湖北咨询EdU细胞增殖检测试剂盒评价

    细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2′-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色（BrdU）检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，操作步骤更加快速、灵敏和准确。 EdU细胞增殖检测试剂盒哪家便宜？上海东寰告诉您。湖北咨询EdU细胞增殖检测试剂盒评价

上海东寰生物科技有限公司细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液，室温培养30分钟，弃固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，摇床孵育5分钟，以中和过量的多聚甲醛；(c)弃甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100细胞通透液，室温通透10分钟，弃细胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。福建EdU细胞增殖检测试剂盒上海哪家EdU细胞增殖检测试剂盒厂家值得信赖？

    Jurkat细胞只用EdU标记(左列)，或在标记EdU0min用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右列)，2小时后染色，然后通过流式细胞仪进行检测。从流式结果图中可以看出，EdU标记的细胞有较高比例的绿色荧光阳性细胞，呈现绿色荧光阴性(弱染色)和阳性(强染色)的两个峰，分别对应于未增殖细胞和增殖细胞。经过Hydroxyurea处理的细胞，绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失，剩下一个绿色荧光阴性的峰。Hela细胞只用EdU标记(左列)，或在标记EdU0min用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右列)，2小时后染色（步骤染Hoechst，方便观察增殖细胞比例），然后通过荧光显微镜进行检测。镜下可见，*EdU标记的细胞有一部分染上绿色荧光的增殖细胞，未增殖细胞的细胞核呈蓝色单染。

EdU染料只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。EdU细胞增殖检测：EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比，EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU细胞增殖检测试剂盒的优点体现在哪？

快速—–无需过夜，省却抗原抗体反应。整个检测过程只需 2.5 小时，缩短实验周期。准确—–标记率高且无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免变性带来的样品损伤，确保细胞核边缘清晰完。灵敏—–无需抗体，检测染料为BrdU抗体的1/500，更容易扩散，即使单个增殖细胞也能准确检测。兼容—–对样品几乎无损伤，允许与多种抗体或荧光蛋白同时标记，能够同时检测细胞其他性状特征。本试剂盒适用于培养的细胞或组织样品，也适用于组织切片，可以检测到细胞或组织样本中的单个增殖细胞，也可以对细胞或组织样本总体的细胞增殖情况进行定量分析。上海EdU细胞增殖检测试剂盒的发展趋势。湖南品牌EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

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传统的免疫荧光染色（BrdU）检测方法需要DNA变性，抗原修复，抗原抗体过夜孵育，操作步骤复杂繁琐。并且由于BrdU抗体分子较大，嵌入DNA分子中的BrdU无法直接与BrdU抗体结合，必须先进行DNA变性操作才能使BrdU抗原表位暴露，但变性的程度可能导致错误结果。如果变性不充分，会导致BrdU难以暴露，无法检测，而且变性过程从边缘向中间渗透，会导致细胞核DNA的变性不均匀，边缘模糊不清。如果变性过分，则会导致DNA断裂，甚至降解，导致核染不均一。另外，不同抗体试剂公司的抗体质量不一致，造成难以确保实验重复性，且容易产生假阳性结果。湖北咨询EdU细胞增殖检测试剂盒评价

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