江苏哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒说明书

羟基脲(Hydroxyurea)为DNA合成抑制剂，经过10mM羟基脲提0min处理的细胞，绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失，因此常被用作EdU实验的阴性对照。配制好的Click-iTAdditiveSolution请根据每次用量适当分装后-20℃保存，避免反复冻融。Click-iTAdditiveSolution融化后有白色物质析出为正常现象，请上下颠倒几次，待全部溶解后使用。溶液一旦呈现棕色，则说明有效成分降解，不能再使用。皂苷促渗液可以用于全血及含红细胞的细胞悬液，以及其他含多种细胞类型的混合细胞悬液的通透。这种促渗液可以在裂解红细胞的同时，维持白细胞的光散射特性。本试剂盒做动物实验时可能需要更多的EdU，请根据实验需求用合适稀释液稀释后使用。EdU细胞增殖检测试剂盒价格。江苏哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒说明书

保存条件：-20℃保存，一年有效。BiotinAzide、DAB显色液A和DAB显色液B须避光保存。注意事项：ClickAdditive配制成溶液后请注意适当分装。如果溶解后有白色物质析出，请上下颠倒多次，待全部溶解后使用。如果该溶液颜色变成棕色，说明该组分的有效成分已失效，请弃用。DAB对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。由于本产品需要铜离子催化进行点击反应，请注意如下的兼容性问题及解决方案。本产品完全兼容有机类染料如AlexaFluor®系列普通染料及fluorescein(FITC)、Allophycocyanin(APC)及APCE-tandems染河北咨询EdU细胞增殖检测试剂盒原理EdU细胞增殖检测试剂盒的作用是什么？上海东寰告诉您。

EdU染料只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。EdU细胞增殖检测：EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比，EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。

    注：1）培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2）孵育时间至少2小时，可延长至24小时后再检测也可以。4、以1×PBS清洗细胞两次，每次5分钟，以除去未掺入RNA的EU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。细胞的固定和通透1、每孔加入150μl细胞固定液，室温培养30分钟，弃固定液；注：1)该试剂盒配备了细胞固定液，也可以使用含4%多聚甲醛的PBS来进行细胞固定；2)如果使用其他的细胞固定剂建议用DEPC水来配置，避免RNA酶降解细胞内的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸，摇床孵育5分钟；3、弃甘氨酸溶液，每孔加入300μlPBS洗液，室温清洗5分钟；4、每孔加入300μlTritonX-100细胞通透液，室温通透10分钟，弃细胞通透溶液；5、每孔加入300μlPBS洗液，室温清洗5分钟；EU染色1、通过用10：1去离子水稀释10×反应缓冲液进行配制1×EU反应缓冲液；2、按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解，即为可用的缓冲添加剂的浓度，建议现用现配；注：缓冲添加剂为白色粉末，较难准确称量，称量范围可稍微放宽，但是不应超过±20%，且该粉末较易氧化，使用后请旋紧管盖，如试剂出现棕黄色，则需报废或更换。上海EdU细胞增殖检测试剂盒的价格是多少？

EdU细胞增殖检测试剂盒通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散，无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性EdU细胞增殖检测试剂盒的重要组成部分。天津正规EdU细胞增殖检测试剂盒购买

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EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Clickreaction)，其反应原理参见图1。通过点击反应，新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记，从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU，在铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，终使细胞DNA标记上生物素等探针。江苏哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒说明书