步骤i.将步骤h的吸附柱放入收集管,12000rpm离心2min。步骤j.吸附柱放到一个新的,在吸附柱膜**加入50~200μl灭菌水或者洗脱液,停留5min。(将无菌水或者洗脱液加热到65℃能够增加洗脱的得率)。步骤i.基因组dna定量,洗脱的基因组dna可以通过电泳鉴定。方法2:一种低成本基因组dna的粗提方法:步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入离心管中,加入100μl尾部消化缓冲液,注意不要剪尾太长;步骤b.将离心管及其内容物于56℃孵育过夜;步骤c.过夜后将离心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步骤d.在微型离心机以**大转速旋转15min,上清直接用于pcr体系...
ng)=×片段碱基对数(单片段);适片段用量(ng)=×片段碱基对数(多片段)。注1:单片段重组反应,若单个插入片段的长度大于载体,则应将载体与插入片段的计算公式互换;注2:单片段重组反应,若单个插入片段的长度小于200bp,则插入片段应使用5倍的用量;注3:多片段重组反应,各个插入片段的用量应不少于10ng,使用上述公式计算适使用量低于此值时,直接使用10ng;注4:若按上述公式计算出的线性化载体用量低于50ng或高于200ng,建议按50ng或200ng用量使用;注5:线性化载体过长,插入片段过长或片段数过多,克隆阳性率均会降低。2、体系反应;1、配制完成后,用移液器轻轻吸打混匀各...
上海东寰生物科技有限公司模型特点:造模时的致敏激发的时间间隔、剂量和频次不尽相同,通常获得的是嗜酸细胞性。若要研究其他表型的,需要调整剂量、改变流程或者添加LPS等试剂。COPD动物模型1.诱导模型实验动物:小鼠、豚鼠、大鼠造模试剂:烟雾、空气污染物及有害气体(PM2.5、臭氧、二氧化氮)、脂多糖、弹性蛋白酶获得方式:动物全身长时间放置在密闭容器内,暴露于烟雾、空气污染物或者有害气体;气管内滴注脂多糖或者弹性蛋白酶。欢迎致电咨询疾病动物模型建模。静安区呼吸疾病动物模型建模 进而使一些生长因子受体磷酸化。方法:有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周龄雌性C3H/Hen小鼠...
卵巢早衰(pof)是指女性40岁前以闭经、不育、雌***缺乏及促性腺***水平升高为特征的一种疾病。一般人群中发病率为1%~3%,在继发性闭经妇女中占4%~8%,在20岁以前的发病率为%。近年来pof在育龄妇女中的发生率有逐年升高且向年轻化发展的趋势,由于卵巢早衰患者卵巢分泌的雌***量减少,即可导致一些其他疾病,如骨质疏松、泌尿生殖道萎缩、脂质代谢紊乱、心血管疾病。顺铂又称顺氯氨铂、氯氨铂、ddp、锡铂,是目前常用的金属铂类络合物,在分子中铂原子对其抗**作用有重要意义。但只有顺式才有意义,反式无效。其可与dna链交叉连接,显示出细胞毒作用。溶解后在体内无需载体转运,即可通过带电的细胞膜。由...
1、动物模型名称:皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:160-200g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠,根据体重腹部备皮,然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯,将纱布条浸入热水中,待水温恒定于99℃时,取出纱布,立即平铺于待烫部位,于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤,致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准:a.皮肤大体观察:致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好,有少量红褐**素沉着,皮肤轻微挛缩,表皮光滑;致伤10s大鼠局部皮...
IgA肾病小鼠模型一、目的建立IgA肾病小鼠模型,并观察模型的生化及病理指标特点。二、试剂耗材1、酸化水:盐酸调灭菌水;2、蓖麻油+CCl4:5:1配制;3、LPS:生理盐水配制;4、血清白蛋白BSA:800mg/kg用量,灭菌水配制;三、方法:小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS诱导法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次,配制160mg/ml,灌胃100ul/只,持续8周;2、同时皮下注射蓖麻油和CCl4(5:1),1次/周,持续8周;3、分别于第6、8周以()尾静脉注射LPS,1次/周;4、每两周取24h尿液一次观察尿蛋白及红细胞;5、每日观察精神、饮食、...
步骤i.将步骤h的吸附柱放入收集管,12000rpm离心2min。步骤j.吸附柱放到一个新的,在吸附柱膜**加入50~200μl灭菌水或者洗脱液,停留5min。(将无菌水或者洗脱液加热到65℃能够增加洗脱的得率)。步骤i.基因组dna定量,洗脱的基因组dna可以通过电泳鉴定。方法2:一种低成本基因组dna的粗提方法:步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入离心管中,加入100μl尾部消化缓冲液,注意不要剪尾太长;步骤b.将离心管及其内容物于56℃孵育过夜;步骤c.过夜后将离心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步骤d.在微型离心机以**大转速旋转15min,上清直接用于pcr体系...
放血致失血性贫血小鼠模型放血致失血性贫血小鼠模型一、服务信息1、动物模型名称:放血致失血性贫血小鼠模型2、实验动物种属:KM小鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:约4周龄5、实验动物体重:18~22g6、实验动物环境:SPF级二、服务项目服务编号服务内容服务周期价钱DH2014放血致失血性贫血小鼠模型3个工作日询价1、实验方法:眼眶静脉丛放血法。小鼠通过眼眶静脉丛放血,,并测外周血红细胞总数(RBC)及血红蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶静脉丛检测外周血RBC总数及Hb含量。2、检测标准:模型组小鼠放血后24小时的外周血RBC总数及Hb含量较放血前明显下降,低于正常值参...
可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的,但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等,可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法,检测方法等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规实验方法,检测方法等。实施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液50ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg顺铂注射液,按照10ml/k...
2mg组、4mg组、6mg组lh水平均上升,同样,只有2mg组有明显升高(p<),如图3所示。表3表4②体重变化:(mean±sd),如图4所示:2mg组(连续注射7天)与空白组相比,大鼠体重***下降(p<,注射第2天开始)。3mg组(连续注射7天)与空白组相比,大鼠体重***下降(p<,注射第4天开始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg组(第1、8天注射)与空白组相比,大鼠体重分别在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg组体重在停止给药后4天与空白组无差异。③卵巢重量:如表5、图5所示,2mg、6mg组大鼠在经过顺铂注射后卵巢重量相比对照组,都有不同程度缩减,其中2...
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意...
1、动物模型名称:固定制动致制动应激大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:采用固定制动方法。大鼠每天固定5~6小时进行制动应激,连续制动40天。2、检测标准:模型组大鼠体重增长速度较正常对照缓慢;旷场试验的结果显示,造模结束时与正常对照组比较,模型组大鼠的水平穿越格数、垂直运动次数、理毛时间均减少,**格停留时间、粪便粒数均增加;ELISA的结果显示,造模结束时与正常对照组比较,模型组大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明显增高。上海东寰提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据...
pcrmix:反应条件:pcr扩增产物的电泳鉴定结果如图3所示,从图3中可以看出,6、8、9号为pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr产物没有这两个扩增产物。(c)短链pcr反应,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能够扩增出344bp的产物,而野生型没有。pcr体系:反应条件:(2)f1代小鼠测序:通过pcr扩...
在cns,pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明,因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制剂,或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响,后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低,使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题,我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠,将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点,为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素:本发明的...
上海东寰生物科技有限公司模型特点:造模时的致敏激发的时间间隔、剂量和频次不尽相同,通常获得的是嗜酸细胞性。若要研究其他表型的,需要调整剂量、改变流程或者添加LPS等试剂。COPD动物模型1.诱导模型实验动物:小鼠、豚鼠、大鼠造模试剂:烟雾、空气污染物及有害气体(PM2.5、臭氧、二氧化氮)、脂多糖、弹性蛋白酶获得方式:动物全身长时间放置在密闭容器内,暴露于烟雾、空气污染物或者有害气体;气管内滴注脂多糖或者弹性蛋白酶。收集研究疾病的生物学信息资料。江苏哪一家疾病动物模型建模随着大气污染、吸烟、工业经济发展导致的理化因子增多以及人口年龄老化等因素,呼吸系统疾病近年来有明显增长的趋势。由于呼吸疾病涉...
1、动物模型名称:角膜环钻致角膜损伤兔模型2、实验动物种属:新西兰兔3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:2~3月龄5、实验动物体重:1.8~2.5kg6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:角膜环钻致兔角膜机械性损伤。耳缘静脉注射戊巴比妥钠联合肌肉注射速眠新Ⅱ进行兔麻醉。环钻前先用2%硼酸溶液冲洗双眼,再滴0.25%氯霉素眼药水2滴消毒,以保持结膜清洁。开睑,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已灭菌的6mm角膜环钻分别在兔眼角膜上作环切,并滴入2滴氯霉素眼药水润洗,用显微眼镊、角膜上皮铲和精细眼剪小心去掉角膜损伤区域上皮,术毕,滴氯霉素眼药水2滴。2、检测标准:肉眼或裂隙灯下...
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意...
模型小鼠与对照小鼠BALF中各类细胞因子的表达水平对比6.2.2肺组织病理学检测HE染色检测:待造模完成后,腹腔麻醉小鼠后,开胸暴露胸腔:取左侧肺叶固定于10%甲醛溶液24h,常规脱水石蜡包埋,切片行HE染色,光镜下观察。结果显示:空白对照组小鼠肺泡结构清晰,肺泡大小均匀,气道黏膜上皮结构完整,纤毛排列整齐;模型对照组小鼠肺组织肺间隔增厚,支气管部分上皮细胞脱落,有淋巴细胞浸润。模型小鼠(右)相对于对照组小鼠肺部组织HE染色对比阿尔辛蓝—过碘酸雪夫氏染色(AB-PAS染色)检测:待造模完成后,腹腔麻醉小鼠后,开胸暴露胸腔:取左侧肺叶固定于10%甲醛溶液24h,常规脱水石蜡包埋脱蜡至水,切片行A...
是从侧面展示的压迫元件插入椎间孔的结构示意图。图3是术后大鼠四肢表现情况。图4是术后28天大鼠的双下肢缩足阈值变化曲线图。图5是重复经颅磁刺激对大鼠背根神经压迫模型的影响。具体实施方式以下通过具体的实施例对本发明的技术方案做进一步的描述。以下的实施例是对本发明的进一步说明,而不是限制本发明的范围。实施例1、模型的制备1、腹腔注射1%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮肤,俯卧位固定于动物手术台上,铺无菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左侧作一2-3cm纵行切口,切开皮肤,钝性分离椎旁肌至横突上方,暴露腰4椎间孔,腰5椎间孔(椎旁肌可用自制拉钩保持分离状...
上海东寰生物科技有限公司以便更准确地观察模型的实验结果并与人类疾病进行比较研究,有助于更方便、更有效地认识人类疾病的发展规律,研究防治措施。基本信息中文名动物模型概念人类疾病的动物模型指具有人类疾病模拟表现的动物意义可复制临床上一些疾病不常见目录1概念2意义3分类4设计原则5动物模型的意义和优越性6注意事项折叠编辑本段概念人类疾病的动物模型(animalmodelofhumandisease)是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物动物疾病模型的另一个富有成效的用途。青浦区疾病动物模型建模诱发性**模型的原理是利用外源性致*因素引起细胞遗传特性异常而呈现出异常生长和高增殖活性,形...
水杨酸性胃溃疡模型:大鼠禁食后水杨酸灌胃。4、结扎幽门法溃疡模型:大鼠麻醉后在无菌技术下结扎幽门。此模型适合做探索抗溃疡病药物研究和胃溃疡发病机制方面的研究。三、动物模型(animalmodelofhypertension)1、肾动脉狭窄性模型:在肾动脉上造成肾动脉狭窄。如果是单侧肾动脉狭窄,则在间隔10~12d后将另一侧肾摘除。手术几天后,血压开始升高,1~3个月后血压升至高峰,并可长期维持下去。2、肾外包扎性模型:肾外异物包扎,压迫肾实质,造成肾组织缺血,使肾素形成增加,血压上升。3、应激性模型:应激性大鼠模型常采用噪声和足底电击的复合刺激,每天2次,每次2h,约20d大鼠可形成生物医学研...
代谢组学的研究对象大都是相对分子量在1000以内的小分子物质,因此常用的血液样本在取样后,应小心操作,防止溶血,尽快分离出血清,分置于温环境下保存。由于用于病理实验的动物组织采集相对其他样品的采集,操作更繁琐,在处理过程中许多细节容易忽略,造成数据不完美(甚至不能用)。因此接下来将重点介绍组织样品采集的注意事项及其固定。组织样品采集注意事项组织应新鲜,操作时间尽可能短,否则细胞发生死后变化、自融及现象。是动物心脏还在跳动时采集,样本取出后在5分钟以内置于固定液内,避免长时间暴露在空气环境中。组织块尽量小而薄。组织块的厚度以不超过5mm为宜,较为理想的厚度为2mm左右,主要目的是使固定液...
2mg组、4mg组、6mg组lh水平均上升,同样,只有2mg组有明显升高(p<),如图3所示。表3表4②体重变化:(mean±sd),如图4所示:2mg组(连续注射7天)与空白组相比,大鼠体重***下降(p<,注射第2天开始)。3mg组(连续注射7天)与空白组相比,大鼠体重***下降(p<,注射第4天开始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg组(第1、8天注射)与空白组相比,大鼠体重分别在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg组体重在停止给药后4天与空白组无差异。③卵巢重量:如表5、图5所示,2mg、6mg组大鼠在经过顺铂注射后卵巢重量相比对照组,都有不同程度缩减,其中2...
诱发性**模型的原理是利用外源性致*因素引起细胞遗传特性异常而呈现出异常生长和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化学性、物理性及生物性致*物,而化学性致*物(chemicalcarcinogens)**常见,已确知的多达一千余种,用于诱发实验性**的种类亦很多,如苯并萨,申基胆菌、联苯胺、亚硝胺类、黄曲霉***类。各种致痒物的致*强度、致*谱等特性相差较大,同一种致*物经不同途径给药所致**部位或类型可有很大差异。有些化学性致*物具有明显的亲***或组织特性。因此,实验工作中应根据需要选用适当致*物和致*途径,并确定其他影响因素或实验条件。基本原理:利用外源性致*物引起细胞遗传特性改变,从而...
pcrmix:反应条件:pcr扩增产物的电泳鉴定结果如图3所示,从图3中可以看出,6、8、9号为pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr产物没有这两个扩增产物。(c)短链pcr反应,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能够扩增出344bp的产物,而野生型没有。pcr体系:反应条件:(2)f1代小鼠测序:通过pcr扩...
SPF级SD雄性大鼠,体重约200~220g。使用脂多糖(LPS)诱导建立急性肺损伤模型。将大鼠放入固定盒中,用酒精檫拭大鼠尾静脉后,按压住尾静脉1/3处,注射器进针后回抽有血后注入LPS溶液(溶于生理盐水,给药剂量10mg/kg),从而建立内性急性肺损伤大鼠模型。对照组的大鼠尾静脉注射等体积的生理盐水。5.2模型鉴定及后续检测:5.2.1肺损伤后的目视观察:如下图所示,在急性肺损伤模型小鼠中,肺部有多处明显渗血,后有肉眼可见肺部大面积出血渗出,可以直观的反映肺损伤程度。上海东寰疾病动物模型建模。普陀区面瘫疾病动物模型建模空白组卵巢内细胞形态完整,可见各级卵泡生长活跃,并大多数为原始卵泡,卵泡...
1、动物模型名称:固定制动致制动应激大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:采用固定制动方法。大鼠每天固定5~6小时进行制动应激,连续制动40天。2、检测标准:模型组大鼠体重增长速度较正常对照缓慢;旷场试验的结果显示,造模结束时与正常对照组比较,模型组大鼠的水平穿越格数、垂直运动次数、理毛时间均减少,**格停留时间、粪便粒数均增加;ELISA的结果显示,造模结束时与正常对照组比较,模型组大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明显增高。验性动物模型是指研究者通过使用物理的、化学的和生物...
大到动物死亡原因分析,小到灌胃操作耗时多长时间。建议反复总结出每天实验的优缺点。做任何一个操作之前,建议提前脑海中反复模拟,准备好相关工具和试剂,避免临用之际缺少药的,影响实验操作节奏和个人心情。笔者曾经灌胃操作的时候发现药物竟然忘带了,只好重新回实验室准备,那真叫一个郁闷。仔细记录每日实验过程无论是硕士还是博士,导师给我们上的堂课往往就是交代我们要详细记好实验记录,只要是和实验相关的,无论是照片,还是文字,必须要及时事无巨细地详细记录。并且要备份好每一份实验记录。我个人一般喜欢每天及时地记在「科研实验记录本」上面,然后拍照扫描成电子版储存在电脑和云端。时间规划首先,个人是不赞同每天2...
步骤3、pmsg处理c57bl/6雌性小鼠(6周龄,平均体重20g),46h后注射hcg,与雄性小鼠合笼交配,次日取受精卵进行显微注射,将步骤1的grna1、grna2、cas9蛋白以及线性化后的打靶载体一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠体内,产出小鼠,即f0代小鼠。上述步骤中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl,cas9蛋白购自newenglandbiolabs,货号为m0386m。步骤4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr扩增产物测序,鉴定是否为嵌合体。本发明用于f0代小鼠pirb基因pcr鉴定的特异性引物...
1、动物模型名称:卵清蛋白联合氢氧化铝致支气管豚鼠模型2、实验动物种属:豚鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:7~8周龄5、实验动物体重:250~350g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:卵清蛋白联合氢氧化铝诱导。每只豚鼠腹腔注射100µg卵清蛋白(OVA)+30mg氢氧化铝(Al(OH)3)致敏。次致敏后第5天再致敏1次,共2次。一次致敏后第21d开始采用超声雾化器喷雾10μgOVA/只,豚鼠置于一直径约50cm的有盖大圆盆中,给药过程中对盆内通O2。什么是疾病动物模型建模?宿迁咨询疾病动物模型建模 高脂饲料致高脂血症大鼠模型高脂饲料致高脂血症大鼠模型一、服务信息1、...