培养基制备的基本方法和注意事项:1、培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。2、培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,好终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。3、培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,好好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方面军做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。全自动培养基制备仪主要特点:温度探头测量培养基实际温度。培养基制备器售后服务
在制备培养基时,通常要考虑以下因素:(1)pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好。尽管各细胞株之间细胞生长*pH值变化很小,但一些正常的成纤维细胞系以pH=7.4~7.7,转化细胞以pH=7.0~7.4更合适。据报道,上皮细胞以pH=5.5合适。为确定*佳pH值,做一个简单的生长实验或特殊功能分析酚红常用作指示剂,pH=7.4呈红色,pH=7.0变橙色,pH=6.5变黄色,而pH=7.6呈红色中略带蓝色,pH=7.8呈紫色。由于对颜色的观察有很大的主观性,因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样,放在与制备培养基相同的瓶子中。(2)缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用,因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。(3)渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围,一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基,可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误差。中国澳门培养基制备器多少钱适用于微生物学、制药及食品检测领域培养基制备。 精确pH值调控功能确保培养基化学性质稳定性。
固体斜面培养基配制:培养基各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。较好使用不锈钢莴加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如为琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,较后必须加以补足。培养基pH的初步调正:因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,培养基各成分完全溶解后,应进行PH的初步调正。
湿热灭菌:湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行,高压灭菌一般采用121℃±3℃灭菌15min,具体培养基按食品微生物学检验标准中的规定进行灭菌。培养基体积不应超过1000mL,否则灭菌时可能会造成过度加热。所有的操作应按照标准或使用说明的规定进行。灭菌效果的控制是关键问题。加热后采用适当的方式冷却,以防加热过度。这对于大容量和敏感培养基十分重要,例如含有煌绿的培养基。过滤除菌:过滤除菌可在真空或加压的条件下进行。使用孔径为0.2μm的无菌设备和滤膜。消毒过滤设备的各个部分或使用预先消毒的设备。一些滤膜上附着有蛋白质或其他物质(如物品),为了达到有效过滤,应事先将滤膜用无菌水润湿。**电加热**(带温控的磁力搅拌器):建议选择功率可调、加热均匀的型号。
购买的培养基到货后,应有专人做好接受和验收工作,应仔细核对生产企业提供的资料、培养基名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否符合要求。每批培养基到货后都应对培养基的质量进行检测,满足检测方法规定的要求后方可投入使用。培养基的储存:干粉培养基应保存在阴凉干燥处,要避免阳光直射;未开瓶的培养基在室温下的保存期限以厂家提供为准,开瓶后的干粉培养基易吸湿,应注意防潮并尽快用完。应定期对储存中的培养基进行常规检查,如容器密闭性复查、开封日期、内容物的感官检查,如果培养基发生结块、颜色异常和其他变质迹象就不能再使用。培养基中的维生素、生长因子等易受高温破坏,高效加热缩短热暴露时间,减少降解。河南培养基制备器安装调试
理想设备应在10~15分钟内达到121°C(如高压灭菌锅)或快速溶解琼脂(如带搅拌的培养基制备仪)。培养基制备器售后服务
血清培养基主要问题:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难。血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制。对大多数细胞,在体内状态,血清不是它们接触的生理学液体,只是在损伤愈合以及血液凝固过程中才接触血清,因此使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态,血清可能促进某些细胞的生长(成纤维细胞)同时抑制另一类细胞生长(表皮细胞)。培养基制备器售后服务