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安徽切片免疫组化检测

来源: 发布时间:2025年07月19日

免疫组化实验所用的抗体

免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。

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免疫组化常用的染色方法

根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法常用。 常见的免疫组化方法有哪些?安徽切片免疫组化检测

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免疫组化的优缺点

免疫组化的优点在于其高特异性和敏感性,能够在组织原位检测目标蛋白的表达和分布。此外,免疫组化可以与其他技术(如荧光显微镜、电子显微镜)结合,提供更丰富的信息。然而,免疫组化也存在一些缺点。首先,实验步骤复杂,需要优化多个参数(如一抗浓度、孵育时间)。其次,免疫组化的结果可能受到组织固定、抗原修复等因素的影响,导致假阳性或假阴性结果。此外,免疫组化的定量分析相对困难,通常只能进行半定量分析。 内蒙古病理免疫组化多少钱关于免疫组化,你想知道的都在这里!

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免疫组化的特点:

1)特异性强。免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时,才会出现交叉反应。

2)敏感性高。在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等敏感性不高的技术,那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP三步法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合,这样高敏感性的抗体抗原反应,使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。

3)定位准确、形态与功能相结合。该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。

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免疫组化的抗体选择

抗体是免疫组化实验成功的关键因素之一。选择合适的一抗需要考虑其特异性、灵敏度和适用性。特异性是指抗体只与目标蛋白结合,而不与其他蛋白发生交叉反应。灵敏度是指抗体能够检测低丰度的目标蛋白。适用性是指抗体适用于免疫组化实验,而不是其他实验(如Western blot)。此外,免疫组化实验中还需要考虑抗体的宿主物种、克隆性和浓度。免疫组化二抗的选择则需要考虑其与一抗的匹配性,以及是否带有显色或荧光标记。 免疫组化如何得到好的效果?

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免疫组化的抗原修复技术

抗原修复是免疫组化实验中的重要步骤,目的是暴露被固定过程掩盖的抗原表位。常用的抗原修复方法有热修复和酶消化。免疫组化热修复是通过加热(如微波或高压)使蛋白质变性,暴露抗原表位。常用的缓冲液有柠檬酸盐缓冲液和EDTA缓冲液。酶消化是通过蛋白酶(如胰蛋白酶)消化部分蛋白质,暴露抗原表位。免疫组化实验中不同的抗原修复方法适用于不同的抗原和抗体,需要根据免疫组化具体实验条件进行优化调整。 免疫组化protocol,详情请看英瀚斯生物官网。云南小鼠免疫组化要多少钱

如何做好免疫组化实验?安徽切片免疫组化检测

免疫组化技术应用于临床cancer良恶性的判断,英瀚斯生物为您介绍。对于反应性增生还是cancer性增生,可用免疫球蛋白(Ig)的轻链抗体检测B淋巴细胞增生的单克隆或多克隆性来区别。在滤泡反应性增生时,滤泡反应中心的细胞不表达细胞凋亡蛋白(bcl-2),bcl-2阴性;而在滤泡性淋巴瘤中,由于90%以上cancer性滤泡细胞有bcl-2的高表达,bcl-2阳性。而增殖细胞核抗原(PCNA),周期素(Cycling),核抗原(Ki-67)通过对cancer细胞增生的程度作出评价,从而提示增生细胞的良恶性。安徽切片免疫组化检测