云南兔动物模型建模

伴vonFreyhairs检测）热板法大/小鼠甩尾法大/小鼠热辐射致痛法大/小鼠压痛法大/小鼠VonFreyhairs法大/小鼠醋酸扭体法小鼠福尔马林致痛法大/小鼠佐剂CFA引起的疼痛大/小鼠角叉菜胶致痛模型大/小鼠LPS诱导痛模型大/小鼠脊神经选择性结扎（L5/L6）大/小鼠坐骨神经分枝选择性损伤模型（SNI）大/小鼠糖尿病疼痛、切口疼痛，性疼痛模型大/小鼠抗痴呆小鼠获得性记忆障碍模型（6道小鼠跳台视屏分析系统）小鼠小鼠记忆巩固不良模型（6道小鼠跳台视屏分析系统）小鼠小鼠记忆再现障碍模型（6道小鼠避暗视屏分析系统）小鼠小鼠明暗箱法（4道小鼠明暗箱视屏分析系统）小鼠大鼠获得性记忆障碍模型（Morris水迷宫视屏分析系统）大鼠小鼠脑内乙酰胆碱酯酶活力测定小鼠D-半乳糖致小鼠痴呆模型小鼠新物体识别实验大鼠APP/PS1双转基因小鼠模型（Morriswatermaze,CognitionWall）转基因小鼠体外实验细胞水平。小鼠肾纤维化（UUO）模型建立。云南兔动物模型建模

酒精性肝病(AH)大鼠模型建模方法【方法】1、正常组大鼠自由饮水。2、酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease，AFL)模型组大鼠自由饮用酒精饮料，其酒精浓度从5%开始，每个浓度维持一周，依次改为10%、15%、20%、25%、30%、35%至40%，以40%浓度持续至12周。3、在实验过程中，各组大鼠均给以普通颗粒饲料，共持续为12周。4、第12，动物禁食12h，称重，下腔静脉取血处死，血液离心取上清备用。【检测】1、生化指标检测检测ALT、AST、TC、TG、FFA、LDL-C、HDL-C和血糖的含量。2、组织病理学酒精性脂肪肝模型组大鼠肝脏体积增大，明显肿胀，包膜紧张，边缘圆钝，呈奶黄色，切面油腻，腹腔内尤以有腹膜后脂肪堆积明显。HE染色显示，正常组肝脏内无明显脂肪变性，肝小叶结构正常，肝细胞索围绕静脉呈放射排列。模型组肝脏弥漫大量脂肪变性，细胞体积增大，呈气球样变。3、标志因子水平ELISA法测定血清中TNF-α和ApoB的含量。云南兔动物模型建模好的动物模型能够较好地模拟疾病状态，为的研究提供可能。

但自然衰老模型的缺点是建模时间较久，一般情况下要饲养15个月以上（虽可以直接购买适龄动物，但成本非常高），由于在建模过程中饲养时间过长，投入的人力和物力成本相对较大，另外，在饲养过程中感然其他疾病机率也相对较高且健康状态较差，特别是进入老龄期后容易死亡，在后期样本检测中个体差异大。快速老化模型日本京都大学竹田俊男教授在1968年培育出快速老化小鼠（SAM），在此基础上又于1975年培育出易快速老化系小鼠（SAMP）和抗快速老化系小鼠（SAMR）。其中SAMP8小鼠在学习记忆减退、神经递质改变、APP代谢异常、Aβ沉积等方面表现出与年龄相关的AD临床特征，一致认为是研究AD比较好的动物模型。

人类疾病之间的差异。要避免选用与人类对应相似性很小的动物疾病作为模型材料。为了增加所复制动物疾病模型与人类疾病的相似性，应尽量选用各种敏感动物与人类疾病相应的动物模型，可参考相关文章《各种敏感动物与人类相似的疾病模型》。折叠注意所选用动物的实用价值折叠注意环境因素对模型动物的影响复制模型的成败往往与环境的改变有密切关系。拥挤、饮食改变、过度光照、噪音、屏障系统的破坏等，任何一项被忽视都可能给模型动物带来严重影响。除此以外，复制过程中固定、出血、麻醉、手术、药物和并发症等处理不当，同样会产生难以估量的橄榄油联合酒精致肝硬化门脉高压大鼠模型。

动物模型很多模型在组织病理上的变化与临床NASH很相似，但是肝脏的代谢、转录特点可能并不一致。因此动物模型不应在组织学上还应该在蛋白质组、脂质组和转录组等基础上评估模型与临床疾病的相关性。其中一些转录组特征包括免疫信号、脂质代谢、糖代谢改变。正常小鼠（比如C57/BL6）给予蛋氨酸-胆碱缺乏饮食（MCD）和胆碱缺乏、L-氨基酸补充（CDAA）的饮食可以形成与NASH相似的病理组织如肥胖、炎症、纤维化。然而，胆碱缺乏饮食诱导的模型与临床NASH发病机制无关，因为胆碱缺乏会阻止肝脏脂质合成通路。它主要影响身体内的大中动脉，如冠状动脉、颈动脉、脑动脉和肾动脉等，其发病机制的主要过程。云南兔动物模型建模

人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。云南兔动物模型建模

40mmnaoh，)，并在金属浴100℃加热1h；(3)取出离心管，冷却至室温后，加入100μl的中和液(40mmtris-hcl，)，10000g离心2min后，取上清用于小鼠基因型鉴定。(3)pcr扩增：按照如系配置pcr反应体系2×taqmix：10μl尾巴组织裂解液：2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward)：1μl(浓度：10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse)：1μl(浓度：10mm)ddh2o：6μl。引物序列如下：gm20541-loxp-forward序列：5’-attccccttcaagatagctac-3’；gm20541-loxp-reverse序列：5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’；six3-cre-forward序列：5’-gccgccgggatcactctcg-3’；six3-cre-reverse序列：5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。扩增程序：pcr反应体系配制完后，在pcr仪上于95℃预加热5分钟使模板dna充分变性，然后进入扩增循环。在每一个循环中，先于95℃保持30秒钟使模板变性，然后将温度降到复性温度58℃，保持30秒，使引物与模板充分退火；在72℃保持30秒，使引物在模板上延伸，合成dna，完成一个循环。重复这样的循环25次，使扩增的dn段大量累积。，在72℃保持5分钟，使产物延伸完整，4℃保存。(4)凝胶电泳称取1g琼脂糖放于100mltaebuffer中。云南兔动物模型建模