上海哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒原理

EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b)提前将2xEdU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得lxEdU溶液，其中EdU的终浓度为10uM；注：1)我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2)配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时，弃培养基；注：1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次，毎次5分钟，以除去未掺入DNA的EdU残留有哪些领域需要使用EdU细胞增殖检测试剂盒？上海哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒原理

EdU（5-溴-2-脱氧尿嘧啶）试剂盒是一种嘧啶类似物，可以在DNA合成期整合入DNA双链。通过以上原理图的对比，大家不难发现，EdU法检测细胞增殖，无须抗体，无变性步骤，保持细胞形态和DNA完整性，是一种简单，可靠，省事的创新方法。但是，现在依然有很多研究者们依然没有得到细胞增殖检测*行之有效，节约反应时间的方法。Abbkine的EdU检测试剂盒有两个型号，分别匹配的是两种不同的荧光通道，细胞增殖成像分析试剂盒（EdU法）(绿色荧光)，KTA2030，488通道；细胞增殖成像分析试剂盒（EdU法）(橘红色荧光)，KTA2031，549通道河北如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒说明书EdU细胞增殖检测试剂盒的作用是什么？上海东寰告诉您。

    避免反复冻融。如短时间内需多次重复使用，请于4℃避光保存，有效期半年。使用前须知该试剂是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。实验准备1、盖玻片2、1×PBS（）（用DEPC水配置）3、含TritonX-100的PBS（用DEPC水配置）4、甘氨酸溶液(2mg/ml)（用DEPC水配置）5、培养板或培养皿实验参考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培养基100μl200μl300μl500μl1ml染色反应液100μl200μl300μl500μl1ml实验步骤(以96孔板，HK2贴壁细胞为例)细胞培养取对数生长期细胞，以每孔4×103~1×105细胞接种于96孔板中，培养至正常状态。EU标记1、将细胞完全培养基中按照500：1的比例加入EU溶液，制成2×EU标记培养基；2、提前将2×EU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得1×EU溶液，其中EU的终浓度为500μM；注：1）我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2）配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；3、每孔加入300μl含EU培养基孵育细胞2小时，弃培养基。

传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散，无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性EdU细胞增殖检测试剂盒多少钱？上海东寰告诉您！

但该方法由于有放射性污染并且很难实现单细胞检测而受到很大的限制，随后逐渐被基于抗体检测的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步骤繁多，且需要使用BrdU抗体，影响因素较多，稳定性比较差。并且由于BrdU法需要使用抗体，有时会和其它目的蛋白基于抗体的检测相互产生干扰。EdU法基于EdU掺入和后续的点击反应，无需使用抗体、操作便捷、检测灵敏度高，是一种在BrdU法基础上升级换代的新方法，将会逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi™化学发光法(C0065、C0068)都是基于细胞活性的细胞增殖检测方法，能检测到细胞的总体增殖效果，但无法检测到单个的增殖细胞。EdU细胞增殖检测试剂盒生产厂家。福建如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒原理

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细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液，室温培养30分钟，弃固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，摇床孵育5分钟，以中和过量的多聚甲醛；(c)弃甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100细胞通透液，室温通透10分钟，弃细胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。上海哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒原理