病理实验外包,病理染色肌肉组织染色1.横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色:粗弹性纤维(有时)紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌2.早期心肌病变组织染色(1)Nagar-Olsen染色法(1974年)红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核(2)Poley显示缺氧心肌染色法(1964年)红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测,一站式生物病理实验外包检测平台。专业的病理实验外包价格病理实验外包组织...
病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片粘在切片刀不易取下●原因:切片时有静电作用,产生静电吸引,在冬季或气候干燥时常出现这种情况。●解决方法:可用加湿器。以增加空气中的水分,而减少静电作用。2.切片厚薄不均●原因:①切片微动部分失灵,齿轮跳格。②蜡块太大,过硬,转动时刀刃受震动。●解决方法:①修理切片机失灵的部分,调整螺旋。加机油润滑零件,必要时需请专业技术人员调整切片机。②如蜡块过大,以后取材时注意取材的大小。蜡块组织过硬,可返回水中浸泡,再重新脱水和包埋。病理实验外包检测,一站式生物病理实验外包检测平台。贵州专门做病理实验外包公司病理实验外包常见染色介绍MASSON染色:m...
病理实验外包,病理染色免疫组化染色的分类:1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。3)按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较常用的方法;聚合物链接,如即用型二步法,此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检...
病理实验外包比较常见的病理染色实验是免疫组化染色,用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,***通过显色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。免疫组化的特...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍油红O染色:油红O脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红O进行染色的方法,油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。肝细胞内的脂肪滴呈红色,细胞核呈蓝色1.标本人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。2.改良的油红O染色液油红O0.5g,50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。3.染色步骤①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④苏木素复染核,自来水返蓝,甘油...
病理实验外包,病理染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍VonKossa染色:简介:钙结节的形成为成骨细胞特有,Vonkossa染色法是染色矿化结节的经典方法,利用硝酸银与钙盐的复分解反应形成可被还原的银盐,在强光或紫外光下或者强还原剂作用下使其还原为黑色的金属银。简要流程:石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→硝酸银滴染→苏木素染核→伊红染色→脱水、透明、封片(中性树胶)→Vonkossa染**(钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,细胞核呈蓝色,背景呈红色;或者钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,背景呈红色)。VonKossa染色利用金属离子置换反应检测组织中钙盐沉积,由硝酸银溶液中的银离子置换组织中沉积的钙离子。该染色可用于...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍甲苯胺蓝染色:甲苯胺蓝(Toloniumchloride),是一种化合物,分子式为C28H20N2O10S2·2Na,分子量为656.62,甲苯胺蓝深绿色粉末,具古铜色光泽,易溶于水,呈蓝紫色溶液。微溶于醇呈蓝色,极微溶于氯仿,几乎不溶于醚。商品大部分为氯化锌复盐。主要用于氧化还原指示剂。用于眼科检查角膜缺陷和损伤部分,组织化学中用于测定脱氧核糖核酸和诊断白喉。甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍番红-固绿(骨)染色:番红O-固绿染色可直观反映关节软骨、软骨下的骨组织结构,软骨呈红色,成骨呈绿色,对比鲜明,区分清晰,在关节软骨及软骨下骨的形态学研究中备受青睐。嗜碱性的软骨组织与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨组织和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色。本质上,番红O与蛋白聚糖中的多聚阴离子物质(硫酸软骨素和硫酸角质素)成正向比例结合(离子浓度),不与胶原结合,可间接反应基质中蛋白聚糖的含量与分布。正常的软骨基质分布均匀一致,当软骨受到损伤时,创伤刺激可使软骨基质中糖蛋白立即释放活化,使基质成分发生变化,导致番红O淡染,甚至失染。固绿可与结构疏松的胶原纤...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍扫描电镜检测:扫描电子显微镜的制造是依据电子与物质的相互作用。当一束高能的人射电子轰击物质表面时,被激发的区域将产生二次电子、俄歇电子、特征x射线和连续谱X射线、背散射电子、透射电子,以及在可见、紫外、红外光区域产生的电磁辐射。同时,也可产生电子-空穴对、晶格振动 (声子)、电子振荡 (等离子体)。原则上讲,利用电子和物质的相互作用,可以获取被测样品本身的各种物理、化学性质的信息,如形貌、组成、晶体结构、电子结构和内部电场或磁场等等。扫描电子显微镜 (scanning electron microscope, SEM) 是一种用于高分辨率微区形貌分析的大型精密...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍油红O染色:油红O脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红O进行染色的方法,油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。肝细胞内的脂肪滴呈红色,细胞核呈蓝色1.标本人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。2.改良的油红O染色液油红O0.5g,50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。3.染色步骤①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④苏木素复染核,自来水返蓝,甘油...
病理实验外包,病理染色组织脱水注意事项:1.脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。2.在更换高一级的脱水剂时,比较好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。3.在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使组织变软,助长材料的解体。4.在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使组织变脆,影响切片。5.如需过夜,应停留在70%酒精中。6.脱水必须彻底,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象专注于整体的科研项目、病理实验外包检测解决方案。贵州靠谱的病理实验外包推荐病理实验外包,病理染色黑色素染色1.Mass...
病理实验外包常见染色介绍MASSON染色:masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合,胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。Masson染色是显示胶原纤维分布的经典染色方法,利用染色的两种不同分子量的阴离子在组织渗透性的差异,根据不同的渗透性能差异,区分出不同的组织成分。经Masson染色后,胶原纤维呈现蓝色,肌纤维红色,细胞核蓝黑色。Masson染色可用作心梗模型、肺纤维化、肝纤维化以及肾纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。南京实验医学平台一站式病理实验外包检测平台。湖北专门做病理实验外包检测病理实验外...
病理实验外包,病理染色组织处理的要求:恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因素,在组织细胞材料准备的过程中,不仅要求保持组织细胞形态完整,更要保持组织细胞的抗原性不受损或弥漫,防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织,抗原已经丢失,即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术,也很难检出所需的抗原,反而往往由于组织的坏死或制片时的刀痕挤压,在上述区域易出现假阳性结果。组织及时取材和固定组织标本及时的取材和固定是做好免疫组化染色的关键第一步,是有效防止组织自溶坏死,抗原丢失的开始,离体组织应尽快的进行取材,比较好2h内,取材时所用的刀应锐利,要一刀下去切开组织,不可反复切拉组织,...
病理实验外包,样品保存和寄送注意事项一、取材注意事项1.取材动作要迅速,不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。2.切片材料应根据需要观察的部位进行选择,尽可能不要损伤所需要的部分。二、固定注意事项1.一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化,失去固定作用。2.有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定时就没有作用了。3.固定材料时,固定液必须充足,一般为材料块的20~30倍,有些水分多的材料,中间应更换1~2次新液。4.材料固定完毕后,保存于严密紧塞或加盖的容器里,同时在容器外上标签,并随同材料在溶...
病理实验外包,冰冻切片取样实验步骤:一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm)。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。三、固定1.样品托上涂一层OCT包埋胶,将速冻组织置于其上,4℃冰箱预冷5~10min让OCT胶浸透组织。2.取下组织置于锡箔或者...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍透射电镜检测:通过电子束穿透细胞和组织,从而可以观察细胞内的超微结构。其放大倍数更大,真空要求也更高。透射电子显微镜可以看到在光学显微镜下无法看清的小于0.2nm的亚显微结构或超微结构。电子显微镜技术的应用是建立在光学显微镜的基础之上的,光学显微镜的分辨率为0.2μm,透射电子显微镜的分辨率为0.2nm,也就是说透射电子显微镜在光学显微镜的基础上放大了1000倍。透射电镜的电子束通过样品后由物镜成像于中间镜上,再通过中间镜和投影镜逐级放大,成像于荧光屏或照相干版上,分辨细微物质结构;能在看到表面的图像的同时也看到内层物质。用于******电镜检查的标本必须制成...
病理实验外包,冰冻切片取样实验步骤:一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm)。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。三、固定1.样品托上涂一层OCT包埋胶,将速冻组织置于其上,4℃冰箱预冷5~10min让OCT胶浸透组织。2.取下组织置于锡箔或者...
病理实验外包,病理染色骨组织的处理方式:组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶,经过固定后,需要先将钙盐除去使组织软化,才能进行常规切片。如果脱钙不全,则切片容易撕开或碎裂,损伤切片刀刀刃。脱去钙盐的过程,称为脱钙。骨组织固定24小时后,锯下不超过0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,进行脱钙。骨组织过厚则需延长脱钙时间,但长时间浸于强酸会影响切片染色效果。取材骨组织固定于10%甲醛溶液24小时后再锯取厚度约0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脱钙将组织置于脱钙剂中,每日更换新鲜液,直至组织软化为止除酸流水冲洗24小时脱水、浸蜡、切片进行常规脱水、透明、浸蜡、...
病理实验外包,病理染色HE染色常见问题:Q5:细胞核呈棕红色改变答:苏木素染液过度氧化;或苏木素染色后反蓝不足导致。应该立即更换苏木素染色液。或在流动自来水(一般自来水PH7.5-7.8),或在稀释的氨水溶液,或在0.2%碳酸氢钠中适当浸泡,这些步骤均可一定程度地加强苏木素染色后的反蓝效果。Q6:伊红染色较淡答:伊红的PH改变了(PH可能已大于5);或反蓝液体未漂洗干净,残留后影响胞浆嗜酸性染色;或者切片太薄并且在随后的脱水步骤停留过久。对策:检查伊红染色液PH,可采用乙酸调至4.6-5.0。根据以上提示,调整实验步骤。南京病理实验外包检测,优先南京英瀚斯。河北专门做病理实验外包哪家靠谱病理实...
病理实验外包,病理染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍VonKossa染色:简介:钙结节的形成为成骨细胞特有,Vonkossa染色法是染色矿化结节的经典方法,利用硝酸银与钙盐的复分解反应形成可被还原的银盐,在强光或紫外光下或者强还原剂作用下使其还原为黑色的金属银。简要流程:石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→硝酸银滴染→苏木素染核→伊红染色→脱水、透明、封片(中性树胶)→Vonkossa染**(钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,细胞核呈蓝色,背景呈红色;或者钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,背景呈红色)。VonKossa染色利用金属离子置换反应检测组织中钙盐沉积,由硝酸银溶液中的银离子置换组织中沉积的钙离子。该染色可用于...
●原因:①组织脱水,透明不够。②浸蜡时间过长、浸蜡温度过高。③组织脱出是由于脱水、透明时间不够,或组织中含有乙醇等,石蜡不易渗入组织中故导致石蜡与组织分离。④二甲苯使用时间过久。●解决方法:①必须按组织大小厚薄选择脱水、透明时间。②依组织的性质和结构特点确定浸蜡时间、控制包埋温度。一般这种情况难以补救。③脱水,透明渗蜡不够,应重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再进行渗蜡包埋。④更换二甲苯。2.切片皱褶太多且不能完全展开●原因:①石蜡太软或室温过高。②切片刀上粘有残余的石蜡,刀口不干净。③组织浸蜡时间不够或脱水、透明不够。④切片刀不锋利。●解决方法:①可将蜡块放入冰箱中冰冻后切片。并在切片时一边切片...
病理实验外包,病理染色组织的取材和要求:知识点1:对送检组织标本的要求送检组织标本在手术切除或活检后应当立即放入4%中性缓冲甲醛溶液中固定。尸检标本应当尽量在死亡后尽早取材固定。送检组织需要全部取材的,应当在送检单上注明,有特殊要求(如细菌培养、解释道化学分析等)应当事先联系,并且在标本未固定前进行处理。知识点2:组织取材要求在对送检组织标本进行详细检查的基础上,根据诊断的需要,确定取材的部位和块数。切取的组织应当按照不同的部位分别给予不同的编号或标记,以便镜检时核对。另外,尽可能在取材前对有意义的标本的表面及剖面镜下摄影,并编号存档南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测,一...
病理实验外包中,HE染色,比较常见的病理染色。苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE染色)是组织学染色的常用方法。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织病理学与医学科研中比较基本、使用比较普遍的染色技术。HE染色是用苏木素和伊红分别染上胞核和胞浆,可以区分出一般细胞的形态,普遍用于形态学基础上的组织细胞的生理、病理和化学结构的研究。在实际应用中可以鉴定组织细胞坏死、水肿、变性和炎性细胞浸润等异常病理学改变,是恶性**等疾病病理学诊断的常规方法。南京英瀚斯生...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍番红-固绿(骨)染色:番红O-固绿染色可直观反映关节软骨、软骨下的骨组织结构,软骨呈红色,成骨呈绿色,对比鲜明,区分清晰,在关节软骨及软骨下骨的形态学研究中备受青睐。嗜碱性的软骨组织与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨组织和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色。本质上,番红O与蛋白聚糖中的多聚阴离子物质(硫酸软骨素和硫酸角质素)成正向比例结合(离子浓度),不与胶原结合,可间接反应基质中蛋白聚糖的含量与分布。正常的软骨基质分布均匀一致,当软骨受到损伤时,创伤刺激可使软骨基质中糖蛋白立即释放活化,使基质成分发生变化,导致番红O淡染,甚至失染。固绿可与结构疏松的胶原纤...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍普鲁士蓝染色:普鲁士蓝染色(Prussianbluereaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁**钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内会间质内,主要显示三价铁盐。Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其染色原理为:亚铁**钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁**钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁**物普鲁士蓝,所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁**物是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。Perlsstain常...
病理实验外包中,HE染色,比较常见的病理染色。苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE染色)是组织学染色的常用方法。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织病理学与医学科研中比较基本、使用比较普遍的染色技术。HE染色是用苏木素和伊红分别染上胞核和胞浆,可以区分出一般细胞的形态,普遍用于形态学基础上的组织细胞的生理、病理和化学结构的研究。在实际应用中可以鉴定组织细胞坏死、水肿、变性和炎性细胞浸润等异常病理学改变,是恶性**等疾病病理学诊断的常规方法。病理实验外包...
病理实验外包,病理染色常见染色介绍TUNEL染色:基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法检测细胞凋亡的原理。实验步骤使细胞或组织贴在载玻片上➜固定➜洗涤➜通透➜洗涤➜预平衡➜用荧光素12-dUTP标记断裂的DNA链➜终止反应➜洗涤➜封片➜分析样品南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平...
病理实验外包中,HE染色,比较常见的病理染色。苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE染色)是组织学染色的常用方法。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织病理学与医学科研中比较基本、使用比较普遍的染色技术。HE染色是用苏木素和伊红分别染上胞核和胞浆,可以区分出一般细胞的形态,普遍用于形态学基础上的组织细胞的生理、病理和化学结构的研究。在实际应用中可以鉴定组织细胞坏死、水肿、变性和炎性细胞浸润等异常病理学改变,是恶性**等疾病病理学诊断的常规方法。病理实验外包...