裸鼠瘤模型是比较常见和常用的一种瘤动物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。
造模方法:
1、细胞是贴壁细胞,细胞培养在RPMI-1640培养基中细胞传代培养:当细胞长至80-90%时,去除培养基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培养基中和胰酶终止消化,将消化的细胞转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min。倒掉上清后,加入3ml培养基重悬细胞,1:3传代至培养皿中培养。
2、将长到培养皿80%-90%的细胞用胰酶消化下来,1000rpm离心,去除上清,加入完全培养基重悬细胞,将细胞分别种在6孔板中,每孔种1×105个细胞。
3、将细胞进行扩增培养,对细胞进行计数,将数量调整为2×107个细胞/ml。5、8周龄15只裸鼠适应性饲养7天后,随机分为3组,每组分别在右腋皮下接种2×106(100ul/只)细胞。接种约两周后出现结节,每周瘤大小两次。将裸鼠放入鼠笼中正常饲养4周后处死裸鼠,取裸鼠瘤拍照冻存。 实验动物模型后续检测。陕西实验动物模型外包公司
1.如何挑选实验动物模型公司?
答:可以的话实地看下,有自己的动物房可以的话,方便长期饲养。以及有配套的病理、分子检测平台更好,可以整体课题全包,省得动物运输麻烦。在英瀚斯生物做过,一站式的还不错。
答:看你做什么模型了,难度大的可能需要技术人员摸索条件,可以的话面谈参观实验室,甚至可以一起做个预实验。
答:看下动物房条件、卫生状况、空调。裸鼠的话需要IVC动物房。还有造模以及检测设备等。之前在南京英瀚斯做的,脑立体定位注射、水迷宫什么的设备都有。 陕西实验动物模型外包公司实验动物模型有哪些注意事项?
新一代AD(阿尔兹海默症)实验动物模型。尽管APP-Tg小鼠在过去十几年中范围广的被用于开发新的AD医疗策略,但这种小鼠的基因表型和AD患者的还是不同。而且上述的转基因动物模型在Aβ的生成、tau蛋白的过度磷酸化、神经纤维缠结等病理特征上和AD患者的差异也很大,无法理想地模拟AD患者。为了克服这些不希望出现的问题,研究人员构建了带有Swedish(KM670/671NL)、Beyreuther/Iberian(I716F)和Arctic突变等APP基因敲入(APP-KI)小鼠。APP-KI小鼠在没有过度表达APP的情况下生成Aβ42。随着年龄的增长,APP-KI小鼠大脑皮层和海马区出现过多的Aβ沉积。另一方面,与其他AD模型一样,该模型没有tau病理、NFTs、神经退行性变或大量神经元丢失可用于研究临床前AD。由于基因组编辑的新的进展,尤其是CRISPR/Cas技术,未来对转基因动物模型进行改良也值得期待。
一型糖尿病实验动物模型构建:
胰腺中的胰岛β细胞变性和坏死,分泌的胰岛素不足。
诱导方法一:STZ诱导糖尿病模型。注射前用0.05mol/L柠檬酸(pH4.5)配成2%的STZ溶液,新鲜使用。大鼠糖尿病STZ的剂量为40~75mg/kg(静脉注射或腹腔注射)。小鼠对此药敏感性较差,常用量为100~200mg/kg(静脉注射或腹腔注射)。
诱导方法二:四氧嘧啶糖尿病动物模型四氧嘧啶糖一次腹腔注射150~200mg/kg或静脉注射40~100mg/kg。用药后2~3小时后出现初期高糖,持续6~12小时后进入低血糖期,动物出现痉挛,24小时后一般为持续性高糖期,β细胞呈现不可逆性坏死,发生糖尿病。
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肝切除实验动物模型造模方法:大小鼠的肝叶形状和大小不同。因此,切除每个肺叶需要特别注意其独特的形状和血管位置。左外侧叶很容易切除,因为它有一个狭窄的包含门静脉和肝静脉的蒂,并且不与下腔静脉旁肝相连。然而,如果切除***于切除左侧肝外叶(30%切除模型),则必须在肝左门区分离左侧正中门静脉和伴随的肝动脉。
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由于正中叶在腔静脉周围有一个较宽的半基部,切除该叶需要在距腔静脉3mm的距离处进行几次夹持。单纯结扎肝叶的宽基部切除术有很高的风险导致腔静脉收缩和残端肝组织损伤,因为大量结扎容易导致剩余肝组织变形。由于右上叶位于腔静脉上,基部非常宽,并向背侧延伸至右腔静脉旁肝组织,因此技术上**难切除。切除需要小心地将夹钳放置在离腔静脉3毫米的距离处,并使用4或5条穿刺缝线,以避免损伤残端和腔静脉旁肝组织(图6)。由于约70%的下腔静脉旁组织由右上门静脉的一个分支供应,这种潜在的损伤可能对小的残肝非常重要。 实验动物模型的常见问题解答。陕西实验动物模型外包公司
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双转基因实验动物模型。利用基因打靶技术培育出的APP/PS-1双转基因鼠,在3月龄时出现学习记忆障碍、Aβ增多和形成SP,6月龄时即可出现严重的学习记忆力衰退、认知功能障碍,神经元变性和突触丢失等多种AD病理特性。对AD 病理特征Aβ和SP方面的研究主要采用APP/PS-1双转基因鼠。但其外源性基因表达不够稳定性、动物价格高。
APP/PS1/Tau 三转因模型。APP/PS1/Tau 三转基因小鼠模型是由APPSwe、PS1、TauP301L基因系突变建立的,首先在皮质区和出现Aβ异常沉积、SP 和NFTs 形成,随后海马区也逐渐出现 Aβ沉积、SP和NFTs,以及突触丢失、神经元变性AD临床病理表现。APP/PS1/Tau三转基因小鼠模型是目前与AD 病理特征接近的转基因动物模型,但其外源性基因表达稳定性较差、造模较困难且造价高。 陕西实验动物模型外包公司