1.甲醛(HCOH)毒性级别:★★★★实验场景:免疫组化实验中,取材后的组织或细胞需立刻投于固定剂中,使组织和细胞的蛋白质凝固,终止内源性或外源性酶反应,防止组织自溶或异溶,以保持原有结构和形态。防护攻略:甲醛(福尔马林)有很大的毒性并易挥发,也是一种致剂(不做科研的人都知道)。很容易通过皮肤吸收,对眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激和损伤。避免吸入其挥发的汽雾。要戴合适的手套和护目镜,始终在化学通风橱内进行操作,远离热源、火花及明火。2.二甲苯毒性级别:★★★★实验场景:用于免疫组织化学实验中组织的透明和石蜡切片的脱蜡。防护攻略:二甲苯对眼及上呼吸道有刺激作用,高浓度时,对中枢系统有麻醉作用。急性中毒:短期内吸入较高浓度本品可出现作。慢性影响:长期接触有神经衰弱综合症,女性有可能导致月经异常。皮肤接触常发生皮肤干燥、皲裂、皮炎。戴好手套和护目镜,在通风橱内操作。始终远离热源、火花和明火。3.丙烯酰胺毒性级别:★★★实验场景:免疫印迹实验中,在丙烯酰胺和NN-亚甲双丙烯酰胺的溶液中加入过硫酸铵和TEMED后,发生聚合作用成为可以分离蛋白质的SDS-PAGE凝胶。防护攻略:丙烯酰胺的危害主要是引起神经毒性。结肠平滑肌细胞主要分布于粘膜肌层和肌层;结肠运动少而缓慢,对刺激的反应也较迟缓。吉林呼吸原代细胞分离培养购买
细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的ji活、表达以及调控等的作用,它并不是bing理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。上海东寰为您分享细胞凋亡与细胞坏死的区别。细胞凋亡与程序性死亡其实从严格的词学意义上来说,细胞程序性死亡(PCD)与细胞凋亡是有很大区别的。细胞程序性死亡的概念是1956年提出的,PCD是个功能性概念,描述在一个多细胞生物体中某些细胞死亡是个体发育中的一个预定的,并受到严格程序把控的正常组成部分。例如蝌蚪变成青蛙,其bian态过程中尾部的消失伴随大量细胞死亡,高等哺乳类动物指间蹼的消失、颚融合、视网膜发育以及免yi系统的正常发育都必须有细胞死亡的参与。这些形形**的在机体发育过程中出现的细胞死亡有一个共同特征:即散在的、逐个地从正常组织中死亡和消失,机体无炎症反应,而且对整个机体的发育是有利和必须的。因此认为动物发育过程中存在的细胞程序性死亡是一个发育学概念,而细胞凋亡则是一个形态学的概念,描述一件有着一整套形态学特征的与坏死完全不同的细胞死亡形式。但是一般认为凋亡和程序性死亡两个概念可以交互使用。黑龙江怎样原代细胞分离培养哪家好小鼠主动脉血管平滑肌细胞是构成动脉中膜的主要成分,呈长梭形,圆形核位于细胞中心。
细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征。细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。真核生物的分裂依据过程不同有三种方式,有有丝分裂,无丝分裂,减数分裂。上海东寰为您分享有丝分裂的周期变化。有丝分裂的周期变化细胞分裂期在细胞分裂期,很明显变化是细胞核中染色体的变化。人们为了研究方便,把分裂期分为四个时期:前期,中期,后期,末期。其实,分裂期的各个时期的变化是连续的,并没有严格的时期界限。前期细胞分裂的前期,很明显的变化是细胞核中出现染色体。分裂间期复制的染色体,由于螺旋缠绕在一起,逐渐缩短变粗,形态越来越清楚。在光学显微镜下观察这个时期的细胞,可以看到每一条染色体实际上包括两条并列的姐妹染色单体,这两条并列的姐妹染色单体之间不是完全分离开的,而是由一个共同的着丝点连接着。在前期,核仁逐渐解体,核膜逐渐消失。同时,从细胞的两极发出许多纺锤丝,形成一具梭形的纺锤体,细胞内的染色体散乱地分布在纺锤体的中间。中期细胞分裂的中期,纺锤体清晰可见。这时候,每条染色体的着丝点的两侧,都有纺锤丝附着在上面,纺锤丝牵引着染色体运动。
细胞生命的终结有许多种方式,凋亡只是其中一种,所以要确保自己检测到的的确是凋亡信号。上海东寰为您分析细胞凋亡的检测方法!细胞凋亡的检测方法也有多种,如形态学检测、磷脂酰丝氨酸外翻分析(AnnexinV法)、线粒体膜势能检测、DN***断化检测、TUNEL法及Caspase-3活性检测等,可根据自己的实验需求选择合适的方法。这里我们主要了解AnnexinV法。AnnexinV是一种分子量为35~36KD的丰富的胞内蛋白。AnnexinV属于Ca2+结合蛋白家族,可与磷脂(PL)发生可逆的Ca2+依赖性结合,对磷脂酰丝氨酸(PS)具有高亲和力。在健康细胞中,PS主要位于质膜的胞质侧,而在早期凋亡细胞中,PS从质膜内侧翻转至外侧,AnnexinV与暴露在细胞外环境的PS结合。核酸染料碘化丙啶(PI)及7氨基-放线菌素D(7-AAD)均具有高DNA结合常数,它们不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染色。因此,将AnnexinV与PI或7-AAD联合使用,可以将凋亡早、晚期的细胞以及死细胞区分开来。AnnexinV可以与荧光素(FITC、PE)或biotin缀合,这种形式保留了AnnexinV对PS的高亲和力,因此可以用流式细胞术或荧光显微镜检测细胞凋亡的发生。与PI不同。肝脏内的枯否细胞对于肝脏本身和全身的免疫应答都极为重要。
1、取新鲜抗凝全血(EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝血均可)或者去纤维蛋白血液,用等体积的全血及组织稀释液或者PBS稀释全血。2、取一支无菌离心管,先加入试剂A,再加入试剂D,使两者形成梯度界面(试剂A:试剂D的体积比为3:2,如稀释后的血液样本小于5ml,则先后加入3ml试剂A和2ml试剂D;如稀释后的血液样本大于5ml,试剂总量与稀释后的血液样本量相等),两种试剂的分层一定要清晰。3、将稀释后的血液平铺到分离液液面上方,注意保持两液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然后将血液小心的平铺于分离液上,因为两者的密度差异,将形成明显的分层界面。如果样品较多,加样的时间较长,在离心之前出现红细胞成团下沉属正常现象)4、室温,水平转子500~800g,离心20~30min(血液的体积越大所需的离心力越大,离心时间越长,的分离条件需自行摸索,离心转速不超过1000g)。5、离心后将出现明显的分层:层为血浆层;第二层为白色单核细胞层;第三层为透明试剂D液层;第四层为半透明试剂A液层;第五层为红细胞层(如图示)。6、小心吸取第二层白色单核细胞层到另一无菌的15ml离心管中,加入10mL细胞洗涤液或PBS,颠倒混匀,250g,离心10min。7、弃上清。足细胞呈星型多突状,胞体较大,由胞体伸出许多突起,呈指状交叉覆盖于肾小球基底膜外表面。云南裸鼠原代细胞分离培养评价
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操作时戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱里进行。(又称为二甲基亚砜)毒性级别:★★★实验场景:常用于细胞培养中的冻存,它可以破坏氢键的形成,从而防止冰晶的形成对细胞造成伤害,也是实验室中比较常用的有机溶剂。防护攻略:存在严重的毒性作用,具有血管毒性和肝肾毒性。用的时候要避免其挥发,要准备1~5%的氨水备用,皮肤沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗涤。11.叠氮钠(NaN3)毒性级别:★★★★实验场景:是常用防腐剂,对过氧化物酶有抑制作用,是生命科学实验室配制储存液,浓缩液等试剂时常用的抑菌剂。防护攻略:可阻断细胞色素电子运送系统,毒性非常大。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。含有叠氮钠的溶液要标记清楚,合适的手套和安全护目镜,操作时要格外小心。基本生存指南:1.不要在实验室吃东西(你真的吃得下么)。2.不要随便闻试剂药品(很多人有这个习惯)。3.处理带腐蚀性的试剂时手套戴两层,还有口罩护目镜,总之能怎么遮就怎么遮。4.如果不想好好的衣服沾上奇怪的试剂,一定要穿好实验服(即使自己的实验没有危险,也不能保证别人做实验时不会溅到你身上)。5.配置有毒试剂或挥发性试剂时一定要在通风橱中操作,这既是对自己负责。吉林呼吸原代细胞分离培养购买