可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的,但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等,可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法,检测方法等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规实验方法,检测方法等。实施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液50ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例3建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液25ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中。疾病动物模型建模怎么做?青浦区疾病动物模型建模优势
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。宿迁皮肤疾病动物模型建模动物疾病模型广泛应用于疾病机制研究。
葡聚糖硫酸钠(DSS)致溃疡性结肠炎小鼠模型:1、动物模型名称:葡聚糖硫酸钠(DSS)致溃疡性结肠炎小鼠模型2、实验动物种属:BALB/c小鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年鼠5、实验动物体重:18g-22g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:实验前小鼠禁食不禁水24h,24小时后提起鼠尾将其悬空,使挣扎以排出大肠远端的大便。小鼠自由饮用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液,连续14天。进行疾病活动指数(DAI)的评估、取结肠进行组织病理学检查。2、检测标准:DAI评分明显升高,与对照组比较具统计学意义。结肠病理镜检可见结肠炎症、病变深度、隐窝破坏、溃疡病变.
流水线作业,这样能节省时间,并且能保证样品的质量。如果请人,每个人需要负责哪一板块的工作,比如谁负责麻醉,谁负责取血液,谁负责取,谁负责拍照、谁负责储存,都需要提前规划交代清楚。实验指标检测如果是需要自己做的检测,比如常见的WesternBlot、PCR,建议提前可以看看教程(无论是视频还是贴吧,都要自己多方参考)。有了一定的理论基础后,再向老师、师兄师姐学习经验和技术,如果实验平台的仪器需要提前预约,建议提前规划好使用的时间。反复总结寻找答案在整个预实验的过程中可能会出现很多问题。比如造模效果欠佳、灌胃操作不当、腹腔注射操作失误、使用不当等引起动物死亡。每遇到问题都需要自己想办法解决,可以从导师、师兄师姐、文献、贴吧、视频教程等找到答案。比如笔者曾遇到同样的给药,发现有的大鼠麻醉得很深,有的大鼠还活蹦乱跳,在反复尝试调整浓度,给药剂量,更换麻醉方式,后来才发现是动物体重秤的准度有问题,导致体重秤得不准。因此,需要自己反复琢磨到底是实验过程中哪一个环节出现问题,逐一排除。也要求在每一个实验步骤需要标准化,统一化,尽可能的排除干扰因素,这样方便在遇到问题快的找到答案。同时,建议每日总结。避免了在人身上进行实验所带来的风险。
步骤i.将步骤h的吸附柱放入收集管,12000rpm离心2min。步骤j.吸附柱放到一个新的,在吸附柱膜**加入50~200μl灭菌水或者洗脱液,停留5min。(将无菌水或者洗脱液加热到65℃能够增加洗脱的得率)。步骤i.基因组dna定量,洗脱的基因组dna可以通过电泳鉴定。方法2:一种低成本基因组dna的粗提方法:步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入离心管中,加入100μl尾部消化缓冲液,注意不要剪尾太长;步骤b.将离心管及其内容物于56℃孵育过夜;步骤c.过夜后将离心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步骤d.在微型离心机以**大转速旋转15min,上清直接用于pcr体系(每50μlpcr体系加入上清2μl)。尾消化缓冲液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)长链pcr反应:长链引物:pcrprimers1(℃):扩增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):扩增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述两条扩增片段,野生型等位基因没有扩增产物。模型应适用于多数研究者使用,容易复制,实验中便于操作和采集各种标本。奉贤区大鼠疾病动物模型建模
临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来。青浦区疾病动物模型建模优势
其可与dna链交叉连接,显示出细胞毒作用。溶解后在体内无需载体转运,即可通过带电的细胞膜。由于细胞内氯离子浓度低(4mmol/l),氯离子为水所取代,电荷呈阳性,具有类似烷化剂双功能基团的作用,可与细胞核内dna的碱基结合,形成三种形式的交联,造成dna损伤,破坏dna复制和转录,高浓度时也抑制rna及蛋白质的合成。顺铂具有抗*谱广、乏氧细胞有效、作用性强等优点,已普遍用于***睾丸*、卵巢*、子宫*、膀胱*、颈部*、前列腺*、脑*等,疗效***。但顺铂用于****有一定的毒性,会引起副作用,与卵巢的损害有直接关系,有研究表明顺铂可诱导卵巢细胞凋亡。青浦区疾病动物模型建模优势