腰椎间盘突出是造成全球大部分地区工作缺失和活动受限的主要疾病,随着日常生活节奏的不断加快,腰椎间盘突出症已经成为临床脊柱外科的常见病和多发病,而且发病人群越来越呈现年轻化及普遍化的趋势。该病主要是由于腰椎长期的受力不均或突然性外伤,导致腰椎纤维环出现变形、破裂,纤维环、髓核及软骨终板单独或同时外突,从而压迫到坐骨神经、神经根或马尾神经,患者出现腰部疼痛,牵连股部,下肢足部放射性疼痛,引起神经功能、运动功能障碍,特定身体部位出现麻痹或瘫痪症状。良好的腰椎间盘突出动物模型的建立,可以生动直观的帮助医疗工作者理解腰椎间盘突出压迫神经后,神经的病理生理变化以及疾病的发***展规律,并可以通过成熟的动物...
配制成6mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实验建立大鼠卵巢早衰模型1.实验仪器及材料:如表1所示。表12.实验方法:①动物信息:sd大鼠,雌性,6-8周,体重180-220g。普通环境饲养,灭菌饲料饲养,自由饮水。②分组及给药剂量:如表2所示。表2③给药途径及频率:腹腔注射;2mg、3mg组连续注射7天;4mg、6mg组***天、第八天注射;对照组连续7天注射生理盐水。④病理检测:末次注射后15天,动物麻醉,采集血液,分离血清,elisa法测定血清中e2、fsh、lh水平变化情况。解剖动物,取卵巢组织称重,对大鼠的卵巢组织形态学进行观察。注射期间每天称重,...
可以克服人类某些疾病潜伏期长,病程长和发病率低的缺点一般遗传性、免疫性、代谢性和内分泌等疾病在临床上发病率很低,例如急性白血病的发病率较降,研究人员可以有意识地提高其在动物种群的中发生频率,从而推进研究。同样的途径已成功地应用于其他疾病的研究,如血友病、周期性中性白细胞减少症和自身免疫介导性疾病等。临床上某些疾病潜伏期很长,很难进行研究,、慢性气管炎、肺心病、等疾病,这些疾病发展很缓慢,有的可能要几年、十几年、甚至几十年。有些致病因素需要隔代或者几代才能显示出来,人类的寿命期相对来说是很长的,但一个科学家很难有幸进行三代以上的观察,而许多动物由于生命的周期很短,在实验室观察几十代是容易的,如果...
技术领域:本发明属于遗传学和生物技术领域,具体涉及pirb基因敲入的小鼠动物模型,还涉及上述小鼠动物模型的构建方法。背景技术:鼠源成对免疫球蛋白样受体b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb,pirb),是人类免疫球蛋白样受体b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2,lilrb2)的同源基因,pirb基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的7号染色体近端,总大小为,编码841个氨基酸,目前鉴定出15个外显子,外显子1起始密码为atg,外显子15的终止密码子是tga(转录本:)。pi...
疾病动物模型是指医学研究中建立的具有人疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。关于动物模型的研究就是有关实验动物的应用科学,研究各种模型动物的生物学特性和疾病特点,进而研究动物疾病发展过程。实验动物模型的建立,是用人为的方法,使动物在一定的治病因素(物理的、化学的、生物的)作用下,造成动物组织、或全身一定程度损害,出现某些类似动物疾病的功能、代谢、形态结构方面的变化或各种疾病,通过这种手段来研究动物疾病的发生、发展规律,为研究动物疾病的预防、(包括新药物试用)提供理论依据。欢迎致电咨询疾病动物模型建模。正规疾病动物模型建模价格在一个具体实施方式中,压迫元件采用黄铜和锌的混合物制备而成。具体地,混...
动物模型名称:FSH联合HCG致超排怀孕小鼠模型2、实验动物种属:KM小鼠或NIH小鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:3~4周龄5、实验动物体重:16~18g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:注射用重组人促卵泡***(FSH)联合注射绒促性素(HCG)诱导。对雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG当天下午约16:00~17:00按雌雄鼠1:1合笼。次日早上检查雌鼠阴栓情况。2、检测标准:合笼后次日雌鼠检查出现阴栓,表明成功构建了超排怀孕小鼠模型。找疾病动物模型建模,就找上海东寰。肺病...
即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于,步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是:本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法,本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发...
动物模型名称:FSH联合HCG致超排怀孕小鼠模型2、实验动物种属:KM小鼠或NIH小鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:3~4周龄5、实验动物体重:16~18g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:注射用重组人促卵泡***(FSH)联合注射绒促性素(HCG)诱导。对雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG当天下午约16:00~17:00按雌雄鼠1:1合笼。次日早上检查雌鼠阴栓情况。2、检测标准:合笼后次日雌鼠检查出现阴栓,表明成功构建了超排怀孕小鼠模型。收集研究疾病的生物学信息资料。金山区生...
疾病动物模型和人类的关系科学研究是探索未知,实验研究的结果往往会出乎意外,不受人为的控制,所以关乎人类本身的研究,在人体上进行试验,风险很大;对一些数量很少的珍稀动物,或一些因体型庞大,不易实施操作的种类,往往用取材容易,操作简便的另一种动物来进行实验研究,代替人类或原来的目标动物,这就是动物实验。为了保证这些动物实验更科学、准确和重复性好,用各种方法把一些需要研究的生理或病理活动相对稳定地显现在标准化的实验动物身上,供实验研究之用。这就称之为动物实验中的动物模型。疾病动物模型建模有加些方式?普陀区如何使用疾病动物模型建模动物模型名称:胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠...
动物模型名称:皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:160-200g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠,根据体重腹部备皮,然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯,将纱布条浸入热水中,待水温恒定于99℃时,取出纱布,立即平铺于待烫部位,于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤,致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准:a.皮肤大体观察:致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好,有少量红褐**素沉着,皮肤轻微挛缩,表皮光滑;致伤10s大鼠局部皮肤发...
其可与dna链交叉连接,显示出细胞毒作用。溶解后在体内无需载体转运,即可通过带电的细胞膜。由于细胞内氯离子浓度低(4mmol/l),氯离子为水所取代,电荷呈阳性,具有类似烷化剂双功能基团的作用,可与细胞核内dna的碱基结合,形成三种形式的交联,造成dna损伤,破坏dna复制和转录,高浓度时也抑制rna及蛋白质的合成。顺铂具有抗*谱广、乏氧细胞有效、作用性强等优点,已普遍用于***睾丸*、卵巢*、子宫*、膀胱*、颈部*、前列腺*、脑*等,疗效***。但顺铂用于****有一定的毒性,会引起副作用,与卵巢的损害有直接关系,有研究表明顺铂可诱导卵巢细胞凋亡。疾病动物模型建模实验室。江苏口碑好的疾病动物...
球囊拉伤致高脂血症动脉硬化兔模型,实验动物种属:新西兰兔,实验动物环境:SPF级1、实验方法:用球囊拉伤诱导法。采用3%戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉,经右股浅动脉,将3.5F球囊扩张导管插至腹主动脉20cm,球囊充液膨胀至2个大气压缓慢拉出,反复3次。球囊拉伤手术后,动物喂以高脂饲料,连续9周,每天给料两次,自由饮水。实验结束后取腹主动脉斑块进行组织病理学检查。2、检测标准:腹主动脉斑块病理镜下可见腹主***程度的改变。人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。口碑好的疾病动物模型建模厂家《人类疾病动物模型》为生部"十一五"规划教材。为了提高医学研究生培养质量,编...
建立一种理想的腰椎间盘突出的动物模型对本病的机制研究和临床防治具有重要意义。现有模型对腰椎间盘突出症的模拟均存在明显不足,或与临床实际病变部位有一定差距,如慢性坐骨神经结扎模型;或操作难度大,对动物损伤重,如自体髓核移植模型,选择性神经根结扎模型。因此,急需一种新的操作简单,重复率高,稳定且能准确模拟腰椎间盘突出后症状的动物模型。技术实现要素:为了建立一种操作简单,稳定好且能准确模拟腰椎间盘突出后症状的动物模型,本发明提供了一种大鼠慢性背根神经压迫模型的制备方法。其包括以下步骤:步骤一、麻醉大鼠;步骤二、于大鼠腰4到骶1水平左侧或右侧作纵行切口,切开皮肤,钝性分离椎旁肌,暴露腰4椎间孔和腰5椎...
因此,应用动物模型,除了能克服在人类研究中经常会遇到的理论和社会限制外,还容许采用某些不能应用于人类的方法学途径,甚至为了研究需要可以损伤动物组织、或处死动物。(二)临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来临床上平时很难收集到放射病、毒气中毒、烈性传染病等病人,而实验室可以根据研究目的要求随时采用实验性诱发的方法在动物身上复制出来。(三)可以克服人类某些疾病潜伏期长,病程长和发病率低的缺点一般遗传性、免疫性、代谢性和内分泌等疾病在临床上发病率很低,例如急性白血病的发病率较降,研究人员可以有意识地提高其在动物种群的中发生频率,从而推进研究。同样的途径已成功地应用于其他疾病的研究,如血友病、周...
技术领域:本发明属于遗传学和生物技术领域,具体涉及pirb基因敲入的小鼠动物模型,还涉及上述小鼠动物模型的构建方法。背景技术:鼠源成对免疫球蛋白样受体b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb,pirb),是人类免疫球蛋白样受体b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2,lilrb2)的同源基因,pirb基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的7号染色体近端,总大小为,编码841个氨基酸,目前鉴定出15个外显子,外显子1起始密码为atg,外显子15的终止密码子是tga(转录本:)。pi...
实验第21天起将小鼠置于雾化激发器内,给予2%OVA生理盐水雾化激发,1次/d,每次30min,连续7天,将小鼠呼吸急促,搔鼻抓痒、呛咳烦躁、点头运动等作为小鼠模型成功的标准。正常对照组以生理盐水代替OVA腹腔注射和雾化激发,操作同上所述。6.2模型鉴定及后续检测:6.2.1小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)TH2型细胞因子蛋白水平检测待造模完成后,抽取BALF后用ELISA方法检测其中TSLP、IL-33和MUC5AC的表达情况。附支气管肺泡灌洗液抽取方法:小鼠取血后,开胸,分离纵膈,注射器抽取3ml生理盐水从气管插管推入肺中,每次反复灌洗3次后抽出灌洗液,肺泡灌洗液以4℃3000r/min离...
在cns,pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明,因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制剂,或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响,后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低,使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题,我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠,将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点,为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素:本发明的...
诱发性**模型的原理是利用外源性致*因素引起细胞遗传特性异常而呈现出异常生长和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化学性、物理性及生物性致*物,而化学性致*物(chemicalcarcinogens)**常见,已确知的多达一千余种,用于诱发实验性**的种类亦很多,如苯并萨,申基胆菌、联苯胺、亚硝胺类、黄曲霉***类。各种致痒物的致*强度、致*谱等特性相差较大,同一种致*物经不同途径给药所致**部位或类型可有很大差异。有些化学性致*物具有明显的亲***或组织特性。因此,实验工作中应根据需要选用适当致*物和致*途径,并确定其他影响因素或实验条件。基本原理:利用外源性致*物引起细胞遗传特性改变,从而...
可比性一般疾病多为零散发生,在同一时期内,很难获得一定数量的定性材料,而模型动物不仅在群体数量上容易得到满足,而且可以在方法学上严格控制实验条件,在对饲养条件及遗传、微生物、营养等因素严格控制的情况下,通过物理、化学或生物因素的作用,限制实验的可变因子,并排除研究过程中其它因素的影响,取得条件一致的、数量较大的模型材料,从而提高实验结果的可比性和重复性,使所得到的成果更准确更深入。折叠意义4有助于认识疾病的本质在临床上研究疾病的本质难免带有一定局限性。小鼠是人类疾病理想的动物模型不仅因为小鼠在生理上与人类极为相似而且小鼠的遗传资源非常丰富。肺病疾病动物模型建模价格其中可以看出手术侧后爪的缩足阈...
步骤i.将步骤h的吸附柱放入收集管,12000rpm离心2min。步骤j.吸附柱放到一个新的,在吸附柱膜**加入50~200μl灭菌水或者洗脱液,停留5min。(将无菌水或者洗脱液加热到65℃能够增加洗脱的得率)。步骤i.基因组dna定量,洗脱的基因组dna可以通过电泳鉴定。方法2:一种低成本基因组dna的粗提方法:步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入离心管中,加入100μl尾部消化缓冲液,注意不要剪尾太长;步骤b.将离心管及其内容物于56℃孵育过夜;步骤c.过夜后将离心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步骤d.在微型离心机以**大转速旋转15min,上清直接用于pcr体系...
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意...
随着大气污染、吸烟、工业经济发展导致的理化因子增多以及人口年龄老化等因素,呼吸系统疾病近年来有明显增长的趋势。由于呼吸疾病涉及的较多,包括气管、支气管及肺部等,单以肺部为例,所涉疾病就包括肺阻塞、肺纤维化、肺气肿、等,下面,武汉云克隆将以大鼠/小鼠为模式动物,介绍几种常见的肺部疾病动物模型。4.特发性肺纤维化特发性肺纤维化(Idiopathicpulmonaryfibrosis,IPF)为不明原因引起的成人慢性、进展性、纤维化性间质性肺炎。4.1建模方法:SPF级C57/BL6雌性小鼠,体重约18~20g。使用气管滴注博来霉素法建模。找疾病动物模型建模,就找上海东寰。肺病疾病动物模型建模公司动...
引起组织坏死,从而导致卵巢功能早衰。技术实现要素:针对上述现有技术,本发明提供了一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本发明根据“顺铂可诱导卵巢细胞凋亡,引起组织坏死,从而导致卵巢功能早衰”这一原理,使用不同浓度及不同方法建立了化疗性损伤卵巢早衰动物模型,并对比各种方法间的优劣性,筛选出顺铂比较好的浓度及给药时间,为筛选顺铂导致的卵巢早衰动物模型比较好剂量提供了一种操作简单,成功率高,结果可靠的实验方法。本发明是通过以下技术方案实现的:一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法:将剂量为按体重一日2~3mg/kg的顺铂施用于大鼠,施用方式为腹腔注射,施用方法:连续施用7天,末次注射后第15天,得...
该模型能够帮助我们研究pirb基因在免疫系统和神经系统的功能以及下游的调节机制。本发明的另一目的在于提供上述小鼠动物模型的构建方法。本发明所采用的第一种技术方案是:pirb基因敲入的小鼠动物模型,包括确定pirb基因的待敲入的特异性靶位点grna1和grna2,将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内,所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本发明所采用的第二种技术方案为:pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法,将步骤3中性成熟的阳性f0小鼠分别与野生型鼠交配繁一代,获得f1代杂合子小鼠,通过pcr、测序和southern杂交确定动物...
《人类疾病动物模型》为生部"十一五"规划教材。为了提高医学研究生培养质量,编写一套供全国高等医学院校研究生用规划教材,全国高等医药教材建设研究会、卫生部教材办公室组织在全国进行了主编人评选,授主要介绍人类疾病动物模型总论、人类疾病动物模型各论等。在生命科学领域中,实验研究是学科发展的基础,尤其是动物实验,是生命科学实验研究中的重要组成部分。对实验动物进行科学的繁育,以及实施严格的质量监测和管理,其目的就是使动物实验研究准确无误而更接近真实,使实验结果具有科学性和重复性。在动物实验中人们发现,动物在生命活动中的生理和病理过程,与人类或异种动物都有很多相似之处,并可互为参照,一种动物的生命活动过程...
pcrmix:反应条件:pcr扩增产物的电泳鉴定结果如图3所示,从图3中可以看出,6、8、9号为pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr产物没有这两个扩增产物。(c)短链pcr反应,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能够扩增出344bp的产物,而野生型没有。pcr体系:反应条件:(2)f1代小鼠测序:通过pcr扩...
pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠,pirb基因敲入到特异性组织或细胞中。其中pirb-cwt小鼠表达cre,但不含有loxp-pirb等位基因,pirb-chetandpirb-cki小鼠表达cre并分别含有一个或者两个loxp-pirb等位基因。其中f3代杂交小鼠纯合子/杂合子鉴定所用的pcr引物如下:f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildty...
诱导模型实验动物:小鼠、豚鼠、大鼠造模试剂:烟雾、空气污染物及有害气体(PM2.5、臭氧、二氧化氮)、脂多糖、弹性蛋白酶获得方式:动物全身长时间放置在密闭容器内,暴露于烟雾、空气污染物或者有害气体;气管内滴注脂多糖或者弹性蛋白酶。模型特点:烟雾、空气污染物或者有害气体诱导模型使用的物质、暴露的剂量、频次和时间不尽相同;脂多糖造模时间短,可用来模拟急性加重反应,但不能反应慢性病变的过程,通常需要和其他造模方法联用。2.基因模型实验动物:α1-抗胰蛋白酶等基因敲除小鼠获得方式:直接购买模型特点:α1-抗胰蛋白酶基因敲除小鼠是经典的COPD转基因模型,更准确地理解易感基因的致病机制。构建人源移植瘤模...
自发性**动物模型:未经人为处理;自然发生;自发性**的总体评价--动物自发性**的病因往往是由动物的遗传特性决定的与人痒的病因有较大距离。各动物**生长速度差异较大很难在限定时间内获得大量生长均匀的荷瘤动物(tumor-bearinganimals)。因此,自发性**动物模型很少在抗**药物的常规筛选中广泛应用。2、诱发性**动物模型:在实验条件下:使用致*物(carcinogens);诱发动物发生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在实验条件下诱发动物发生**的动物模型,它是进行实验**学研究的常用方法。常用于验证可疑致*因素的作...
r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步骤4、鉴定为pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周龄、雌性小鼠6周龄分别与野生型异性小鼠交配获得f1代杂合子小鼠,图2为本发明f1代杂合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程图,小鼠出生后20天进行pcr鉴定,若有阳性小鼠出生,则表示转基因已经整合到生殖细胞。(1)通过pcr方法对获得的f1代小鼠进行基因型的鉴定:(a)dna的提取:方法1:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()来获得高纯度的基因组dna。步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入离心管中,加入180μl...