即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于,步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是:本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法,本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发挥调节作用的下游机制。通过pirb敲入动物模型与不同类型cre小鼠的杂交,可以用于研究ad不同***或不同细胞类型pirb的调节作用。附图说明图1为本发明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位点的打靶质粒载体的构建图;图2为本发明pirb基因敲入的小鼠模型的构建方法的流程图;图3为本发明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr结果鉴定电泳图;图4为本发明f1代pirb敲入的小鼠验证pirb基因敲入效果的测序峰图;图5为本发明f1代pirb基因敲入的小鼠进行southern鉴定的方法示意图;图6为本发明f1代pirb基因敲入的小鼠进行southern鉴定的结果图。可以严格控制实验条件,增强实验材料的可比性。静安区咨询疾病动物模型建模
大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下。进一步地,压迫元件采用不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料制备而成。阿尔兹海默症疾病动物模型建模原理疾病动物模型建模有加些方式?
1、动物模型名称:固定制动致制动应激大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:采用固定制动方法。大鼠每天固定5~6小时进行制动应激,连续制动40天。2、检测标准:模型组大鼠体重增长速度较正常对照缓慢;旷场试验的结果显示,造模结束时与正常对照组比较,模型组大鼠的水平穿越格数、垂直运动次数、理毛时间均减少,**格停留时间、粪便粒数均增加;ELISA的结果显示,造模结束时与正常对照组比较,模型组大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明显增高。
其中可以看出手术侧后爪的缩足阈值较手术前及对侧后爪有***降低,且标准误区间非常小。图4是表1的数据通过曲线图的方式展现。结果显示:大鼠在术后***天即出现手术侧后爪敏感,施加轻微的重量(4g左右)都会引起缩足表现,这说明其痛阈明显降低,对轻微的刺激均呈现抬脚,舔舐后足等痛觉过敏表现。这种表现维持至术后至少28天。而对侧后爪在术前和术后缩足阈值变化不大,基本保持在20-25g。实施例3、模型的应用采用实施例1中描述的方法对两组大鼠均进行了造模,l型棒的材料选择的是h62黄铜或聚乳酸等不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料。在造模后第七天应用重复经颅磁刺激(rtms)***大鼠,其中一组接受了真的磁刺激,为磁刺激组;另一组接受了假的磁刺激,为假刺激组。结果显示,磁刺激组的大鼠缩足阈值较假刺激组明显提高,如图5所示。这表明磁刺激缓解了神经压迫造成的疼痛,该模型可以用于磁刺激***的研究。以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解,本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此。疾病动物模型建模厂家。
1、动物模型名称:FSH联合HCG致超排怀孕小鼠模型2、实验动物种属:KM小鼠或NIH小鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:3~4周龄5、实验动物体重:16~18g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:注射用重组人促卵泡***(FSH)联合注射绒促性素(HCG)诱导。对雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG当天下午约16:00~17:00按雌雄鼠1:1合笼。次日早上检查雌鼠阴栓情况。2、检测标准:合笼后次日雌鼠检查出现阴栓,表明成功构建了超排怀孕小鼠模型。生物医学研究的进展常常依赖于使用动物模型作为实验假说和临床假说二者的试验基础。上海纤维化疾病动物模型建模
实验动物向小型化的发展趋势更有利于实验者的日常管理和实验操作。静安区咨询疾病动物模型建模
在cns,pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明,因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制剂,或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响,后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低,使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题,我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠,将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点,为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素:本发明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠动物模型。静安区咨询疾病动物模型建模
上海东寰生物科技有限公司位于上海市嘉定区兴贤路1180号5幢2楼206室,是一家专业的经营范围为:从事生物科技领域内的技术开发、技术转让、技术咨询、技术服务。化工产品(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用物品、易制毒化学品)的销售。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】。公司。东寰生物是上海东寰生物科技有限公司的主营品牌,是专业的经营范围为:从事生物科技领域内的技术开发、技术转让、技术咨询、技术服务。化工产品(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用物品、易制毒化学品)的销售。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】。公司,拥有自己**的技术体系。我公司拥有强大的技术实力,多年来一直专注于经营范围为:从事生物科技领域内的技术开发、技术转让、技术咨询、技术服务。化工产品(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用物品、易制毒化学品)的销售。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】。的发展和创新,打造高指标产品和服务。自公司成立以来,一直秉承“以质量求生存,以信誉求发展”的经营理念,始终坚持以客户的需求和满意为重点,为客户提供良好的原代细胞,细胞增殖与凋亡,细胞检测试剂盒,动物疾病模型,从而使公司不断发展壮大。