测定精子密度和精子总数的方法主要包括显微镜计数和全自动分析。1.显微镜计数:这是传统的测定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,应在实验室中尽快进行计数。应在光学显微镜下将精子进行分类,这一步非常重要,因为完整的精子才能被计数。然后,将剩余的精液样本通过自然沉降或离心的方法让精子下沉,通过显微镜观察并计数。这种方法需要一定的经验和技巧,而且受到许多因素的影响,如精子的活动性、浓度、形态等。2.全自动分析:随着科技的发展,现在有全自动的精子分析仪,可以快速准确地测定精子密度和总数。这种方法通过激光技术进行,可以测量大量精子,包括前向运动的精子。这些仪器通常可以提供更精确的结果,并且减少了人为错误。在进行精子计数前,男性应避免长时间禁欲,因为这可能会影响精子的数量和质量。同时,健康的饮食和生活方式也有助于提高精子的数量和质量。在男科和辅助生殖技术领域,精子质量的评估是诊断和处理的重要环节。香港狗精子分析W.H.O 4
精子分析仪工作原理以灰度识别CASA为例,采用高分辨率的摄影技术与显微镜结合,**标本液化后吸入计数,通过显微镜放大后,用图像采集系统获取精子动、静态图像后输入计算机。根据设定的精子大小和灰度、精子运动移位及运动参数,对采集图像进行精子密度、活动力、活动率、运动特征等几十项检验项目动态分析,由计算机处理后,打印出“**分析检查报告以及精子动态特征分布图”。一次能对1000个精子进行动态检测分析,2-3分钟即可完成检测[1]。优点:操作简便,用量少,检测速度快,重复性优于人工检测,并且能够快速、准确的测定精子密度、活力、精子分级等,还可提供精子运动状态的多种参数等。缺点:影响分析结果的因素较多,除**本身性质所含的固有误差外,不同的精子计数池的相对准确性和精确性可产生明显不一致的效果。美国濒危物种精子分析LIN精子分析系统较传统的分析法比较,具有速度快、量比性好、准确性高、为临床和科研提供客观的检测依据。
精液一般检查(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)颜色和透明度:正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和**,黄色脓样精液,见于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状,在精液中纤溶酶的作用下30分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样,可能是精子数量减少,见于生殖系统炎症,精液不凝固见于精囊阻塞或损伤;如果精液1小时后不液化,可能是由于炎症破坏纤溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。(4)酸碱度:pH值。正常精液呈弱碱性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的阴道分泌物,pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢,不利于受孕。
精液显微镜检查(1)精子存活率:排精后30~60分钟,正常精子存活率应为80%~90%,精子存活率降低是导致不育的重要原因。(2)精子活动力:指精子活动状态,也是指活动精子的质量。世界卫生组织(WHO)推荐将精子活动力分为4级:①精子活动好,运动迅速,活泼有力,直线向前运动;②精子活动较好,运动速度尚可,游动方向不定,呈直线或非直线运动,带有回旋;③精子运动不良,运动迟缓,原地打转或抖动,向前运动能力差;④死精子,精子完全不活动。正常精子活动力应在③级以上,若>40%的精子活动不良(③、④)级,常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低,主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性***,应用某些药物如抗疟药、雄***等所致。Hamilton Thorne精子分析仪具备快速和高效的分析功能,能够在短时间内处理大量样本,提高工作效率。
七、精子形态检查[正常参考值]畸形精子:<10%-15%;凝集精子:<10%;未成熟精细胞:<1%。[临床意义]1.精索静脉曲张病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟时已进入精液,或静脉回流不畅造成阴囊内温度过高和睾丸组织缺氧,或血液带有毒性代谢产物从肾或肾上腺静脉逆流至睾丸,上述原因均有损于精子形态。2.精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能异常。3.睾丸曲细精管生精功能受到药物或其他因素影响或伤害时,精液中可出现较多病理性未成熟精细胞。八、精液细胞检查[正常参考值]白细胞(WBC):<5个/HP(高倍镜视野);红细胞(RBC):0-偶见/HP。[临床意义]1.精液中白细胞增多,常见于精囊炎、前列腺炎及结核等。2.精液中红细胞增多,常见于精囊结核、前列腺*等。3.精液中若查到*细胞,对生殖系*有诊断意义。该设备的设计紧凑,占用空间小,适合不同规模的实验室使用。北京水生动物精子分析LIN
计算机辅助精子分析根据初估的精子浓度选择合适的检测方法,确保检测过程的准确性和可靠性。香港狗精子分析W.H.O 4
美国HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOXIVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。香港狗精子分析W.H.O 4