步骤3、pmsg处理c57bl/6雌性小鼠(6周龄,平均体重20g),46h后注射hcg,与雄性小鼠合笼交配,次日取受精卵进行显微注射,将步骤1的grna1、grna2、cas9蛋白以及线性化后的打靶载体一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠体内,产出小鼠,即f0代小鼠。上述步骤中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl,cas9蛋白购自newenglandbiolabs,货号为m0386m。步骤4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr扩增产物测序,鉴定是否为嵌合体。本发明用于f0代小鼠pirb基因pcr鉴定的特异性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1对应的扩增产物大小为,primers2对应的扩增产物为。用于f0代小鼠测序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。能够准确模拟人相关特定功能与疾病特征。镇江疾病动物模型建模厂家
pirb在轴突生长锥表达,位于富含肌动蛋白的前缘和synapsin免疫阳性的囊泡中,在神经元突起的表达呈点状分布。文献表明,pirb表达随年龄增加,特别是在老龄认知损伤的小鼠海马中,pirb能够抑制轴突再生和突触可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚体对海马长时程增强的破坏作用需要pirb的参与,在ad转基因模型中,pirb不仅参与成年小鼠记忆缺失,而且介导幼年小鼠视皮层突触可塑性的丢失。这些研究提示我们,pirb参与突触可塑性,抑制pirb可能对ad起到***效应。但是在cns,pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明,因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制剂,或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响,后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低,使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题,我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠,将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点,为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素:本发明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠动物模型。静安区Balbc裸鼠疾病动物模型建模临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来。
人乳腺*裸鼠模型:1、实验方法:**细胞移植法、**组织块移植法。a.**细胞移植:**细胞在二氧化碳培养箱培养至足够数量。取对数生长期的**细胞,用0.25%胰酶消化,用不完全培养液配成浓度不低于1×107个/mL的细胞悬液,于小鼠乳腺脂肪垫注射0.2mL细胞悬液,注意每次注射前需混匀细胞悬液。b.**组织块移植:**接种于动物长至1cm时,取新鲜的**组织块,在不完全培养液中漂洗,切取生长良好、鱼肉装的瘤组织,将其剪切成约1.5mm直径的小**块。将动物接种部位消毒,剪一小口,将小**块经这一小口接种到小鼠乳腺脂肪垫,如切口较大需要缝合切口。
1、动物模型名称:角膜环钻致角膜损伤兔模型2、实验动物种属:新西兰兔3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:2~3月龄5、实验动物体重:1.8~2.5kg6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:角膜环钻致兔角膜机械性损伤。耳缘静脉注射戊巴比妥钠联合肌肉注射速眠新Ⅱ进行兔麻醉。环钻前先用2%硼酸溶液冲洗双眼,再滴0.25%氯霉素眼药水2滴消毒,以保持结膜清洁。开睑,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已灭菌的6mm角膜环钻分别在兔眼角膜上作环切,并滴入2滴氯霉素眼药水润洗,用显微眼镊、角膜上皮铲和精细眼剪小心去掉角膜损伤区域上皮,术毕,滴氯霉素眼药水2滴。2、检测标准:肉眼或裂隙灯下观察到角膜有损伤。动物模型作为人类疾病的缩影。
引起组织坏死,从而导致卵巢功能早衰。技术实现要素:针对上述现有技术,本发明提供了一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本发明根据“顺铂可诱导卵巢细胞凋亡,引起组织坏死,从而导致卵巢功能早衰”这一原理,使用不同浓度及不同方法建立了化疗性损伤卵巢早衰动物模型,并对比各种方法间的优劣性,筛选出顺铂比较好的浓度及给药时间,为筛选顺铂导致的卵巢早衰动物模型比较好剂量提供了一种操作简单,成功率高,结果可靠的实验方法。本发明是通过以下技术方案实现的:一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法:将剂量为按体重一日2~3mg/kg的顺铂施用于大鼠,施用方式为腹腔注射,施用方法:连续施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。或:将剂量为按体重4~6mg/kg的顺铂施用于大鼠,施用方式为腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。进一步地,可将顺铂溶于%氯化钠溶液配置成顺铂注射液,然后注射。所述顺铂,可市场常规购买得到,比如齐鲁制药公司生产的顺铂。进一步地,注射期间每天称量大鼠体重,注射后每周称量2次;末次注射后15天,麻醉取血检测***水平,取卵巢检测对比卵巢重量。构建人源移植瘤模型需要合适的免疫缺陷小鼠想知道如何选择?徐汇区哪一家疾病动物模型建模
早期阶段科学假说与疾病潜在药物治疗效果评价始于小鼠疾病模型构建及其实验室研究。镇江疾病动物模型建模厂家
1、动物模型名称:橄榄油联合酒精致肝硬化门脉高压大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:5周 5、实验动物体重:150g-180g6、实验动物环境:SPF级 1、实验方法:橄榄油联合酒精诱导。按0.3mL/100g体重,背颈部皮下注射50%CCl4的橄榄油溶液,***注射量加倍(6mL/kg体重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周为10%酒精溶液喂养代替饮水,4周后改为30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g体重,3次/周)。继续正常饲养1个月。实验结束测量门静脉血流量(PBF)和肠系膜上动脉血流量(SMABF)。处死,取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准:门静脉及肠系膜上动脉血流量情况与正常对照组比较均增加,差异有统计学意义肝组织病理可见肝硬化病理改变。镇江疾病动物模型建模厂家
上海东寰生物科技有限公司是一家经营范围为:从事生物科技领域内的技术开发、技术转让、技术咨询、技术服务。化工产品(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用物品、易制毒化学品)的销售。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】。的公司,是一家集研发、设计、生产和销售为一体的专业化公司。公司自创立以来,投身于原代细胞,细胞增殖与凋亡,细胞检测试剂盒,动物疾病模型,是商务服务的主力军。上海东寰生物始终以本分踏实的精神和必胜的信念,影响并带动团队取得成功。上海东寰生物始终关注商务服务行业。满足市场需求,提高产品价值,是我们前行的力量。