离子交换层析柱是基于离子交换原理实现分离的层析装置,其固定相为带有特定电荷基团的离子交换树脂,根据电荷性质可分为阳离子交换层析柱和阴离子交换层析柱。阳离子交换树脂带有负电荷基团(如磺酸基、羧基),可与...
多肽药物的层析纯化面临独特挑战,合成副产物结构高度相似,差一个氨基酸或保护基。反相层析柱是主要工具,C18键合硅胶配合乙腈-水梯度可分离差向异构体。粒径3微米以下的填料提供必需的分辨率,但柱压常超过6...
层析柱的选型需根据分离目标、样品特性、应用场景等因素综合考虑。首先需明确分离目的是分析型(微量样品定性定量)还是制备型(大量样品纯化),分析型可选择小内径、短柱长的层析柱,制备型则需选择大内径、长柱长...
手性yao药物分离是层析柱技术的应用领域,对映体间物理化学性质几乎相同,在光学活性上差异。手性固定相(CSP)通过三点作用模型识别对映体,多糖衍生物涂覆硅胶是成功的CSP,可分离80%以上的手性化合物...
环境监测领域是层析柱的重要应用场景之一,主要用于环境样品中污染物的分离、富集和检测。环境样品(如水体、土壤、空气样品)中的污染物浓度通常较低,且基质复杂,直接检测难度较大。利用层析柱可对污染物进行富集...
层析柱在食品安全检测中发挥筛查和确证双重作用。兽药残留分析采用SPE小柱进行样品前处理,C18或聚合物填料富集净化。检测中,免疫亲和柱高度选择性地捕获黄曲霉、呕吐,洗脱后直接进样HPLC。多农药残留筛...
评价层析柱性能的参数是柱效和分离度。柱效通常用理论塔板数(N) 或理论塔板高度(HETP) 来衡量,它反映了色谱峰展宽的程度,数值越高表示峰越尖锐,柱效越好。N可以通过色谱峰的保留时间和峰宽计算得出。...
蛋白纯化填料的孔径和比表面积是影响其分离性能的关键物理参数。孔径大小直接决定了填料可分离的蛋白分子质量范围,大孔径填料适合分离高分子量蛋白(如抗体、病毒颗粒),小孔径填料则适合小分子蛋白和多肽的分离。...
Ni-NTA填料专为带His标签的重组蛋白设计,通过镍离子与组氨酸残基的配位作用实现特异性捕获。N-次氮基三乙酸(NTA)四齿螯合结构可牢固结合Ni²⁺,减少离子渗漏,耐受10-20 mM咪唑洗涤。Q...
无论是在学术研究还是工业生产中,成本都是一个重要因素。纯化过程的成本包括:层析树脂(介质)的购买和寿命(可重复使用次数)、缓冲液和化学试剂的消耗、设备折旧与维护、以及人力成本和时间。工艺开发的目标之一...
膜蛋白嵌于脂质双分子层中,具有疏水表面,使其在水溶液中极易聚集和沉淀,纯化难度远大于可溶性蛋白。关键技术在于使用温和的去垢剂(如DDM、Triton X-100)将其从膜中“溶解”出来,并在整个纯化过...
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