福建如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价

EdU-488细胞增殖检测试剂盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488)，是一种利用核苷渗入法对细胞增殖情况进行快速、简单、高灵敏检测的试剂盒。其原理为：试剂盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一种胸苷(T)类似物，EdU可以在在细胞周期的S期中替代胸苷掺入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能与叠氮化物(如荧光探针AlexaFluor488Azide)通过Cu+的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Clickreaction)(图1)。通过点击反应，新合成的DNA会被绿色荧光标记，然后通过检测荧光信号实现细胞增殖的检测。EdU细胞增殖检测试剂盒的作用是什么？上海东寰告诉您。福建如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价

测定ATP水平检测细胞增殖活细胞需要不断以ATP的形式输入自由能，因此通过检测ATP的增加水平可检测细胞增殖。ATPBioluminescenceAssayKitHSII及ATPBioluminescenceAssayKitCLSII是通过经典的荧光素酶发光对ATP检测定量的试剂盒。前者主要应用于高灵敏度检测极低浓度ATP的实验，后者主要应用于当有持续信号产生而需要高重复性结果的实验。DNA的合成的检测：DNA的新组装合成是细胞生长的必要条件，故经常被用来进行细胞增殖、细胞活力及凋亡的检测。BrdU及EdU，都是胸腺嘧啶的非放射性类似物，能掺入增殖细胞的DNA中，可通过对BrdU及EdU的检测，从而对DNA的合成量进行测定。天津口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒原理EdU细胞增殖检测试剂盒的基本结构级应用。

EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b)提前将2xEdU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得lxEdU溶液，其中EdU的终浓度为10uM；注：1)我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2)配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时，弃培养基；注：1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次，毎次5分钟，以除去未掺入DNA的EdU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。

EdU只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内更容易扩散，不需要严格的样品变性（酸解、热解、酶解）处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况，具有更高的灵敏度和更快的检测速度。AdrianSalic特别强调：“与传统的免疫荧光染色不同，EdU反应能在几分钟内完成，且不需要进行严格的样品变性处理，使得组织成像更简单易行。”细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo？荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA，简单，快速，准确。这种检测方法非常快速，且只需简单的几个步骤，因此也适用于高通量筛选试验，如在药物筛选中检测加药后细胞的活力你知道EdU细胞增殖检测试剂盒的特点吗？

可通过CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(发光法)进行细胞群落中DNA合成测定（BrdUbased）。优点是：实验结果同增殖细胞数目紧密相关，可一步完成细胞的温和固定和变性，操作方便稳定，不破坏细胞形态。5-Bromo-2´-dULabeling/DetectionKitI（荧光法）或KitII（AP）可使用试剂盒提供的BrdU单抗，以及酶或荧光偶联二抗，检测单细胞水平的DNA合成（BrdUbased）。前者通过免疫荧光检测，后者通过荧光显微镜检测。优点是：使用核酸酶变性DNA，在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。上海东寰告诉您使用EdU细胞增殖检测试剂盒的便捷性。天津口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒原理

EdU细胞增殖检测试剂盒给社会带来了什么好处？福建如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价

    避免反复冻融。如短时间内需多次重复使用，请于4℃避光保存，有效期半年。使用前须知该试剂是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。实验准备1、盖玻片2、1×PBS（）（用DEPC水配置）3、含TritonX-100的PBS（用DEPC水配置）4、甘氨酸溶液(2mg/ml)（用DEPC水配置）5、培养板或培养皿实验参考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培养基100μl200μl300μl500μl1ml染色反应液100μl200μl300μl500μl1ml实验步骤(以96孔板，HK2贴壁细胞为例)细胞培养取对数生长期细胞，以每孔4×103~1×105细胞接种于96孔板中，培养至正常状态。EU标记1、将细胞完全培养基中按照500：1的比例加入EU溶液，制成2×EU标记培养基；2、提前将2×EU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得1×EU溶液，其中EU的终浓度为500μM；注：1）我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2）配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；3、每孔加入300μl含EU培养基孵育细胞2小时，弃培养基。福建如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价