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转化后为什么要温育1小时，为什么加入的是无抗培养基？（1）温育就是让感受态恢复一下状态，以及一些相关抗性基因的表达。毕竟从-70℃环境中取出，需一段时间适应才可转化。南京英瀚斯生物科技有限公司，医学科研的增强子。一站式医学科研实验外包服务平台。专业为您承担该项检测业务，数据真实无重复，报告内容详尽。欢迎来电垂询。细胞实验外包。（2）因为细胞比较脆弱，加无抗培养基是为了让细胞生长，促使在转化过程中获得的新表型得到表达。南京英瀚斯生物科技有限公司。随着细胞实验外包技术的发展,细胞实验外包技术的应用领域也越来越广。海南比较好的细胞实验外包选择

RIP是研究体内蛋白与RNA互作的重要技术。该技术先用甲醛等试剂交联细胞内的“蛋白-RNA”互作复合物，裂解细胞后，用靶蛋白特异的抗体（或标签抗体）做免疫沉淀，获得“靶蛋白-RNA”互作复合物，去交联分离其中的RNA；RIP可以分提核浆的RNA-蛋白质复合物吗？南京英瀚斯生物科技有限公司，医学科研的增强子。一站式医学科研外包服务平台。专业为您承担细胞实验外包，数据真实无重复，报告内容详尽。欢迎来电垂询。理论上，可以采用能分别抽提核浆蛋白的蛋白抽提kit先分离样本，再进行RIP实验。但需要特别注意的是所用kit中的reagent不能有RNase和DNase，以及要能与下游的抗体beads孵育兼容。海南比较好的细胞实验外包选择细胞实验外包种类非常多，应用范围也有很大的不同。

做RIP的时候和beads孵育的lysate的浓度如何确定？有些动物的文献提到用细胞板数细胞个数，想知道如果用蛋白浓度的话，大概在什么数量范围的蛋白总量对应50ulBEADS?细胞实验外包。50ulbeads对应的是一个reaction，而我们推荐一个reaction是100ul裂解上清（2×107cells加入100ulRIPlysisbuffer得到），所以只需要在裂解前计数一下，并按括号中的比例加入裂解buffer，后续100ul裂解上清就是一个reaction的蛋白用量。不建议通过裂解后测蛋白浓度的方法进行配比。

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简述克隆某一原核生物基因片段一般操作步骤？克隆某一原核生物基因片段是可用PCR技术对基因进行大量扩增，首先准备好实验材料大体为：需扩增的模板DNA、DNA聚合酶、dNTP混合液、PCR缓冲液、引物等、其过程大体分为3个步骤：第一步：变性：通过加热使DNA模板双螺旋链解离为单链，第二步：退火：当温度突然降低时。由于模板DNA结构复杂难再互补，而引物建构简单且数量巨多易于模板DNA互补杂交从而使引物结合到模板上DNA上，南京英瀚斯生物科技有限公司，医学科研的增强子。一站式医学科研实验外包服务平台。专业为您承担该项检测业务，数据真实无重复，报告内容详尽。欢迎来电垂询。细胞实验外包。第三步：延伸：在DNA聚合酶和四种底物及镁离子存在条件下DNA连开始延伸。以上3个步骤为一个循环，数小时后即可得到大量扩增的目的片段。海南比较好的细胞实验外包选择