前沿性检查:目前不作为生育力低下男性初步评估的常规方法。这一部分包括了非常专业化的、主要用于研究的方法和其他新兴检测技术。有研究认为,氧化应激可能是影响人类精子功能和妊娠结局的重要因素;新的证据也表明了精子DNA完整性和染色质组装与生育力的关系。前沿性检查一节中详细介绍了精子氧化应激和活性氧实验、精子染色质检测(苯胺蓝和色霉素A3染色)的具体实验操作及讨论。手册重写了计算机辅助精子分析(CASA)部分,强调了CASA对于检测精子浓度的局限性与质控要求,增加了CASA检测精子超活化运动的内容。对精子跨膜离子流和转运的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。为此,手册新增了检测精子跨膜离子流和转运的内容。所有操作人员都应接受规范的CASA分析仪使用培训,严格按照使用指南进行操作。CASA精子分析W.H.O 4
九、精液酸碱度(pH)检查[正常参考值]7.2-8.0。[临床意义]1.精液pH值<7.0,多见于少精或无精症,常反映输精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睾病变等。2.精液pH值>8.0,常见于急性***,如精囊炎、前列腺炎等。十、男性生育力指数测定[计算公式]I=M(N×V)/(A×106)式中I为男性生育力指数;M为活动精子百分率;N为每毫升的精子数;V为精子运动的速度;A为畸形精子的百分率。[正常参考值]正常人生育力指数>l。[临床意义]1.生育指数为0,表明完全无生育能力。2.生育指数为0-1之间,表明有不同程度的生育障碍。CASA精子分析W.H.O 4精子分析,平均角位移(MAD):精子头沿其曲线轨迹瞬时转折角度的时均J对值。
通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向运动精子百分率上的相关性较低]。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较,其结果为:采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数;变异系数(CV)是29%活动精子比率的CV为24%平均路径速度(VAP)的CV为43∙85%。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术(授精IVF)的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能;同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。
HamiltonThorne精子分析仪IVOSⅠ与IVOSⅡ一致性比对分析根据质量控制的要求,对新精子分析系统进行性能验证后,应与旧系统进行一致性评价,从而保证检测结果的准确性。方法:选用原有HamiltonThorne精子分析仪IVOSⅠ为参比仪器,新购仪器IVOSⅡ为实验仪器,对精子分析系统的主要参数(精子浓度、前向运动精子百分率、总活力)进行分析比对。结果:两台仪器的方法内和方法间离群值检验、偏倚图和散点图的线性关系和离群值检测所有参数均能符合比对要求,检测结果具有相关性;对实验仪器的检测结果适合范围的检验,当其精子浓度r=0.988,前向运动精子百分率r=0.975,总活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范围合适;对预期偏倚(Bc)的接受性评价表明当精子浓度在12×10~6/ml,允许总误差(TEa)为6.67%;当前向运动精子百分率<31%,TEa为2.34%,两项检测的Bc上限<1/2允许误差(Ea),实验仪器经比对分析显示符合质控要求。结论:通过比对分析,得出两台精子分析系统的主要参数(精子浓度、前向运动精子百分率、总活力)结果具有可比性,检测结果一致,可同时用于临床标本的检测。IVOS已成为快速、准确、稳定可靠的进行精子分析的代名词。
HamiltonThorneIVOS是一套整合了光学观察系统的精子动力分析仪。如今,IVOS已成为快速、准确、稳定可靠的进行精子分析的代名词。仪器特点:新款内建CDWriter!内部整合光学系统自动化,内置样品台可用于多种样品分析仪器操作简单提供满足需求的分析结果实时质量控制分析结果列表内部整合的光学系统IVOS是***一套内置光学系统的精子动力分析仪。与其它同类产品相比,IVOS并不采用显微镜持续照明方式,而是采用闪光拍摄方法。这种拍摄方法能够消除由于精子运动而造成的位置模糊。通过60祯/秒的拍摄速度,能够得到准确可靠的精子速度和运动参数分析结果。IVOS可在以下三种模式下分析精子样品:相差,明场和多波长荧光模式。自动化内置加热平台作为整合光学系统的一部分,由计算机控制的IVOS样品平台可在分析时提供准确的温度控制和位置定位。样品台的温度可在室温到40°C范围内调节,稳定度为0.5°C。分析区域的选择可选用自动或手动方式。样品台的温度和位置可实时显示在视频窗口中。IVOS还允许用户自己进行分析室设定,控制分析样品量。HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,摆动性(WOB):实际的曲线路径关于平均路径的摆动值。人精子分析精子动力分析
IVOS和CEROS集成了智能化的分析软件,能够自动识别和计算精子的各项参数,减少了人工操作的误差。CASA精子分析W.H.O 4
扩展性检查:可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤,并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关,精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容,已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上,越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因,而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行,但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响,泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。CASA精子分析W.H.O 4