镇江品牌疾病动物模型建模

    本能发明的另一目的是公开了如上所述的方法制备的鼠慢性背根神经压迫模型的用途是将该模型用于腰椎间盘突出***方法研究和/或影像学检测研究。进一步地，该模型用于与磁性相关的***和/或检测方面的研究，比如经颅磁刺激和核磁共振。本发明利用压迫元件插入腰椎椎间孔，模拟腰椎间盘突出后突出物对神经根的持续慢性的机械压迫症状，有益效果有：1.应用机械压迫神经根模拟腰椎间盘突出病理，症状的病因学与临床情况接近；2.相关的疼痛行为类似于特定的慢性疼痛症状，且易于客观测量；3.制备方法简单，对动物损伤小，稳定性好，成功率高；4.造模关键材料压迫元件不受磁场干扰，无在磁场作用下移位风险，有利于后续对动物进行磁疗，经颅磁刺激等***及核磁共振等检查；5.造模关键材料压迫元件不影响磁场，不会对***仪器和核磁共振等仪器产生不良影响；6.此方法获得的模型由于采用了h62黄铜或聚乳酸材料制备的压迫元件，使得研究方法与检测方法不受磁场作用限制，丰富了腰椎间盘突出临床前研究的***方法及影像学检测，为临床研究提供理论依据。以下将结合附图对本发明作进一步说明，以充分说明本发明的目的、技术特征和技术效果。附图说明图1是压迫元件插入椎间孔的结构示意图。动物模型作为人类疾病的缩影。镇江品牌疾病动物模型建模

1、动物模型名称：胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：5周5、实验动物体重：200~220g6、实验动物环境：SPF级 1、实验方法：用胆管结扎法。大鼠按10mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉，腹部皮肤消毒，无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔，分离出胆管，在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准：肝脏病理切片镜下小胆管伴纤维组织增生积分按程度为0-3分：0分：无明显病变；1分：呈局灶性分布，受累面积在30%以下者；2分：呈多灶性分布，受累面积在30%-70%之间者；3分：呈弥漫性分布，受累面积在70%以上者。统计分析：每份标本在低倍视野(10×10)下依次选取左上、右上、左下、右下、中间5个视野（共1.5mm2）进行观察，测定并计算视野内小胆管伴纤维组织增生总面积。黄浦区泌尿疾病动物模型建模生物医学研究的进展常常依赖于使用动物模型作为实验假说和临床假说二者的试验基础。

1、动物模型名称：酒精诱导的肝硬化大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：5周5、实验动物体重：150g-160g6、实验动物环境：SPF级。1、实验方法：用酒精诱导法。大鼠每天按10mL/kg体重灌服酒精混合物（酒精：吡唑：玉米油＝10mL：25mg：2mL）造模，每周2次按0.3mL/kg剂量腹腔注射给予CCl4:橄榄油＝1：3，连续灌服60天。解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准：肝组织可见肝硬化病理改变（S1级~S4级）。

球囊拉伤致高脂血症动脉硬化兔模型，实验动物种属：新西兰兔，实验动物环境：SPF级 1、实验方法：用球囊拉伤诱导法。采用3%戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉，经右股浅动脉，将3.5F球囊扩张导管插至腹主动脉20cm，球囊充液膨胀至2个大气压缓慢拉出，反复3次。球囊拉伤手术后，动物喂以高脂饲料，连续9周，每天给料两次，自由饮水。实验结束后取腹主动脉斑块进行组织病理学检查。2、检测标准：腹主动脉斑块病理镜下可见腹主***程度的改变。大鼠疾病建模请找上海东寰。

    得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地，l型棒的直径为，***端长3-5mm，第二端长1-3mm。具体地，根据大鼠体重选择l型棒的直径大小：当大鼠体重在200g到不足220g范围时，采用直径为；当大鼠体重在220g到不足250g范围时，采用直径为；当大鼠体重在250g到不足300g范围时，采用直径为；当大鼠体重在300g到350g范围时，采用直径为。在另一个具体实施方式中，压迫元件为u型棒；步骤三具体为：将u型棒的***端和第二端分别插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中，得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地，压迫元件采用不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料制备而成。在一个具体实施方式中，压迫元件采用黄铜和锌的混合物制备而成。具体地，混合物为h62黄铜，即含铜量为％～％，余量为锌含量的黄铜。而铜、锌皆属于非铁磁性物质。在另一个具体实施方式中，压迫元件采用聚乳酸(polylactic，pla)制备而成。pla是一种无毒无刺激的合成高分子材料，其原料是乳酸，不含任何金属。h62黄铜棒或pla棒在体内，即不会受磁疗、电疗引起的磁场、电场干扰，也不会对磁疗、电疗仪器及磁共振仪器产生不良影响。便于研究者按实验目的需要随时采取各种样品。镇江面瘫疾病动物模型建模

通过小鼠疾病模型的构建有助于我们深入揭示潜在致病基因作用机制。镇江品牌疾病动物模型建模

    具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对发明作进一步阐述。本发明构建了pirb基因敲入的小鼠动物模型，将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内。具体来说，构建一个cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒，将其克隆进入rosa26基因的内含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的七号染色体。本发明pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法，具体按照以下步骤具体实施:步骤1、根据小鼠rosa26基因(genebank：))序列，利用cas-desigher软件在1号内含子设计grna靶序列，并搜索小鼠dbm-db基因组数据库基因，采用crispr脱靶效应软件cas-offinder检测潜在的脱靶位点：**终选取两个grna，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如：seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg将grna1和grna2分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构；步骤2、利用c57bl/6小鼠文库bac克隆，通过pcr扩增获得pirb基因cds的同源臂，采用in-fusion方法构建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的质粒打靶载体，通过酶切、pcr及测序对打靶质粒载体进行验证，图1为构建好的pirb基因打靶载体的示意图。镇江品牌疾病动物模型建模

上海东寰生物科技有限公司是一家经营范围为：从事生物科技领域内的技术开发、技术转让、技术咨询、技术服务。化工产品（除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用物品、易制毒化学品）的销售。【依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动】。的公司，致力于发展为创新务实、诚实可信的企业。上海东寰生物拥有一支经验丰富、技术创新的专业研发团队，以高度的专注和执着为客户提供原代细胞，细胞增殖与凋亡，细胞检测试剂盒，动物疾病模型。上海东寰生物不断开拓创新，追求出色，以技术为先导，以产品为平台，以应用为重点，以服务为保证，不断为客户创造更高价值，提供更优服务。上海东寰生物始终关注商务服务市场，以敏锐的市场洞察力，实现与客户的成长共赢。