湖北豚鼠动物模型实验

小鼠尾尖用酒精擦拭尾巴，引起轻微的血管扩张；用无菌手术刀、刀片或锋利的剪刀，快速截断小鼠尾尖1-2毫米。如果需要多次采，之后每次需截除2-3毫米；从尾部像尾尖方向按摩，增加血流；用采集血液；结束后，按压伤口或使用止血剂来止血；每次量大约可达。小鼠眼球取血单手保定好小鼠；必要时剪掉小鼠胡须，防止污染血液；轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；用弯头镊夹取眼球并快速在摘取；同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠；大鼠眼眶取血先将小鼠进行麻醉，大鼠翻正反射消失时不在继续麻醉；抗凝处理过的玻璃毛细采样管，掰成2-3厘米长度；右手食指和拇指轻按眼眶两侧皮肤，使眼球突出，毛细管从内侧的眼球与眼睑的缝隙处进入，轻轻旋转毛细管，稍微深入眼球后上方，血液流速快的时候4-5滴即可，温柔的将毛细管取出；用棉签按压大鼠眼眶止血，每次可取血50-100微升，将血液放入冰盒中保存。小鼠心脏取血先将小鼠麻醉，稍靠右侧平躺在手术板上固定；左侧第三四根肋骨间触摸心脏，跳动明显，慢慢进针；针有回血停止进针，开始取血；一次可以300到500微升，小鼠存活，放到加热垫上待小鼠苏醒后放入笼中。IgA肾病小鼠模型IgA 肾病是常见的原发性肾小球疾病,约占原发性肾小球疾病的 1/3。湖北豚鼠动物模型实验

所述高原光照环境模拟装置15包括可见暖光系统和照明亮度无极控制系统，所述可见暖光系统设置饲养仓2顶部。本实施例的工作原理:本系统集成了可见暖光系统(可模拟高原红外线和紫外线)与照明亮度无极控制系统，需要灯光时，可通过灯光系统开启紫外灯以及照明灯，并可根据所需实现亮度调节，通过日光灯加紫外线灯来实现高原高紫外线光照环境。实施例5在实施例1的基础上提供的一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统，所述高原温度环境模拟装置16包括降温系统、升温系统、温控系统和温度采集显示系统。本实施例的工作原理：本系统配置降温系统、升温系统、温控系统与温度采集显示系统使系统内温度可无极调控，以保障海拔(3000m～7000m)高原温度环境进行模拟，温度调节通过冷暖风机来实现，就是和空调一样的原理。实施例6在实施例1的基础上提供的一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统，所述高原湿度环境模拟装置17包括加湿系统、除湿系统、湿度控制系统和湿度采集显示系统。本实施例的工作原理：本系统配置加湿系统、除湿系统、湿度控制系统与湿度采集显示系统使系统内湿度可无极调控，以保障海拔(3000m～7000m)高原湿度环境进行模拟。湖北裸鼠动物模型建模致使肾小球系膜这以 IgA 为主的免疫复合物沉积,同时使系膜细胞增生,基质增多。

本发明涉及医学工程技术领域，具体而言，涉及一种利用gm20541基因构建视网膜色素变性疾病模型的方法和应用。背景技术：视网膜色素变性(retinitispigmentosa，rp)是一组视网膜光感受器异常导致的遗传性致盲眼底病，在全世界的发病率约为1/3000～1/4000，而在中国人群的发病率可达1/3500，由于我国人口众多，rp患者可达三十万之众，给家庭和社会带来了沉重的负担。目前针对rp的诊断和面临许多困难，尚无有效的手段，这主要归因于其在临床表型和遗传上具有高度的异质性，针对其病理机制系统研究不足。典型的rp患者早由于视杆细胞功能缺陷而出现夜盲和视野狭窄，逐步发展为管状视野，直至失明；眼底检查可见视网膜色素沉着。在病理学方面，典型的rp主要影响视杆细胞，造成视杆细胞死亡并继发视锥细胞死亡，主要表现为光感受器受损、变性，视网膜外核层逐渐变薄直至消失，视网膜外网层及其他相关细胞层出现相应病理改变。此外，由于rp在临床表型和遗传模式上均具有高度的异质性，导致许多的rp致病机制尚不清楚，这为rp疾病的临床诊断带来极大困难，因此针对rp疾病的致病机制研究迫在眉睫。而目前，缺乏相应的rp疾病模型。

40mmnaoh，)，并在金属浴100℃加热1h；(3)取出离心管，冷却至室温后，加入100μl的中和液(40mmtris-hcl，)，10000g离心2min后，取上清用于小鼠基因型鉴定。(3)pcr扩增：按照如系配置pcr反应体系2×taqmix：10μl尾巴组织裂解液：2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward)：1μl(浓度：10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse)：1μl(浓度：10mm)ddh2o：6μl。引物序列如下：gm20541-loxp-forward序列：5’-attccccttcaagatagctac-3’；gm20541-loxp-reverse序列：5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’；six3-cre-forward序列：5’-gccgccgggatcactctcg-3’；six3-cre-reverse序列：5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。扩增程序：pcr反应体系配制完后，在pcr仪上于95℃预加热5分钟使模板dna充分变性，然后进入扩增循环。在每一个循环中，先于95℃保持30秒钟使模板变性，然后将温度降到复性温度58℃，保持30秒，使引物与模板充分退火；在72℃保持30秒，使引物在模板上延伸，合成dna，完成一个循环。重复这样的循环25次，使扩增的dn段大量累积。，在72℃保持5分钟，使产物延伸完整，4℃保存。(4)凝胶电泳称取1g琼脂糖放于100mltaebuffer中。脂多糖（LPS）联合烟熏法致慢性阻塞性肺部疾病小鼠模型。

皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型一、服务信息1、动物模型名称：皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雌雄不限4、实验动物年龄：成年5、实验动物体重：160-200g6、实验动物环境：SPF级二、服务项目服务编号服务内容服务周期价钱DH2025皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型1周询价1、实验方法：热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠，根据体重腹部备皮，然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯，将纱布条浸入热水中，待水温恒定于99℃时，取出纱布，立即平铺于待烫部位，于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤，致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准：a.皮肤大体观察：致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好，有少量红褐**素沉着，皮肤轻微挛缩，表皮光滑；致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好，皮肤瘢痕形成，表面粗糙不平。b.皮肤组织病理学观察：致伤3s大鼠表皮层次尚清楚，细胞明显肿胀、变性，层次结构尚清楚，细胞核结构不清；致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落，结构不清，明显变性、坏死，部分细胞已溶解。三、交付标准:1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。通过建立脑缺血-再灌注动物模型，模拟人类ICVD的病理过程。湖南兔动物模型实验室

缺血性脑血管病(ICVD)是威胁人类健康与生存的主要疾病之一。湖北豚鼠动物模型实验

一种是用beta巯基乙醇打开蛋白质分子二硫键的，另一种是用DTT(二硫苏糖醇)。两者的作用是一样的，但特点不一样，前者更容易与氧气反应，稳定性比后者差，如果在常温下暴露在空中，前者只能维持24小时的活性，后者却可以维持7天左右。所以该如何选择?如果是蛋白样品较少，跑几次就可以用完的样品，这时选择beta巯基乙醇。如果样品很多，计划跑上几十次的，优先选择DTT,建议变性后分装保存。二、SDS-PAGE凝胶配制1、配胶前准备首先强调一下，一块好的胶是跑好蛋白的前提，所以这个环节也不容忽视。玻璃板的选择，一种是1毫米厚度的，另一种是，这个厚度选择也是有讲究的，如果上样体积小于10微升，优先选1毫米，否则选。原因是什么?答案在转膜部分揭晓。还有分离胶的浓度也要选择适合的。然后玻璃板和梳子要洗干净，晾干。装板，注意厚板和薄板的底部要对齐，否则会漏胶。加制胶的各成分前，要观察液体是否有沉淀，有沉淀的尽量不要用。2、制胶按配方说明依次加入各组分，加完SDS后先简单手动摇匀几下，然后迅速加入过硫酸铵和TEMED,摇匀，紧接着就灌胶。然后我习惯用95%的酒精压胶，我也用过纯水，感觉纯水压没那么好，由于水的密度较大，会把分界处的胶压得膨大。湖北豚鼠动物模型实验