在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。关于HEPES缓冲溶液的配制,不同的文献资料有不同的说法。根据用途,一种是单纯的HEPES+NaOH,另一种是HEPES+盐。注射级,低内***、国产化稳定供应、高性价比注射级HEPES!浙江备案登记号HEPES医院采购
从产品类型方面来看,纯度98%占有重要地位,预计2028年份额将达到%。同时就应用来看,生物行业在2021年份额大约是%,未来几年CAGR大约为%从生产商来说,全球范围内,HEPES缓冲液**厂商主要包括Hopax、ThermoFisher、OttoChemiePvtLtd、FUJIFILMIrvineScientific和Avantor等。2021年,全球***梯队厂商主要有Hopax、ThermoFisher、OttoChemiePvtLtd和FUJIFILMIrvineScientific,***梯队占有大约%的市场份额;第二梯队厂商有Avantor、BioSpectra,Inc、QualityBiologicalInc和Suvchem等,共占有%份额。浙江备案登记号HEPES医院采购国内AVT稳定供货注射级HEPES!
生物缓冲剂HEPES粉末事实证明,HEPES优于碳酸盐缓冲液等其他缓冲液,可以避免二氧化碳释放导致细胞微细化生长,因此在细胞培养中频繁使用。HEPES的PH值随温度下降而下降,但磷酸盐与碳酸氢盐缓冲液的解离常数pK几乎不随温度变化。HEPES的行为与水相似,温度降低解离常数降低,HEPES可用于维持酶在低温下的结构和功能。HEPES为白色结晶粉末,纯度高、质量好,主要含量在99.50%以上,铁离子在5ppm以下,硫酸盐在0.05%以下,重金属残留量在10ppm以下。提供少量试用样品粉末,可自行配置于溶液中检测使用。
缓冲溶液(德语:Pufferlösung;英语:buffersolution;法语:solutiontampon)指由“弱酸及其共轭碱之盐类”或“弱碱及其共轭酸之盐类”所组成的缓冲对配制的,能够在加入一定量其他物质时减缓pH改变的溶液。前述定义中之所以要两种成对物质,是因为反应可以同时朝向酸或碱来缓冲,举例醋酸与醋酸钠的混合溶液就是缓冲溶液。若加盐酸,pH不会下降太快,因为盐酸会跟醋酸钠反应,生成醋酸。相反,若加氢氧化钠,pH也不会增加太快,因为氢氧化钠会跟醋酸反应,生成醋酸钠。在许多化学反应中,缓冲溶液被用于使溶液的pH值保持恒定。缓冲溶液对生命的产生与进化具有重要意义,因为多数生物都只能在一定pH范围内生长,例如血液就是一种缓冲溶液。国内艾伟拓稳定供货注射级HEPES!
关于HEPES缓冲溶液的配制,不同的文献资料有不同的说法。根据用途,一种是单纯的HEPES+NaOH,另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下:一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。二、加少量盐的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液调节pH值,***定容。三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5MNaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。国内艾伟拓注射用HEPES已登记。浙江备案登记号HEPES医院采购
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储存方法:HEPES缓冲液在2-8℃下可保存1年。注意事项:HEPES缓冲液运输时需要加冰袋。但储存时避免冷冻,否则会有盐类物质析出。N-三(羟甲基)甲基甘氨酸Tricine,CAS是5704-04-1,是一种两性离子缓冲液,名字由Tris和glycine衍生而来,结构类似于Tris,但是高浓度具有比Tris更弱的抑制性,也是“Good”缓冲液之一,**初开发用于提供叶绿体反应的缓冲体系。Tricine的有效pH缓冲范围为7.4-8.8,pKa=8.1(25℃),常用做电泳缓冲液,以及用来重悬细胞沉淀。Tricine具有低负电荷和高离子强度的特性,非常适用于电泳分离1~100kDa的低分子量蛋白。基于萤火虫荧光素酶的ATP分析实验中,比较10种常见的缓冲液,Tricine(25mM)表现出比较好的检测效果。另外,在自由基诱导的膜损伤实验中,Tricine还是一种有效的羟自由基清除剂。作者:泰安格林化工链接:浙江备案登记号HEPES医院采购
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