精液显微镜检查(1)精子存活率:排精后30~60分钟,正常精子存活率应为80%~90%,精子存活率降低是导致不育的重要原因。(2)精子活动力:指精子活动状态,也是指活动精子的质量。世界卫生组织(WHO)推荐将精子活动力分为4级:①精子活动好,运动迅速,活泼有力,直线向前运动;②精子活动较好,运动速度尚可,游动方向不定,呈直线或非直线运动,带有回旋;③精子运动不良,运动迟缓,原地打转或抖动,向前运动能力差;④死精子,精子完全不活动。正常精子活动力应在③级以上,若>40%的精子活动不良(③、④)级,常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低,主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性***,应用某些药物如抗疟药、雄***等所致。WHO第6版明确提出:使用CASA系统须遵循适当的程序步骤,才能获得可靠和可重复的结果。南京快速运动精子分析W.H.O 4
前沿性检查:目前不作为生育力低下男性初步评估的常规方法。这一部分包括了非常专业化的、主要用于研究的方法和其他新兴检测技术。有研究认为,氧化应激可能是影响人类精子功能和妊娠结局的重要因素;新的证据也表明了精子DNA完整性和染色质组装与生育力的关系。前沿性检查一节中详细介绍了精子氧化应激和活性氧实验、精子染色质检测(苯胺蓝和色霉素A3染色)的具体实验操作及讨论。手册重写了计算机辅助精子分析(CASA)部分,强调了CASA对于检测精子浓度的局限性与质控要求,增加了CASA检测精子超活化运动的内容。对精子跨膜离子流和转运的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。为此,手册新增了检测精子跨膜离子流和转运的内容。北京慢速运动精子分析精确温度控制精子分析,直线速率(VSL):精子头在开始检测时的位置与终止所处位置之间的直线运动的时均速率。
通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向运动精子百分率上的相关性较低]。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较,其结果为:采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数;变异系数(CV)是29%活动精子比率的CV为24%平均路径速度(VAP)的CV为43∙85%。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术(授精IVF)的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能;同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。
扩展性检查:可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤,并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关,精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容,已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上,越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因,而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行,但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响,泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。男性精液检测主要依赖计算机辅助精子分析仪(computer assistant semen analyses,CASA)。
精子分析仪是计算机技术和图像处理技术结合的**分析仪器设备,通过显微镜下摄像和计算机快速分析多个视野内精子的运行轨迹,客观记录了精子的密度、活动力、活动率和存活率等各项参数。计算机辅助**分析仪由硬件系统和软件系统组成。硬件系统主要由显微摄像系统、图像采集系统、恒温系统、计算机处理系统等四大系统构成。此外,仪器一般配有**样品盒,以确保单层取样[1]。1.显微摄像系统:由显微镜及CCD组成。可以将标本信号通过显微放大由CCD传输到计算机2.图像采集系统:由图像卡构成,其功能是对CCD信号进行抓拍、识别、预处理后,将成熟信号输送到计算机。3.恒温系统:由加温和保温设备组成。加温是通过热吹风机不断将适宜的温度热风鼓入封闭保温罩内,提供稳定、可靠的检查环境。4.计算机系统:对图像信号进行***系统的加工处理,对获得的数据进行输出和存储的设备。软件系统采用**的精子质量分析软件,利用现代化的计算机识别技术和图像处理技术,对精子的动静态特征进行***的量化分析,对精子的密度、活力、活率、运动轨迹等特征进行量的检测分析不同品牌CASA分析的结果差异较大,因此,更高效精确的精液质量检测系统对促进男科学发展具有重要的意义。香港马精子分析精确温度控制
IVOS和CEROS集成了智能化的分析软件,能够自动识别和计算精子的各项参数,减少了人工操作的误差。南京快速运动精子分析W.H.O 4
HamiltonThorneIVOS是一套整合了光学观察系统的精子动力分析仪。如今,IVOS已成为快速、准确、稳定可靠的进行精子分析的代名词。仪器特点:新款内建CDWriter!内部整合光学系统自动化,内置样品台可用于多种样品分析仪器操作简单提供满足需求的分析结果实时质量控制分析结果列表内部整合的光学系统IVOS是***一套内置光学系统的精子动力分析仪。与其它同类产品相比,IVOS并不采用显微镜持续照明方式,而是采用闪光拍摄方法。这种拍摄方法能够消除由于精子运动而造成的位置模糊。通过60祯/秒的拍摄速度,能够得到准确可靠的精子速度和运动参数分析结果。IVOS可在以下三种模式下分析精子样品:相差,明场和多波长荧光模式。自动化内置加热平台作为整合光学系统的一部分,由计算机控制的IVOS样品平台可在分析时提供准确的温度控制和位置定位。样品台的温度可在室温到40°C范围内调节,稳定度为0.5°C。分析区域的选择可选用自动或手动方式。样品台的温度和位置可实时显示在视频窗口中。IVOS还允许用户自己进行分析室设定,控制分析样品量。南京快速运动精子分析W.H.O 4