呼吸系统H01代码下分为18个小类,笔者浏览近五年面上项目,大致筛选出各个代码下常见的研究方向或疾病(毕竟只是人工筛选,准确性欠佳,敬请谅解)。接下来为大家介绍研究较多的几个疾病的常见造模方法,分别为、COPD、急性肺损伤、肺纤维化、肺动脉高压。动物模型实验动物:小鼠、大鼠、豚鼠造模试剂:卵清蛋白(OVA)、HDM(尘螨)获得方式:一般自己构建。在造模过程先采用抗原致敏(腹腔注射OVA和氢氧化铝混合物或者鼻内滴入HDM)使动物机体内存在致敏物,然后气道局部激发(反复雾化或者滴鼻激发),诱导。通过小鼠疾病模型的构建有助于我们深入揭示潜在致病基因作用机制。纤维化疾病动物模型建模哪家好
引起组织坏死,从而导致卵巢功能早衰。技术实现要素:针对上述现有技术,本发明提供了一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本发明根据“顺铂可诱导卵巢细胞凋亡,引起组织坏死,从而导致卵巢功能早衰”这一原理,使用不同浓度及不同方法建立了化疗性损伤卵巢早衰动物模型,并对比各种方法间的优劣性,筛选出顺铂比较好的浓度及给药时间,为筛选顺铂导致的卵巢早衰动物模型比较好剂量提供了一种操作简单,成功率高,结果可靠的实验方法。本发明是通过以下技术方案实现的:一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法:将剂量为按体重一日2~3mg/kg的顺铂施用于大鼠,施用方式为腹腔注射,施用方法:连续施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。或:将剂量为按体重4~6mg/kg的顺铂施用于大鼠,施用方式为腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。进一步地,可将顺铂溶于%氯化钠溶液配置成顺铂注射液,然后注射。所述顺铂,可市场常规购买得到,比如齐鲁制药公司生产的顺铂。进一步地,注射期间每天称量大鼠体重,注射后每周称量2次;末次注射后15天,麻醉取血检测***水平,取卵巢检测对比卵巢重量。泰州咨询疾病动物模型建模可以简化实验操作和样品收集。
pcrmix:反应条件:pcr扩增产物的电泳鉴定结果如图3所示,从图3中可以看出,6、8、9号为pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr产物没有这两个扩增产物。(c)短链pcr反应,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能够扩增出344bp的产物,而野生型没有。pcr体系:反应条件:(2)f1代小鼠测序:通过pcr扩增后测序鉴定小鼠基因型,如图4所示,为6号pirb基因敲入小鼠测序峰图,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern杂交检测f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸内切酶切割dna分子,切割示意图如图5。具体的southern杂交检测过程如下:步骤a、提取f1代小鼠尾部dna;步骤b、制备探针,通过pcr方法将dig-dutp渗入到步骤a的dna分子中。
无论营养学和环境卫生学等方面,同一时期内很难在人身上取得一定数量的定性疾病材料。动物模型不仅在群体的数量上容易得到满足,而且可以通过投服一定剂量的药物或移植一定数量的**等方式,限定可变性,取得条件一致的模型材料。(五)可以简化实验操作和样品收集动物模型作为人类疾病的“缩影”,便于研究者按实验目的需要随时采取各种样品,甚至及时处死动物收集样本,这在临床是难以办到的。实验动物向小型化的发展趋势更有利于实验者的日常管理和实验操作。可根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料。
人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物,动物疾病模型广泛应用于疾病机制研究、新药靶点发现及筛选、药效评价、转化医学等医学前沿领域。动物模型的优越性主要表现在以下几下方面。(一)避免了在人身上进行实验所带来的风险(二)临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来(三)可以克服人类某些疾病潜伏期长,病程长和发病率低的缺点(四)可以严格控制实验条件,增强实验材料的可比性(五)可以简化实验操作和样品收集(六)有助于更***地认识疾病的本质上海东寰疾病动物模型建模。松江区皮肤疾病动物模型建模
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麻醉小鼠,仰卧固定于实验台上,颈部去毛后酒精消毒,切开皮肤,逐层暴露气管,将1mL注射器经两气管软骨环间隙朝向心端刺入气管,回抽无阻力,则注入博莱霉素5mg/kg/L(对照组注入等量的生理盐水)。手术完毕后迅速将动物直立、旋转,使药液在肺内分布均匀,动物清醒后常规饲养。4.2模型鉴定及后续检测:肺纤维化模型发展时间:给药后第7天肺组织大多呈重度肺泡炎改变,肺泡腔及肺间质内有大量中性粒细胞浸润,部分肺泡腔破坏或消失,肺间隔内成纤维细胞和增生,与正常肺组织对比差别明显;给药后第14天,肺纤维化开始形成。巨噬细胞、中性粒细胞等炎性细胞明显减少,成纤维细胞增多,肺泡间隔明显增厚,有胶原沉积。给药后第28天,多数小鼠发生弥漫性肺间质纤维化,肺间质被胶原纤维和成纤维细胞替代,肺泡壁破坏,肺大泡形成,但仍可见炎性细胞浸润。纤维化疾病动物模型建模哪家好