麦芽浸膏琼脂MEA琼脂。WL鉴别培养基添加剂

总体而言，所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源，但由于微生物营养类型复杂，不同微生物对营养物质的需求是不一样的，因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖类、脂类、蛋白质、核酸、维生素等复杂的有机物，因此培养自养型微生物的培养基完全可以（或应该）由简单的无机物组成。例如，培养化能自养型的氧化硫硫杆菌（Thiobacillus thiooxdans）的培养基组成见表3.9。在该培养基配制过程中并未专门加入其他碳源物质，而是依靠空气中和溶于水中的CO2为氧化硫硫杆菌提供碳源。WL鉴别培养基添加剂

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