实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下小鼠是人类疾病理想的动物模型不仅因为小鼠在生理上与人类极为相似而且小鼠的遗传资源非常丰富。宝山区面瘫疾病动物模型建模
因此利用动物疾病模型来研究人类疾病,可以克服平时一些不易见到,而且不便于在病人身上进行实验的各种人类疾病的研究。同时还可克服人类疾病发展缓慢,潜伏期长,发病原因多样,经常伴有各种其它疾病等因素的干扰,可以用单一的病因,在短时间内复制出典型的动物疾病模型,对于研究人类各种疾病的发生、发展规律和防治疾病疗效的机理等是极为重要的手段和工具。疾病动物模型的优越性生物医学研究的进展常常依赖于使用动物模型作为实验假说和临床假说二者的试验基础。淮安疾病动物模型建模避免了在人身上进行实验所带来的风险。
步骤i.将步骤h的吸附柱放入收集管,12000rpm离心2min。步骤j.吸附柱放到一个新的,在吸附柱膜**加入50~200μl灭菌水或者洗脱液,停留5min。(将无菌水或者洗脱液加热到65℃能够增加洗脱的得率)。步骤i.基因组dna定量,洗脱的基因组dna可以通过电泳鉴定。方法2:一种低成本基因组dna的粗提方法:步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入离心管中,加入100μl尾部消化缓冲液,注意不要剪尾太长;步骤b.将离心管及其内容物于56℃孵育过夜;步骤c.过夜后将离心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步骤d.在微型离心机以**大转速旋转15min,上清直接用于pcr体系(每50μlpcr体系加入上清2μl)。尾消化缓冲液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)长链pcr反应:长链引物:pcrprimers1(℃):扩增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):扩增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述两条扩增片段,野生型等位基因没有扩增产物。
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下~上海东寰可以做疾病动物模型建模。
特发性肺纤维化(IPF)小鼠模型建立一、目的:博莱霉素致肺纤维化模型建立二、材料:博莱霉素药液配制:4mg/ml();三、方法:1、BALB/c小鼠麻醉,6-8周龄,体重20~25g,仰卧固定于实验台上,颈部去毛后酒精消毒,切开皮肤,逐层暴露气管;2、将1mL注射器经两气管软骨环间隙朝向心端刺入气管,回抽无阻力;3、注入博莱霉素(约4~5mg/kg)再向气管内注入~3次,使药物在肺部分布均匀;4、以大鼠身体长轴为中心,正反快速旋转鼠板1~2分钟。缝合皮肤,局部聚维酮碘消毒(或用青霉素消毒)防止,室温保持在24~25℃,待动物自然清醒后置笼内常规饲养。肺纤维化模型发展时间:2周可见肺系数(肺重/体重×100%)、羟脯氨酸含量明显升高。显微镜下可见炎症细胞浸润,以淋巴细胞、单核吞噬细胞为主,并有肺泡壁增厚、成纤维细胞增生等Ⅱ级肺泡炎表现4周可见肺间质内有大量散在绿染的胶原纤维,肺泡结构破坏,见有许多纤维细胞等Ⅲ级肺间质纤维化病变。大鼠模型病理组织学与病理生理学改变与人类肺间质纤维化相似。其病变早期表现为渗出性肺泡炎,炎症细胞在病变处聚集增多。晚期为肺间质纤维化,间质细胞增生,基质胶原聚集取代正常的肺组织结构。四、检测:组织病理切片HE染色。上海东寰为您提供完善的大鼠动物疾病模型。宝山区面瘫疾病动物模型建模
如何定义好的小鼠疾病模型?宝山区面瘫疾病动物模型建模
用PBS冲洗沉淀物,然后用Diff-Quik染色液染色,在光学显微镜下进行细胞分类,观察计数计数中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞。5.2.4肺损伤后的组织病理观察:取左肺4%多聚甲醛固定,然后将肺组织常规脱水,石蜡包埋,切片(厚度为5μm),HE染色。HE染色肺组织学评价可以直观的反应肺损伤的程度,ALI组织病理学主要表现为肺泡中性粒细胞及红细胞的渗出,肺泡壁透明膜的形成。HE染色后可在低倍镜下观察到整个左肺组织的炎症细胞浸润、水肿以及损伤,评估肺部损伤分布情况;而高倍镜下则可以对肺泡结构进行辨认,对肺损伤程度进行评估和评分。评分方法:取6个视野进行出血及水肿评分。0分:没有损伤1分:<25%的损伤面积2分:25%~50%的损伤面积3分:50%~75%的损伤面积4分:>75%的损伤面积宝山区面瘫疾病动物模型建模