北京兔子精子分析DSL

精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。

精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后，滴于血细胞计数板上，在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。

将已经液化的精液标本均匀混合，用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀释液至11刻度，振荡三分钟，然后置于血球计数板内，计数二大格（每格面积1平方毫米）之精子数，在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个，则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制：重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用，福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时，可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内，稀释后进行计数。如精子的数目极少，亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的，还有25%是由输精管道的其他部分来的，因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查，才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。 Hamilton Thorne精子分析仪具备快速和高效的分析功能，能够在短时间内处理大量样本，提高工作效率。北京兔子精子分析DSL

CASA，即计算机辅助精子分析，是一种利用技术手段对精子活力、浓度和形态进行精确评估的方法。WHO第五版指南强调，相比人工检测，CASA提供更准确的数据和精子动力学参数，如前向运动和超活化运动，以及获能精子特征参数。研究显示，CASA检测的精子参数与体内外受精成功率和受孕时间有***关联。使用CASA分析仪，通常通过相差显微镜识别活动精子，适用于精子动力学分析。但要确保可靠结果，操作者需注意标本制备、帧频率、精子浓度等因素。每份样本至少需要分析200个活动精子的运动轨迹，更多精子样本有助于分类和变异性的分析。国内已有自主研发的精子分析仪，通常进行两次分析，每次至少200个精子，结果通过统计学分析得出。CASA在评估精子浓度时，需精确测量精子体积，确保**完全液化并充分混匀。计数板的精确性和计数一致性是关键，每次检测需满足5个视野和200条以上精子的比较低要求。对于高浓度**，可能需要稀释以减少误差。形态分析方面，CASA能够定量评估精子头部、中段和主段，尾部缺陷可通过活力评估。对于碎片过多或黏稠的**，可能需要洗涤以减少背景干扰。CASA中涉及一系列术语，如VCL（曲线速度）、VSL（直线速度）等，它们反映了精子运动的不同特性。香港鱼精子分析ALH全自动精子分析仪在临床Z疗中展现了明显的优势。

扩展性检查：可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤，并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关，精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容，已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上，越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因，而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行，但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响，泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。

采集精液前5～7天内必须停止性生活，并且不得有**、梦遗等情况，还应禁烟戒酒，忌服对生精功能有影响的药物等。采取精液时间以晨起为佳，采精前用温水将双手、**，尤其是**洗净。可采用**法或电动按摩**法引起排精。精液的排出具有一定顺序，开头部分来自前列腺、附睾及壶腹，伴有大量精子，***部分来自精囊，故应收集整份精液，不要遗漏任何部分，尤其是开头部分。正因为易丢失精液的***部分,故不能用体外**法收集精液。盛精液的容器应干净、无菌、干燥，采精前容器的温度应与室温相同；瓶子不应过大，但瓶口不应过小，以免将精液射出瓶外；还应贴上标签，记录姓名及取精时间。在冷天应将精液标本保温，放置在贴身内衣袋中，不可倾斜或倒置，尽可能在1小时内送到实验室。IVOS具有高分辨率和高灵敏度的特点，能够捕捉到微小的细节和变化，进一步提高了精子分析的准确性。

CASA精子运动速度和运动轨迹特征主要参数有：①轨迹速度（VCL）：也称曲线速度，即精子头部沿其实际行走曲线的运动速度。②平均路径速度（VAP）：精子头沿其空间平均轨迹的运动速度，这种平均轨迹是计算机将精子运动的实际轨迹平均后计算出来的，可因不同型号的仪器而有所改变。③直线运动速度（VSL）：也称前向运动速度，即精子头部直线移动距离的速度。④直线性（LIN）：也称线性度，为精子运动曲线的直线分离度，即VSL/VCL。⑤精子侧摆幅度（ALH）：精子头实际运动轨迹对平均路径的侧摆幅度，可以是平均值，也可以是最大值。不同型号的CASA系统由于计算方法不一致，因此相互之间不可直接比较。⑥前向性（STR）：也称直线性，计算公式为VSL/VAP，亦即精子运动平均路径的直线分离度。⑦摆动性（WOB）：精子头沿其实际运动轨迹的空间平均路径摆动的尺度，计算公式为VAP/VCL。⑧鞭打频率（BCF）：也称摆动频率，即精子头部跨越其平均路径的频率。⑨平均移动角度（MAD）：精子头部沿其运动轨迹瞬间转折角度的时间平均值。⑩运动精子密度：每毫升精液中VAP>0μm/s的精子数。HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数，直线性（LIN）‌：曲线轨迹的直线性。香港鱼精子分析ALH

‌精子分析可以分析参数有，曲线速率（VCL）‌：精子头沿其实际曲线运动的时均速率。北京兔子精子分析DSL

方法:使用两种已知浓度的质控乳胶珠溶液,1份浓度为(35±5)×106/ml,另1份浓度为(18.0±2.5)×106/ml,评价4种计数方法的准确性和精确性,并比较4种方法计数精液的结果。结果:计数乳胶珠时,CellVU计数池的结果**接近已知浓度,分别为(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,变异系数(CV)值分别为12.80%和10.58%;血细胞计数池和Makler计数池结果均高于已知浓度,前者为(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分别为10.81%和8.89%,后者为(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分别为14.86%和14.96%;CASA系统结果低于已知浓度,为(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比较低,分别为7.22%和6.50%。计数精液时,CellVU计数池与CASA系统结果差异无***性(P=0.71),分别为(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血细胞计数池和Makler计数池结果差异无***性(P=0.14),分别为(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU计数池、CASA系统与血细胞计数池、Makler计数池结果间差异***(P<0.05或P<0.01)。结论:计数精液时,CASA系统与CellVU计数结果差异无***性。各实验室可选择合适的手工或CASA计数方法。北京兔子精子分析DSL