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来源: 发布时间:2025年09月20日

利用 OCT 包埋剂制作的冷冻切片在染色过程中有注意事项。由于 OCT 包埋剂是水溶性的,在进行染色前的漂洗步骤时,需将载玻片倾斜 45°,用滴管沿载玻片边缘缓慢滴加 PBS 缓冲液,让液体自然流过组织切片,控制好水流速度和时间,一般漂洗 3 次,每次 3 分钟,避免水流过大将组织切片冲掉。同时,染色试剂的选择也很重要,要提前查阅试剂说明书,确保染色试剂不会与 OCT 包埋剂发生化学反应,如某些含重金属的染色剂可能会与包埋剂成分结合产生沉淀,影响染色结果的判读,染色后要及时用中性树胶进行封片处理,防止切片干燥褪色。OCT包埋剂适配多种眼科组织类型。北京国产OCT包埋剂电话多少

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冷冻切片后残留的 OCT 包埋剂处理方法很重要。切片后若有少量包埋剂残留,可在染色前用 PBS 缓冲液或生理盐水轻轻漂洗去除,漂洗时用移液器吸取液体,沿载玻片边缘缓慢滴加,让液体自然流过切片表面,避免直接冲击组织,通常漂洗 2-3 次即可彻底去除残留的包埋剂,避免其影响染色剂与组织的结合,进而影响染色效果。对于附着在切片刀上的包埋剂,可用软布蘸取 75% 酒精轻轻擦拭干净,酒精既能溶解残留的包埋剂,又能起到消毒作用,保持切片刀的清洁锋利,以便下次使用时获得更好的切片质量。北京国产OCT包埋剂电话多少OCT包埋在低温下快速固定眼部组织。

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OCT 包埋剂与组织的黏附性是影响包埋效果的关键因素。良好的黏附性能保证组织在切片过程中不脱落,尤其是对于小体积组织如小鼠垂体、大鼠肾上腺等至关重要。为提高黏附性,可在包埋前用滤纸轻轻吸干组织表面的水分和血液,避免水分在组织与包埋剂之间形成隔离层,影响两者结合;同时在加入包埋剂时要缓慢操作,让包埋剂沿包埋模壁缓慢流入,逐渐覆盖组织,使包埋剂充分浸润组织的每个缝隙,增强两者的黏附力,必要时可在组织下方先铺一层薄薄的包埋剂,待其半凝固后再放置组织,进一步提高结合度。

使用 OCT 包埋剂进行包埋时,先将放在蔗糖溶液中的组织块取出,放入 20gL-1 蔗糖与 OCT 包埋剂 1:1 体积比例混合液中,室温浸泡 2h。接着移入 OCT 包埋剂中室温浸泡 4h,再更换新的 OCT 包埋剂,室温浸泡 6h。***将标本置于托物台,用恒冷箱切片机在约 - 22℃下切片,片厚 10μm,贴于预处理的载玻片上,放入 - 20℃冰箱保存。整个过程中,蔗糖溶液的预处理能帮助组织脱水,增强 OCT 包埋剂与组织的结合力,而多次更换包埋剂可避免组织表面残留的蔗糖影响包埋效果,确保切片时组织与包埋剂同步切割。载玻片的预处理通常采用多聚赖氨酸包被,能增强切片与载玻片的粘附力,防止后续染色过程中切片脱落,保证实验操作的连贯性。眼科组织研究依赖OCT包埋切片的高质量。

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在制作连续切片时,OCT 包埋剂的作用尤为突出。连续切片需要保证每一张切片的完整性和连贯性,如研究肾小管的连续性、神经纤维的走行等,OCT 包埋剂能通过低温凝固形成与组织紧密结合的整体结构,使组织在切片过程中不易断裂,便于获得一系列连续的切片,每张切片之间的位置偏差可控制在 10μm 以内。研究人员可将连续切片依次进行不同染色或标记,通过图像拼接技术重建组织的三维结构,观察病变从早期到晚期的发展过程,在形态学研究中具有重要意义,为理解组织***的结构与功能关系提供了直观依据。OCT包埋剂减少眼科组织切片制备误差。北京国产OCT包埋剂电话多少

眼科实验常用OCT包埋处理组织样本。北京国产OCT包埋剂电话多少

解决 OCT 包埋剂切片时出现冰晶的问题需从多方面入手。冰晶的形成主要是由于组织冷冻速度过慢,导致细胞外水分缓慢结冰并刺穿细胞,或环境湿度较高使包埋剂吸收水分所致。可通过提高冷冻速度,如将包埋模放在干冰与乙醇的混合液中(温度约 - 78℃)进行快速冷冻,或使用液氮喷雾对包埋块表面进行瞬间降温;同时降低操作环境湿度,可在冷冻切片机旁放置除湿袋,保持相对湿度在 40% 以下;此外,在包埋前用滤纸彻底吸干组织表面的水分,避免水分进入包埋剂,这些方法能有效减少冰晶的形成,使切片中的细胞结构更清晰,提高实验观察的准确性。北京国产OCT包埋剂电话多少

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