EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU与T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性~EdU细胞增殖检测试剂盒哪家便宜?上海东寰告诉您。上海口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好
上海东寰活细胞能将四咪唑盐(如MTT、XTT、WST-1)还原成有色的甲瓒或甲瓒盐(Formazan),可通过分光光度计或酶标仪进行检测。CellCountingKit–8(96992)和CellProliferationReagentWST-1中的WST-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的橙色甲臜染料能够溶解在组织培养基中,生成的甲臜量与活细胞数量成正比。基于CCK-8(WST-8)的试剂盒能高度准确地检测细胞增殖,比MTT法及XTT法的灵敏度高5倍,能检测更低的细胞数目。该试剂盒可适用于96孔板培养的贴壁或悬浮细胞。上海口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好EdU细胞增殖检测试剂盒常见的用途有哪些?上海东寰告诉您。
具有保密性的材料除外)。2、目的蛋白相应一抗:请您提供质量保证的一抗(或委托我公司准备)。抗体的使用量通过预实验后进行确认,原则上不回收使用一抗。3、阳性对照样品(尽量提供)。4、相关文献(可选)。注:若要检测磷酸化蛋白,请在2-3个月内进行,因为长时间保存的样品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而检测不到磷酸化条带。五、提交给客户结果1、预实验显色结果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式),预实验采取3个一抗稀释度,选取部分实验样本。2、正式实验显色结果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式)。3、完整实验报告。六、服务项目说明1、提供的蛋白量与待检测的目的蛋白数量有关,蛋白数量增加相应的样品量也要增加。2、每张膜样品数量为1-8个,不足8个以8个收取。9-16个样品为2张膜,17-24个样品为3张膜;以此类推。举例:7个样品,1个目的蛋白,算1张膜;有9个样品,1个目的蛋白,算2张膜;7个样品,2个目的蛋白,算2张膜,有9个样品,2个目的蛋白,算4张膜。注:以上为一般算法。如果客户样品数量需要按照组别等来进行上样时,需要重新确定每张膜的上样量及膜的张数。3、选择部分样品进行预实验,参考目的蛋白一抗说明书进行3个稀释度的预实验。
现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生——EdU检测。EdU(5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中,基于EdU与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。上海东寰告诉您使用EdU细胞增殖检测试剂盒的便捷性。
BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗体,由于空间位阻,双链DNA须变性后才能使BrdU抗体与BrdU结合。法使用小分子标记的叠氮化物(Azide),无需DNA变性,操作更便捷,兼容性好,检测结果更加稳定可靠。本试剂盒检测快速。相对于BrdU法,本试剂盒采用BeyoClick™EdU法检测新合成的DNA,所需时间缩短。经本试剂盒处理后,增殖的细胞呈棕色,可以用普通光学显微镜进行观察。HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果参见图3。图3.HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果图。无EdU组观察不到棕色染色(左侧一列);EdU(10μM)孵育2小时组有明显的棕色染色(中间一列);而用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)提前预处理0.5小时后,棕色染色减弱,说明DNA合成被抑制后,EdU的掺入被抑制(右侧一列)。EdU细胞增殖检测试剂盒生产厂家。上海口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好
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EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)即可有效检测,可有效避免样品损伤,在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象。EdU染色(a)通过用10:1去离子水稀释10x反应缓冲液进行配制1xEdU反应缓冲液;(b)按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配;注:缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换上海口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好