注意事项浓度控制:根据实验需求和细胞类型,严格控制HEPES的浓度。一般来说,培养液内含20mmol/L HEPES即可达到良好的缓冲效果。pH调节:在配制含有HEPES的培养基时,需要准确调节pH值至适合细胞生长的范围内。储存条件:配制好的含有HEPES的培养基应存放在适当的温度下,避免长时间暴露于空气中或受到污染。综上所述,HEPES缓冲体系具有***的缓冲范围、CO2无关性、低毒性、稳定性强和膜不透性等优势,在细胞培养和其他生物化学研究中发挥着重要作用。通过合理控制HEPES的浓度和配制方法,可以维持细胞培养环境的pH稳定,提高细胞的生长和代谢效率。注射用HEPES国产缓冲液CDE已登记实验室询价。河北药用HEPES市场价格

HEPES,全称为4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸,又名N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸或N-2-Hydroxyethylpiperazine-N-2-EthaneSulfonicAcid,是一种在生物化学和分子生物学领域中广泛应用的化学物质。以下是对HEPES的详细介绍:配制方法单一HEPES溶液:可以配制单纯的HEPES+NaOH溶液。例如,要配制500ml 1M HEPES,pH=7.0的溶液,可以将119.15g HEPES溶解在400ml蒸馏水中,加0.51M的NaOH水溶液调节至所需pH(HEPES的有效pH范围是6.88.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。HEPES+盐溶液:也可以配制含有其他成分的HEPES溶液。例如,将HEPES、NaCl、Na2HPO4·7H2O等按一定比例溶解在蒸馏水中,用NaOH调节pH值后定容。黑龙江采购HEPES使用注意事项注射用HEPES缓冲液中美双报企业采购。

在RNA研究中的注意事项HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高浓度会干扰逆转录反应。建议在RNA提取阶段使用Tris-EDTA缓冲液替代。HEPES在RNA电泳中常用作缓冲液,其低离子强度减少了对RNA迁移的干扰。在体外转录反应中,HEPES缓冲液能维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES可能结合某些金属离子,影响依赖金属离子的RNA酶活性。HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。过氧化物会氧化敏感的生物分子,如硫醇基团和某些荧光染料。长期储存的HEPES溶液应分装并避免反复冻融。商业化的HEPES粉末也应避光保存,因其在光照下会逐渐降解。HEPES溶液的pH会随时间缓慢变化,建议使用前重新校准。
对细胞的保护作用降低细胞毒性:某些化学物质在培养基中容易产生细胞毒性,影响细胞的生长和繁殖。HEPES能够降低这些化学物质的细胞毒性,从而保护细胞免受损伤。形成保护层:HEPES分子还可以通过吸附在细胞表面,形成一层保护层,减少细胞间的摩擦和碰撞,降低细胞的损伤风险。这有助于提高细胞的生存率和实验结果的可靠性。综上所述,HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是通过其两性离子特性增加溶液离子浓度和渗透压,以及通过其稳定的缓冲能力维持细胞生长所需的pH环境。此外,HEPES还能降低细胞毒性、形成保护层等,对细胞具有保护作用。这些特性使得HEPES成为细胞培养中不可或缺的缓冲剂之一。注射用HEPESCDE已登记;

4. 在电生理实验中的关键作用HEPES常用于膜片钳实验,其低离子强度特性可减少电流噪声。建议与NaCl、KCl等电解质配合使用,终浓度不超过20 mM以避免膜电位干扰。5. 蛋白质纯化中的缓冲选择HEPES缓冲液(pH 7.5)适用于离子交换层析,因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用,以防金属离子沉淀。光敏感性与储存条件HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记。云南HEPES价格
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用途细胞培养:HEPES在细胞培养中发挥着重要作用,能够维持培养液的pH稳定,提高细胞存活率。特别适用于长时间培养、开放环境培养以及对pH变化敏感的细胞系。生物和生化研究:由于HEPES具有稳定的pH控制能力和广泛的应用范围,它还被用于大多数金属离子的研究、环境和生物学研究、阳离子交换色谱中的缓冲液和洗脱液、植物研究、凝胶电泳中的缓冲液、电穿孔的缓冲液等。其他应用:此外,HEPES还用于哺乳动物细胞培养、体外受精和胚胎培养的缓冲液、二辛可宁酸(BCA)分析以及一些软骨两栖动物的研究等。河北药用HEPES市场价格