香港快速运动精子分析W.H.O 4

美国Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOX IVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数，直线性（LIN）‌：曲线轨迹的直线性。香港快速运动精子分析W.H.O 4

通过结果的生物学意义对结果质量进行评估‚当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向运动精子百分率上的相关性较低］。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较，其结果为：采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数；变异系数（CV）是29％‚活动精子比率的CV为24％‚平均路径速度（VAP）的CV为43∙85％。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较‚实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精‚因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的‚只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术（授精IVF）的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能；同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。广州计算机辅助精子分析VSLCASA系统减少了人为因素对检测结果的影响，提高了检测的客观性和可重复性‌。

精子分析仪使用注意事项

1.样品制备是CASA取得高质量检查结果的关键。CASA采用深度为10um样品池，能保证精子在单层界面内自由运动。取样分析前标本必须充分混匀，用微量取液器取5~7ul**加入样品池中，用0.5mm厚皿盖片盖紧。

2.不洁净的计数池可影响精子的活力，尤其影响灰度CASA精子计数的准确性。

3.精子样品密度过大时，造成图像处理上的粘连，无法分析每个精子的运动特性。**中所含精子太少时，需增加检查视野数量或者使用低倍物镜观察，以提高样品检出率。

人类精子冷冻保存和储存：增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容，更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议：将样本分管分罐分开储存；对使用的材料和留存标本建立定期核验程序；所有储罐都应有液位监控报警系统，以监测温度和液氮液位，传感器应连接警报器，可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明，玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻，可以防止冰晶的形成，并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中，也可以使用封闭系统，不需要无菌的液氮。通过计算机图像处理功能对显微镜下放大的精子图像进行识别和跟踪计算，从而得出精子动静态各项参数。

医生为了鉴定男性生育能力，常嘱男方作精液检查，正常精液颜色为灰白色或乳白色。如节欲时间长者，可呈淡黄色，若出现鲜红色. 暗红色，则提示患者有炎症或生殖道损伤。每次排精量为2~6毫升，常受排精次数与频率的影响。新鲜精液呈稠厚胶冻状，1小时之内应液化为稀薄的液体，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液丝长度一般不超过2厘米，否则视为异常。精液呈弱碱性，PH值为7.2~7.8。正常精子数应超过2000万/毫升。排精后1小时内活动精 ＞=50%。世界卫生组织推荐精子活动力分为四级：0级：不活动；1级：精子原地摆动；2级：有中等的前向运动；3级：前向运动活跃，快速直线运动。正常的精子活动力为2~3级的精子＞=40%~50%.精子形态：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能单从精液的一项指标定论，应对精子数量 活力 活动率 液化时间 畸形率等多方面进行综合能力分析。 采集精液前5～7天内必须停止性生活，并且不得有**、梦遗等情况，还应禁烟戒酒，忌服对生精功能有影响的药物等。CASA系统用量少，检测速度快，能够显著提高实验室的工作效率。香港计数精子分析VSL

精子分析系统较传统的分析法比较，具有速度快、量比性好、准确性高、为临床和科研提供客观的检测依据。香港快速运动精子分析W.H.O 4

精液检查前有什么注意事项？

一、留精液前，病人应停止**4～7天。检查前1周不能用丙酸睾丸酮、**睾丸酮、苯丙酸诺龙。采取精液时，可用软皂或石蜡油做**按摩，将标本收集在无菌的试管中；也可用避孕套（冲洗干净，不含杀精子药物）或采用**中断法收集精液，但这样收集的量往往不多。如用上述方法采不到精液，可经直肠内按摩精囊及输精管末端、压迫采尿，检查沉渣中有无精子。不要将精液暴露在过热和过冷的环境中。及时交给医生备查，不得超过30分钟。冷天要注意保暖，送检时可放在内衣口袋里保温。

二、如果要进行细菌培养，应先冲洗、消毒尿道口，再将精液收集在无菌试管中。夫妻同居3年以上，没有采取任何避孕措施而未能受孕的称不孕症。如果是不孕症，在双方未进行检查前，不能盲目怀疑某一方，更不能认为不孕的原因是女方。妊娠是夫妻双方的事。实现受孕，男方的精液含量应正常，形态和动力也应正常。女方能正常排卵，精子和卵子能结合成受精卵，这种受精卵能在子宫内膜种植。上述的几个环节中的某一个环节发生障碍，都可引起不孕。

三、如果上述检查结果精液是正常的，女方也应去医院检查，包括全身情况、生殖***、卵巢排卵功能、输卵管通畅否、免疫检查。 香港快速运动精子分析W.H.O 4