二、生化及免疫学检验:1、精浆果糖测定【正常参考值】9.11-17.67mmol/L。【临床意义】(1)精液果糖为0,可见于先天性两侧输精管及精囊腺缺如、两侧输精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常见于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可导致精子运动能量缺乏,甚至不易受孕。2、精浆酸性磷酸酶测定【正常参考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【临床意义】(1)精浆酸性磷酸酶含量增高,常见于前列腺肥大或早期前列腺恶性**患者。(2)精浆酸性磷酸酶含量降低,常见于前列腺炎患者。(3)精浆酸性磷酸酶检测是法医鉴定有无精液**敏感的方法。3、精浆顶体酶活性测定【正常参考值】36.72±21.43U/L。【临床意义】精子顶体酶活力与精子密度及精子顶体完整率呈正相关,其活力不足,可导致男性不育。4、精浆乳酸脱氢酶-X同功酶(LDH-X)测定【正常参考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相对活性:≥0.426。【临床意义】LDH-X具有睾丸及精子的组织特异性,是精于运动获能的关键酶,该酶检测可作为诊断男性不育有价值的指标。睾丸萎缩患者LDH-X降低或消失,精子发生缺陷时无LDH-X形成,少精或无精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。IVOS具有高分辨率和高灵敏度的特点,能够捕捉到微小的细节和变化,进一步提高了精子分析的准确性。上海Hamilton Thorne精子分析高准确率
CASA系统虽然有诸多优点,但是很多因素都会影响到CASA仪器的使用及准确性。CASA系统进行**分析应注意以下几点:3.1标本的采集与制作(1)采集前禁欲2�7天,禁欲时间过长、过短对**质量都有一定影响。(2)容器要清洁。(3)特殊情况下,*可使用专门为采集**设计的无毒性避孕套,普通的乳胶避孕套因含有损害精子活力的物质不可使用。(4)注意保温(20�37℃),并于30分钟内送检验科。(5)标本置于37℃水浴.精子运动参数具有温度敏感性,因此要求计数池应于分析仪恒温板上预温。(6)密切注意**液化的情况,确保液化时间准确,因**样本随放置时间的延长,精子活动力及活动率有减少的趋势。标本液化后取混匀样本**1滴滴在样品池中间,然后进行分析。(7)检测精子活动力,标本密度应控制在2×106/ml到50×106/ml之间。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的标本,通常会增加碰撞的频率,并可能由此出现错误的结果。在这种情况下,建议用同源精浆稀释标本。南京慢速运动精子分析BCFHamilton Thorne精子分析仪具有良好的数据管理和报告生成功能,能够方便用户查阅和分享分析结果。
全自动的IVOS可以提供**快的分析速度以及高质量数据输出。可以使用一次性的和可重复的载玻片,深度从10um~100um。每次分析捕捉100帧图像,扫描速度每秒60帧。**的软件升级。IVOS能提供:精确、客观、具有重复性的结果。高速分析,在60Hz下半秒扫描30帧,为实验室节省成本。[1]主要功能IVOS自动精子活动、浓度、形态分析系统。HamiltonThorne的CASA系统适用于临床、研究实验室、动物繁殖基地、水产业、制药公司等各种领域,成为了精液分析业的金标准。可以应用于包括人类、公牛、马、野猪、狗、兔子、老鼠、绵羊、山羊、鱼以及各种濒危动物。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析软件。
测定精子密度和精子总数的方法主要包括显微镜计数和全自动分析。1.显微镜计数:这是传统的测定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,应在实验室中尽快进行计数。应在光学显微镜下将精子进行分类,这一步非常重要,因为完整的精子才能被计数。然后,将剩余的精液样本通过自然沉降或离心的方法让精子下沉,通过显微镜观察并计数。这种方法需要一定的经验和技巧,而且受到许多因素的影响,如精子的活动性、浓度、形态等。2.全自动分析:随着科技的发展,现在有全自动的精子分析仪,可以快速准确地测定精子密度和总数。这种方法通过激光技术进行,可以测量大量精子,包括前向运动的精子。这些仪器通常可以提供更精确的结果,并且减少了人为错误。在进行精子计数前,男性应避免长时间禁欲,因为这可能会影响精子的数量和质量。同时,健康的饮食和生活方式也有助于提高精子的数量和质量。传统的CASA系统仍使用传统阈值图像处理方法,准确率有待提高。
人类精子冷冻保存和储存:增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容,更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议:将样本分管分罐分开储存;对使用的材料和留存标本建立定期核验程序;所有储罐都应有液位监控报警系统,以监测温度和液氮液位,传感器应连接警报器,可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明,玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻,可以防止冰晶的形成,并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中,也可以使用封闭系统,不需要无菌的液氮。全自动精子分析仪极大提高临床检验水平,广泛应用于泌尿科,男性科以及计划生育、优生优育研究等。南京计算机辅助精子分析LIN
HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,直线性(LIN):曲线轨迹的直线性。上海Hamilton Thorne精子分析高准确率
通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向运动精子百分率上的相关性较低]。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较,其结果为:采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数;变异系数(CV)是29%活动精子比率的CV为24%平均路径速度(VAP)的CV为43∙85%。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术(授精IVF)的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能;同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。上海Hamilton Thorne精子分析高准确率