pirb在轴突生长锥表达,位于富含肌动蛋白的前缘和synapsin免疫阳性的囊泡中,在神经元突起的表达呈点状分布。文献表明,pirb表达随年龄增加,特别是在老龄认知损伤的小鼠海马中,pirb能够抑制轴突再生和突触可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚体对海马长时程增强的破坏作用需要pirb的参与,在ad转基因模型中,pirb不仅参与成年小鼠记忆缺失,而且介导幼年小鼠视皮层突触可塑性的丢失。这些研究提示我们,pirb参与突触可塑性,抑制pirb可能对ad起到***效应。但是在cns,pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明,因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制剂,或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响,后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低,使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题,我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠,将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点,为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素:本发明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠动物模型。哪里可以做动物模型?南京视觉疾病动物模型建模
球囊拉伤致高脂血症动脉硬化兔模型,实验动物种属:新西兰兔,实验动物环境:SPF级1、实验方法:用球囊拉伤诱导法。采用3%戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉,经右股浅动脉,将3.5F球囊扩张导管插至腹主动脉20cm,球囊充液膨胀至2个大气压缓慢拉出,反复3次。球囊拉伤手术后,动物喂以高脂饲料,连续9周,每天给料两次,自由饮水。实验结束后取腹主动脉斑块进行组织病理学检查。2、检测标准:腹主动脉斑块病理镜下可见腹主***程度的改变。嘉定区阿尔兹海默症疾病动物模型建模上海东寰可以做疾病动物模型建模。
r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步骤4、鉴定为pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周龄、雌性小鼠6周龄分别与野生型异性小鼠交配获得f1代杂合子小鼠,图2为本发明f1代杂合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程图,小鼠出生后20天进行pcr鉴定,若有阳性小鼠出生,则表示转基因已经整合到生殖细胞。(1)通过pcr方法对获得的f1代小鼠进行基因型的鉴定:(a)dna的提取:方法1:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()来获得高纯度的基因组dna。步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入离心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步骤b.将步骤a离心管内于56℃孵育过夜。步骤c.过夜后12000rpm离心2min去除杂质。步骤d.加入200μlbuffergb和200μl无水乙醇,充分混匀。步骤e.将吸附柱放在收集管上,将步骤d得到的样品加到吸附柱里,12000rpm离心2min,弃掉收集管中液体。步骤f.弃去液体后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm离心1min,弃掉收集管中液体。步骤g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm离心1min。弃掉收集管中液体。注意:bufferwb需要与100%乙醇预混,沿管壁加入bufferwb冲走残余的盐。步骤h.重复步骤g一次。
葡聚糖硫酸钠(DSS)致溃疡性结肠炎小鼠模型:1、动物模型名称:葡聚糖硫酸钠(DSS)致溃疡性结肠炎小鼠模型2、实验动物种属:BALB/c小鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年鼠5、实验动物体重:18g-22g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:实验前小鼠禁食不禁水24h,24小时后提起鼠尾将其悬空,使挣扎以排出大肠远端的大便。小鼠自由饮用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液,连续14天。进行疾病活动指数(DAI)的评估、取结肠进行组织病理学检查。2、检测标准:DAI评分明显升高,与对照组比较具统计学意义。结肠病理镜检可见结肠炎症、病变深度、隐窝破坏、溃疡病变可以严格控制实验条件,增强实验材料的可比性。
1、动物模型名称:皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:160-200g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠,根据体重腹部备皮,然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯,将纱布条浸入热水中,待水温恒定于99℃时,取出纱布,立即平铺于待烫部位,于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤,致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准:a.皮肤大体观察:致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好,有少量红褐**素沉着,皮肤轻微挛缩,表皮光滑;致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好,皮肤瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮肤组织病理学观察:致伤3s大鼠表皮层次尚清楚,细胞明显肿胀、变性,层次结构尚清楚,细胞核结构不清;致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落,结构不清,明显变性、坏死,部分细胞已溶解上海东寰为您提供完善的小鼠动物疾病模型。奉贤区纤维化疾病动物模型建模
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实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测水平是指:检测雌(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。南京视觉疾病动物模型建模