广东琼脂培养基制备器

培养基制备技术：一、玻璃器皿的清洗：在制备培养基的过程中，首先要使用一些玻璃器皿，如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。这些器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。有的还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才能使用。1、新购的玻璃器皿：除去包装沾染的污垢后，先用热肥皂水刷洗，流水冲净，再浸泡于１～２％的工业盐酸中数小时，使游离的碱性物质除去，再以流水冲净。对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入浓盐酸少许，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上将水空干，即可使用。2、用过的玻璃器皿：凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用后可随时冲洗，吸取过化学试剂的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，将污垢除去，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。培养基制备器全自动控制程序，确保内部温度均一。广东琼脂培养基制备器

培养基配置原则：控制pH条件，培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的很适pH条件各不相同，一般来讲，细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是，在微生物生长繁殖和代谢过程中，由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累，会导致培养基pH发生变化，若不对培养基pH条件进行控制，往往导致微生物生长速度下降或（和）代谢产物产量下降。因此，为了维持培养基pH的相对恒定，通常在培养基中加入pH缓冲剂，常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐（如KH2PO4和K2HPO4）组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性，KH2PO4溶液呈酸性，两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。广东琼脂培养基制备器培养基制备器灭菌锅关闭放气阀前，将锅内气体排干净。

根据培养基的用途来区分，可分为选择培养基、增殖培养基、鉴别培养基等。a.选择培养基在培养基中加入某种物质以杀死或压抑不需要的菌种生长的培养基，称之为选择培养基。如链霉素、氯霉素等压抑原核微生物的生长；而制霉菌素、灰黄霉素等能压抑真核微生物的生长；结晶紫能压抑革兰氏阳性细菌的生长等。b.增殖培养基在自然界中，不同种的微生物常生活在一起，为了分离我们所需要的微生物，在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基，这种培养基常用于菌种筛选和选择增菌中。在某种程度上讲，增殖培养基也是一种选择培养基。c.鉴别培养基在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。

培养基中血清的质量标准：血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求：牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。对细胞有良好的支持繁殖作用。培养基制备器一键选择培养皿类型;整合数据库，预设培养皿尺寸选择程序。

微生物检验培养基制备的要点：培养基分装，准备好的中.海培养基根据用途不同分为烧瓶、试管等容器，分装试管量大采用自动分液器，分装试管量小，可以用漏斗分液。分液量不超过容器体积的三分之二。三角瓶不要超过体积的二分之一；琼脂斜面不要超过试管长度的五分之一。灭菌后斜面应为培养基量的三分之一，底层应为培养基量的三分之二；半固态琼脂的体积为三分之一；用于接种或保护细菌的高级琼脂，分装试管长度的三分之一和四分之一，接种厌氧菌的量应达到三分之二；琼脂平板90毫米内径13~15毫升，内径70毫米8~10毫升。如果琼脂平板表面较水，可将平板倒置，置于37℃培养箱中三十分钟，晾干后使用。每批培养基分装在二十毫升左右的小玻璃瓶中，与该批培养基同时灭菌，在以确定这批培养基的很终pH值。培养基的灭菌：一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。广东琼脂培养基制备器

培养基制备器杀菌剂可从此口加入，也可用注射器从硅酮膜注入。广东琼脂培养基制备器

孢子培养基：孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基，对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长，产生较多较好的孢子，并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对孢子培养基的基本配制要求是：靠前，营养不要太丰富（特别是有机氮源），否则不易产孢子。如灰色链霉在葡萄糖-硝酸盐-其它盐类的培养基上都能很好地生长和产孢子，但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后，就只长菌丝而不长孢子。第二，所用无机盐的浓度要适量，不然也会影响孢子量和孢子颜色。第三，要注意孢子培养基的pH和湿度。生产上常用的孢子培养基有：麸皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制成的琼脂斜面培养基。大米和小米常用作霉菌孢子培养基，因为它们含氮量少，疏松、表面积大，所以是较好孢子培养基。大米培养基的水分需控制在21%－50%，而曲房空气湿度需控制在90%－靠前。广东琼脂培养基制备器