HE染色常见问题:切片染色不均匀,有片状的弱着**存在答:(1)取材时组织太厚,固定过久,导致深部组织固定不佳,而表浅组织过度固定,而透明、脱水、浸蜡均是如此,这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。(2)制片过程有问题,切片厚薄不一,或者有刀痕,或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一,一般都是在制片时,刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳(一般比较好角度为5°)(3)脱蜡前未烘烤,脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久,导致脱蜡不彻底。(4)染色液过少,着色不均匀;或染色时部分组织干涸而另一部分湿润,这样会导致组织吸附染料的能力不一。(5)分化不当。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。肾脏组织HE染色如何观察。湖南专业的HE染色分析
HE染色显微镜下见切片内有大量水珠分析以及应对原因:切片经梯度乙醇处理后没有完全脱水,导致二甲苯透明中性树胶封固后残留大量水分。对策:移去盖玻片,用二甲苯溶解封固剂如中性树胶。将切片置入新鲜的无水乙醇中,待切片重新脱水完全后,用新二甲苯透明,中性树胶封固。所有用于脱水和透明的液体,在使用一定时间以后,应即时更换。光镜下切片某些区域难以聚焦分析以及应对原因:盖玻片上可能有封固切片的封固剂。对策:移去盖玻片,重新用干净的盖玻片封片湖南专业的HE染色分析冰冻切片是否可以做HE染色?
HE染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
HE染色:在组织病理学中,苏木素-伊红染色是一种日常使用比较普遍的常规染色方法。常规苏木素染色的对比染色是用伊红,也有采用焰红,因为焰红比伊红色泽更鲜明,还有采用橘黄G,比布里希猩红,波尔多红等作为对比染色。伊红是比较常用的胞质染料,本身溶于醇而不溶于水,为砖红色粉末状或酱红色结晶。配方:伊红Y(水溶)0.5-1g,蒸馏水99ml。如果取用伊红Y(醇溶性)应当溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊红液中加入0.5ml冰醋酸,可以加速其染色过程,使得胞质的色泽更加艳丽。结果是细胞核呈蓝色,胞质、肌肉、结缔组织、红细胞和嗜伊红颗粒呈不同程度的红色。钙盐和各种微生物也可染成蓝色或紫蓝色。HE染色结果如何分析和读片?
HE染色等常规染色,组化或是荧光优先推荐做石蜡切片。原因:石蜡切片对组织的形态保存比冰冻切片好,并且对抗原基本无影响。脂质染色(油红O染**odipy染色,尼罗红染色)必须做冰冻切片,不能做石蜡切片。以下染色必须要新鲜或冷冻组织冰冻切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,胆固醇染色。如果标本已经放在-80°冰箱冷冻了之后又想要做石蜡切片,将标本取出来千万不要解冻直接放于固定液内固定(在固定液内边解冻边固定)。组织形态结构保存完好顺序:新鲜组织立即投入固定液内固定石蜡切片>组织-80°冷冻后投入固定液内固定石蜡切片>新鲜组织立即投入固定液内固定冰冻切片>组织-80°冷冻后直接冰冻切片。心脏组织HE染色如何观察。湖南专业的HE染色分析
比较基础的病理染色HE染色。湖南专业的HE染色分析
HE染色在**染色中的应用,小细胞肺*是肺*中分化程度比较低、恶性程度比较高的一种恶性**,生长迅速,转移较早,五年存活率*为1%-2%,预后非常差。其小细胞肺***细胞HE染色的特征,主要表现为组织结构,包括巢状、小梁状、实性片状,常有菊形团形成,*巢周围的瘤细胞呈栅栏状排列,*细胞较小,一般小于三个静止的淋巴细胞,呈圆形、卵圆形或短梭形,胞质稀少,胞界不清,核染色质呈细颗粒状,核仁缺乏或不明显,核分裂象每十个高倍视野大于十一个,常见大片状坏死。湖南专业的HE染色分析